袁雨
- 作品数：9 被引量：39H指数：4
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金高等学校学科创新引智计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 缺氧诱导滋养细胞野生型p53诱导磷酸酶上调代偿凋亡的机制
- 2019年
- 目的探讨野生型p53诱导磷酸酶(wild-type p53-induced phosphatase, Wip1)依赖p53途径调控滋养细胞凋亡的机制,为子痫前期发病机制提供新的研究方向。方法收集2017年6月至2018年12月于重庆医科大学附属第一医院剖宫产分娩的正常孕妇(15例)与子痫前期孕妇(13例)的胎盘组织,收集早孕期(10例)人工流产者的绒毛和蜕膜组织;取绒毛外滋养细胞株HTR8/SVneo细胞,采用物理缺氧和化学缺氧方法进行缺氧培养。利用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应分别检测胎盘组织中Wip1蛋白和mRNA水平;免疫组织化学方法和免疫荧光法检测Wip1组织细胞定位;采用病毒感染和缺氧干扰Wip1表达后,通过流式细胞技术检测细胞凋亡水平变化,蛋白质印迹法检测p53、磷酸化p53(phospho-p53, p-p53)、鼠双微同源体2(mouse double minute 2 homolog,Mdm2)和切割型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase3, cl-cas3)凋亡通路相关分子的变化,并利用免疫共沉淀检测Wip1对Mdm2与p53相互作用的影响,并结合运用Mdm2-p53特异性抑制剂NVP-CGM097封闭结合位点进一步验证Wip1经Mdm2-p53途径调控滋养细胞凋亡。采用Student-t检验、Welch's-t检验和单因素方差分析进行统计学分析。结果(1)胎盘组织中Wip1主要表达于滋养细胞,在子痫前期胎盘(mRNA:1.711±0.141与0.860±0.126,t=4.496;蛋白:0.449±0.027与0.192±0.019,t=7.902)和物理缺氧(蛋白:1.376±0.086与0.977±0.114,t=2.792)、化学缺氧(蛋白:1.243±0.057与0.381±0.045,t=11.910)培养细胞中较相应对照组显著上调(P值均<0.05)。(2)与不影响Wip1表达的相应对照组比较,过表达Wip1可降低p53蛋白(物理缺氧:0.185±0.024与0.572±0.072;化学缺氧:0.400±0.067与0.803±0.064)、cl-cas3蛋白(物理缺氧:0.243±0.034与0.529±0.072;化学缺氧:0.179±0.011与0.368±0.025)和p-p53/53水平(物理缺氧:1.326±0.129与2.100±0.187;化学缺氧:0.473±0.028与0.925±0.036),降低细胞凋亡�
- 谭彬童超袁雨林俐漆洪波
- 关键词：细胞低氧滋养层
- 妊娠期糖尿病对大鼠雌性子代缺血再灌注后心脏收缩功能的影响及其机制被引量：5
- 2016年
- 目的利用大鼠模型探讨妊娠期糖尿病(GDM)对雌性子代心脏功能的影响及潜在机制。方法雌性野生型SD大鼠在妊娠中期给予腹腔注射链脲佐菌素(35 mg/kg)建立GDM模型(GDM组),另设正常对照组。分娩后,雌性F1子代饲养至24周,期间测定随机血糖、血压和心率,进行葡萄糖耐量试验、胰岛素耐量试验。构建心脏离体缺血再灌注(I/R)模型,Western blotting检测心脏蛋白激酶B(Akt)、腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)信号通路。结果 GDM组雌性F1子代离体I/R后心脏收缩功能显著低于正常对照组(P=0.048 6);Western blotting显示离体I/R后GDM组雌性F1子代大鼠心脏AMPK和ACC磷酸化水平显著低于正常对照组(P=0.005 6)。结论 GDM可引起子代雌性大鼠对心脏I/R损伤不耐受,这可能与其心脏AMPK磷酸化对I/R刺激反应迟钝有关。
- 邹虹姜小雪王寒冰袁雨罗晓芳谭彬张华Philip N Baker童超漆洪波
- 关键词：妊娠期糖尿病子代心脏缺血再灌注
- ACK1在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其对滋养细胞侵袭功能的调控被引量：6
- 2019年
- 目的:研究活化的Cdc42结合激酶(activated Cdc42 associated kinase,ACK1)在正常足月孕妇胎盘与子痫前期(preeclampsia,PE)孕妇胎盘组织中的表达差异及其对滋养细胞功能的调控作用,探讨其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2015年10月至2016年10月在重庆医科大学附属第一院产科行计划性剖宫产手术的23例正常足月孕妇胎盘和23例PE孕妇胎盘组织,使用免疫组化(immunohistochemistry,IHC)及蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测胎盘组织中ACK1的表达及差异情况。滋养细胞株(HTR8/SVneo)分为3组:常氧对照组(N组)、缺氧/复氧组(H/R组)及ACK1基因序列慢病毒敲降组(ACK1 shRNA组),使用Transwell实验分析检测各组细胞的侵袭情况,采用流式细胞仪检测各处理组细胞凋亡率。使用Western blot检测各组细胞中ACK1蛋白,金属蛋白质酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9及其特异性抑制因子(the tissue inhibitor of metalloproteinase,TIMP)-2的蛋白表达差异。结果:与正常足月孕妇胎盘比较,ACK1在人类子痫前期胎盘中表达明显降低(t=3.890,P=0.018)。细胞学实验中,与N组比较,ACK1 shRNA组和H/R组ACK1蛋白表达明显降低(t=12.260,P=0.000;t=10.740,P=0.000),ACK1 shRNA组和H/R组MMP9蛋白表达均明显降低(t=8.071,P=0.000;t=7.745,P=0.001),TIMP1蛋白表达显著升高(t=10.690,P=0.000;t=14.330,P=0.000)。ACK1 shRNA组和H/R组细胞迁移至下室的细胞数明显减少(t=12.260,P=0.000;t=11.320,P=0.000),H/R组细胞凋亡率显著升高(t=2.260,P=0.000),但ACK1 shRNA组细凋亡率无明显改变(t=8.317,P=0.088)。结论:ACK1的表达下调可抑制滋养细胞的侵袭,可能在子痫前期发病机制中有重要的作用。
- 刘洋铭车平袁雨谭彬王平珍漆洪波单楠
- 关键词：子痫前期
- piR-3127964经PIWIL-3/载唾液酸蛋白途径调控滋养细胞侵袭力的机制
- 2023年
- 目的研究子痫前期与非病理妊娠胎盘组织之间差异表达的piR-3127964调控滋养细胞侵袭力的分子机制。方法收集2020年11月至2021年8月于重庆医科大学附属第一医院产科就诊的非病理性早产(对照组,n=12)与子痫前期孕妇(子痫前期组,n=10)经剖宫产分娩的胎盘以及早孕期人工流产者的绒毛组织(早孕期人工流产组,n=10)。提取对照组和子痫前期组胎盘组织的总RNA进行测序,利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative-polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测piR-3127964在各类组织中的相对表达量。利用蛋白质印迹法检测3组中PIWIL-1、PIWIL-2和PIWIL-3的表达量。外源性调节HTR-8/SVneo细胞内piR-3127964的水平,通过qRT-PCR检测下游候选靶分子,即鸟嘌呤核苷酸结合蛋白样3-样蛋白(guanine nucleotide-binding protein-like 3-like,GNL3L)和载唾液酸蛋白(sialophorin,SPN)mRNA的相对表达量,利用qRT-PCR检测GNL3L和SPN mRNA在对照组和子痫前期组胎盘组织中的相对表达量。进一步通过双荧光素酶报告基因试验验证上述两者与piR-3127964的相互作用。通过荧光原位杂交和免疫荧光结合的方式明确piR-3127964和SPN在早孕期人工流产组绒毛组织中的定位。通过Transwell细胞侵袭实验探究piR-3127964对HTR-8/SVneo细胞侵袭能力的影响和潜在机制。采用独立样本t检验及单因素方差分析及LSD事后检验对数据进行统计学分析。结果(1)差异表达的piR-3127964预测的下游靶基因的富集通路与细胞运动相关;piR-3127964在早孕期人工流产组绒毛、对照组和子痫前期组胎盘组织中差异有统计学意义(分别为2.950±0.853、1.036±0.303与0.254±0.155,F=27.35,P<0.05);且piR-3127964定位于早孕期人工流产组绒毛的绒毛外滋养细胞(extravillous cytotrophoblasts,EVTs)中。(2)子痫前期组胎盘组织中PIWIL-3蛋白表达量明显低于对照组胎盘组织和早孕期人工流产组绒毛组织(0.810±0.400与3.
- 康翼袁雨林俐谭彬谭彬
- 关键词：子痫前期
- IL-27及其受体在未足月胎膜早破发病中的相关研究
- 2017年
- 目的:探讨白介素-27(interleukin-27,IL-27)及其特异性受体WSX-1/TCCR诱导人胎膜组织产生炎性效应在未足月胎膜早破中的作用。方法:(1)将手术室收集到的胎膜组织分为正常足月组和未足月胎膜早破组,将培养的胎膜组织分为对照组、实验组(IL-27处理12 h组以及IL-27处理24 h组);(2)Western blot和免疫组化分析WSX-1在未足月胎膜早破早产和正常足月孕妇胎膜组织中的表达;(3)培养原代人胎膜组织,鉴定其是否存活;(4)IL-27处理培养的胎膜组织,提取处理的人胎膜组织蛋白,用荧光定量PCR和明胶酶谱检测MMP2、MMP9的表达。结果:(1)IL-27特异性受体WSX-1在未足月胎膜早破早产孕妇胎膜组织中的表达明显高于正常足月孕妇(P=0.0149);(2)成功培养原代人胎膜组织;(3)人重组IL-27蛋白刺激胎膜组织后MMP2、MMP9的表达明显升高。结论:IL-27可诱导人胎膜组织产生炎性效应,增强MMP2和MMP9的表达,参与未足月胎膜早破早产的发病。
- 王寒冰尹楠林袁雨漆洪波
- 关键词：胎膜组织
- 类固醇受体辅助活化因子-3通过PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子痫前期发病机制中的作用研究被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨类固醇受体辅助活化因子-3(steroid receptor coactivator-3,SRC-3)参与人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)受损的信号通路,及其在子痫前期发病机制中的作用。方法:收集2014年10月至2015年10月在重庆医科大学附属第一医院行选择性剖宫产手术的正常足月妊娠组(31例)以及子痫前期组(29例)的胎盘组织。使用Western blot检测2组胎盘组织SRC-3的表达。脐静脉内皮细胞株(HUVECs)分为4个处理组:正常常氧对照(N)培养组、缺氧/复氧(H/R)培养组、SRC-3 sh RNA慢病毒敲降(sh SRC-3)培养组以及PI3K特异性抑制剂(LY294002)培养组。使用Western blot检测内皮细胞中SRC-3、p-Akt(Ser473)、Akt、p-m TOR(Ser2481)、m TOR的表达。使用细胞管腔成型实验检测内皮细胞血管形成能力。结果:SRC-3在子痫前期胎盘组织蛋白水平低于正常足月胎盘(t=3.501,P=0.013)。细胞学实验中,与N组相比,H/R组、sh SRC-3组及LY294002组HUVECs的SRC-3(t=4.236,P=0.007;t=5.469,P=0.002;t=4.165,P=0.008)、p-Akt(Ser473)/Akt(t=5.214,P=0.002;t=5.188,P=0.002;t=7.054,P=0.000)、p-m TOR(Ser2481)/m TOR(t=4.832,P=0.003;t=5.695,P=0.001;t=5.699,P=0.001)表达降低。H/R组、sh SRC-3组、LY294002组HUVECs血管形成能力低于N组(t=5.268,P=0.002;t=4.648,P=0.004;t=4.087,P=0.009)。结论:SRC-3可能通过PI3K/Akt/m TOR通路参与子痫前期的发病机制。
- 袁雨单楠谭彬刘洋铭何承晋漆洪波
- 关键词：子痫前期血管内皮TOR
- 英国皇家妇产科医师学会《脐带脱垂指南》2014版要点解读被引量：13
- 2015年
- 脐带脱垂是在胎膜破裂情况下,脐带脱至子宫颈外,位于胎先露一侧（隐性脐带脱垂）或越过胎先露（显性脐带脱垂）,是导致围产儿死亡的重要原因,发生率为0.1%-0.6%[1]。导致脐带脱垂的主要原因包括胎位不正、多次分娩、胎膜早破、羊水过多、产科干预等因素,其导致的胎儿不良结局包括早产、新生儿窒息甚至新生儿死亡。鉴于脐带脱垂引起妊娠不良结局的严重性以及脐带脱垂临床诊断和处理的不规范,
- 袁雨漆洪波
- 关键词：脐带脱垂产科干预
- 结合中国实践谈WHO 2016年孕期保健指南被引量：14
- 2017年
- WHO于2016年发布了新版的孕期保健指南,该指南根据全球各地区医疗水平,特别是发展中国家的孕期保健状况,针对孕期保健的5个方面提出了39项相关建议,并通过相关证据更新了部分观点。文章结合我国目前孕期保健现状,分析WHO指南与我国现行孕期保健方案的异同,从而更好地指导和完善我国孕期保健流程。
- 袁雨漆洪波
- 关键词：孕期保健世界卫生组织
- 英国皇家妇产科医师学会(RCOG)“脐带脱垂指南2014版”要点解读
- 袁雨漆洪波
