陈华翠 作品数:10 被引量:40 H指数:4 供职机构: 广州市第一人民医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 广州市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
巨细胞病毒嵌合癌胚抗原介导单纯疱疹病毒胸苷激酶联合丙氧鸟苷自杀基因体系靶向性治疗结肠癌的效果 被引量:1 2015年 目的观察巨细胞病毒(CMV)嵌合以癌胚抗原为启动子,以腺病毒为载体的单纯疱疹病毒胸苷激酶基因重组构建体Ad-CMV-CEA-HSV/TK联合丙氧鸟苷(GCV)体内抗结肠癌的疗效。方法构建人结肠癌裸鼠移植瘤模型,按不同浓度梯度Ad-CMV-CEA-HSV/TK(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg)经尾静脉注射带瘤小鼠后,腹腔注射相同浓度GCV(50 mg/kg),并设空白对照组及不同浓度的Ad-CEA-HSV/TK/GCV对照(1.0×109/kg、5.0×109/kg、10.0×109/kg),共设A^G 7组,每组各10只小鼠。观察肿瘤体积、重量、肿瘤体积-时间曲线、肿瘤抑制率及生存期。结果 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV及Ad-CEA-HSV/TK/GCV对人结肠癌裸鼠移植瘤生长均具有抑制作用,对移植瘤的体积及重量抑制呈作用物浓度依赖性;且Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV抑制能力较Ad-CEAHSV/TK/GCV显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Ad-CMV-CEA-HSV/TK/GCV体系对结肠癌具有明确的实验性治疗作用,为人结肠癌及结肠癌远处转移灶的Ⅰ期临床治疗试验提供科学实验依据,具有广阔的临床应用前景。 王成兴 曾山崎 杨平 张通 魏建昌 陈华翠 曹杰关键词:结肠癌 巨细胞病毒 癌胚抗原 藤黄酸体外诱导人结直肠癌细胞凋亡的机制 被引量:4 2018年 目的探讨藤黄酸对体外培养人结直肠癌细胞株增殖凋亡的影响以及诱导凋亡的可能机制。方法 CCK-8法检测不同浓度(0、1、2、4μmol/L)不同时间点(0、24、48、72 h)藤黄酸处理对人结直肠癌细胞株(SW480、LOVO细胞)增殖活性影响;流式细胞术检测细胞凋亡情况;免疫荧光检测细胞Cleaved caspase-3表达;Western blot技术检测Bax、Bcl-2、细胞色素C、多聚ADP核糖聚合酶和Cleaved caspase-3蛋白的表达。结果藤黄酸对SW480、LOVO细胞均有显著的增殖抑制作用,抑制率与药物浓度和作用时间呈正相关;相同处理时间,随着藤黄酸浓度增加,细胞凋亡的百分比增加;免疫荧光染色发现藤黄酸作用24 h后,细胞Cleaved caspase-3表达增加;藤黄酸处理SW480/LOVO细胞后,Bax/Bcl-2比值、细胞色素C、多聚ADP核糖聚合酶和Cleaved caspase-3蛋白表达均明显增加。结论藤黄酸可能通过激活线粒体凋亡通路体外诱导人结直肠癌细胞株的凋亡。 张通 杨平 魏建昌 陈华翠 李旺林 钟俊斌 曹杰关键词:藤黄酸 结直肠癌 BAX 细胞色素C CASPASE-3 藤黄酸对人结直肠癌细胞凋亡及Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响 被引量:11 2016年 目的:研究藤黄酸对结直肠癌细胞凋亡及Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法:藤黄酸对SW480、LOVO细胞进行干预,CCK-8法检测增殖抑制;光镜观察细胞形态变化;免疫荧光染色技术检测凋亡;Western Blot法测定Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达。结果:藤黄酸抑制SW480、LOVO细胞增殖,且抑制作用随浓度及时间的增加而增强(P<0.05);藤黄酸诱导SW480、LOVO细胞发生凋亡,增强Bax、Caspase-3蛋白的表达,减弱Bcl-2蛋白的表达,提高Bax/Bcl-2比值(P<0.05)。结论:藤黄酸抑制SW480、LOVO细胞增殖并诱导凋亡,其机制可能与提高Bax/Bcl-2比值、激活Caspase-3相关。 魏建昌 张通 杨平 曾山崎 王成兴 陈华翠 曹杰关键词:结直肠肿瘤 藤黄酸 BAX/BCL-2 CASPASE-3 白介素17对人结肠癌细胞侵袭能力的影响 被引量:5 2016年 目的探讨白介素17(IL-17)对人结肠癌细胞株SW480和LOVO细胞增殖、侵袭和迁移能力的作用,以及可能的机制。方法根据外源性人IL-17是否作用于人结肠癌细胞株SW480和LOVO,分为4组细胞:SW480对照组(SW480细胞)、LOVO对照组(LOVO细胞)、SW480实验组(50μg/LIL-17处理SW480细胞)和LOVO实验组(50μg/LIL-17处理LOVO细胞)。CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞增殖率(%)=[(A实验组-A空白组)/(A对照组-A空白组)]×100%;Transwel]实验检测各组细胞侵袭和迁移能力,实时定量聚合酶链反应(realtime.PCR)检测各组细胞血管内皮生长因子(VECF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)mRNA的表达,蛋白质印迹(western blot)检测各组细胞信号传导与转录激活因子3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)、VEGF和MMP-9蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞上清液中VEGF、MMP-9蛋白的含量。结果培养24h、48h和72h后,实验组SW480细胞的增殖率分别为1.18%±0.07%、1.42%±0.09%和1.62%±0.08%,LOVO细胞的增殖率分别为1.13%±0.02%、1.32%±0.05%和1.73%±0.02%。Transwell实验显示,IL-17作用24h后.SW480实验组和LOVO实验组侵袭细胞个数分别为34.00±0.45和41.60±0.51,多于对照组(分别为4.53±0.14和3.67±0.33),差异有统计学意义(SW480:t=76.026,P=0.001;LOVO:t=-81.580,P=0.005);SW480实验组和LOVO实验组迁移细胞个数分别为36.40±0.51和46.40±0.68,多于对照组(分别为7.83±0.69和6.67±0.48),差异有统计学意义(SW480:t=-51.542,P=O.003;LOVO:t=-49.265,P=0.005)。实时定量聚合酶链反应结果显示,IL-17作用24h后,SW480实验组细胞VEGF、MMP-9mRNA相对表达量分别为1.53±0.12和2.44±0.23.高于SW480对照组(均为1.00),差异均有统计学意义(VEGF:t=3. 陈转鹏 曹杰 杨平 刘振邦 魏建昌 陈华翠 丘旭彬 胡鹤关键词:白介素17 结肠肿瘤 信号传导与转录激活因子3 藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖及Gankyrin表达的影响 被引量:4 2016年 目的观察藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞增殖和Gankyrin表达的影响,探讨其抑制人结肠癌生长增殖的作用机制。方法以1.0、2.0、4.0μg/mL的藤黄酸作用体外培养的人结肠癌HCT116细胞,并设未予藤黄酸处理的对照组。处理12、24、36 h后,分别采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡率,Western blot检测Gankyrin蛋白水平的变化。结果藤黄酸对人结肠癌HCT116细胞生长增殖具有抑制作用,且呈浓度和时间依赖性,相同浓度不同时间点的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度相同时间点的抑制率差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪结果提示,藤黄酸阻滞HCT116细胞于G2/M期,1.0、2.0、4.0μg/mL的藤黄酸处理24 h后,处于G2/M期的细胞数量均较对照组明显增加,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);HCT116细胞的凋亡率随藤黄酸浓度增加而逐步上升,2.0、4.0μg/mL的藤黄酸处理后HCT116细胞的凋亡率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。用不同浓度的藤黄酸处理HCT116细胞24 h,Gankyrin蛋白水平随药物浓度的增加而下降(P<0.05)。结论藤黄酸能够抑制人结肠癌HCT116细胞的生长增殖,诱导HCT116细胞阻滞于G2/M期,使Gankyrin的表达水平下降,其诱导肿瘤细胞凋亡的作用可能与抑制Gankyrin的表达相关。 邱旭彬 曹杰 杨平 曾山崎 王成兴 吴乾龙 陈华翠关键词:人结肠癌 HCT116细胞 藤黄酸 RNA干扰血管内皮生长因子受体2基因表达提高结肠癌细胞对奥沙利铂敏感性的研究 被引量:1 2017年 目的研究RNA干扰血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)基因表达对人结肠癌细胞生长的抑制作用和对奥沙利铂的化疗增敏作用。方法构建靶向VEGFR-2基因的小分子干扰RNA(siRNA)表达质粒并转染人结肠癌细胞株SW480;通过RT-PCR和Western blot方法检测VEGFR-2 siRNA对人结肠癌细胞株SW480 VEGFR-2mRNA和蛋白表达的影响;采用MTT实验和流式细胞术检测该siRNA及协同奥沙利铂对细胞增殖及凋亡的影响。结果 VEGFR-2 siRNA显著下调结肠癌细胞VEGFR-2 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。VEGFR-2 siRNA协同奥沙利铂使结肠癌细胞的生长变得更加缓慢,增殖受到明显抑制,细胞抑制及凋亡明显增强(P<0.05)。结论RNA干扰VEGFR-2基因表达可以抑制人结肠癌细胞株SW480的增殖,促进其凋亡,并能提高结肠癌细胞对奥沙利铂的敏感性。 杨平 魏建昌 陈华翠 张通 曾山崎 曹杰关键词:结肠癌 血管内皮生长因子受体2 小分子干扰RNA 奥沙利铂 非编码RNA在胃肠肿瘤微环境中免疫细胞的作用机制研究 2023年 目的观察长链非编码RNA(long-non-coding RNA,lncRNA)在胃肠肿瘤微环境中免疫细胞的作用机制,明确lncRNA以及同源基因HOXA远端转录本(HOXAtranscript at the distal tip,HOTTIP)、甘油醛-3磷酸脱氢酶(glycaraldehyde-3Phosphate dehydrogenase,GAPDH)在胃肠肿瘤中的表达。方法本研究为大鼠试验,于2022年4—12月选择100只成年雄性大鼠作为研究对象,长期喂养高硝酸盐食物,形成胃肠肿瘤后,进行胃癌手术或者结肠癌手术,探讨非编码RNA(non-coding,ncRNA)在胃肠肿瘤细胞中的表达并与癌旁组织表达能力对比,基于表达能力的不同,对比胃肠肿瘤大鼠的生存时间,最后对比RUNX1-IT1与Lv-NC细胞迁移增殖能力。结果lncRNA及同源基因在胃肠肿瘤中的表达结果中,HOTTIP在胃癌组织中的表达为(3.99±1.05),在癌旁组织的表达为(3.50±1.03),差异有统计学意义(t=2.356,P=0.021)。HOTTIP与GAPDH的引物都表现为单峰,有着较高的特异性;lncRNA及其同源基因在胃肠肿瘤预后中,使用Kaplan-Meier对预后与基因表达关系进行的研究中总生存率比较,差异无统计学意义(P>0.05);在迁移实验及增殖实验中Lv-RUNX1-IT1细胞的迁移能力和增殖能力都有所降低。结论非编码RNA在胃肠肿瘤微环境当中,可有效抑制胃肠肿瘤细胞表达,对大鼠生存时间未造成较大影响,Lv-RUNX1-IT1细胞的迁移能力和增殖能力有所降低。 钟俊斌 魏建昌 王强 杨平 张通 陈华翠关键词:非编码RNA 同源基因 胃肠肿瘤 免疫细胞 直肠癌新辅助放化疗前后血清癌胚抗原与糖类抗原724的变化及临床意义 被引量:1 2018年 目的探讨直肠癌患者新辅助放化疗前后血清癌胚抗原(CEA)及糖类抗原724(CA724)水平的变化及临床意义。方法应用电化学发光法检测30例直肠癌患者(研究组)新辅助放化疗前后血清CEA与CA724的水平,并与30例健康人(对照组)作比较。结果研究组新辅助放化疗前血清CEA、CA724水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。新辅助放化疗8周后,完全缓解组及部分缓解组化疗后CEA、CA724水平均较化疗前明显减低,差异有统计学意义(P<0.05),降低程度明显高于稳定组,差异有统计学意义(P<0.05);稳定组化疗后CEA、CA724较化疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05);进展组化疗后CEA、CA724水平均较化疗前升高,差异有统计学意义(P<0.05);化疗前CEA、CA724水平呈正相关关系(r=0.862,P=0.000)。结论直肠癌患者血清中CEA、CA724均高表达,两者与直肠癌的发生、发展密切相关,测定直肠癌患者新辅助放化疗前后血清CEA、CA724水平的变化有助于临床判断新辅助放化疗疗效及肿瘤进程。 杨平 魏建昌 张通 陈华翠 曾山崎 曹杰关键词:直肠癌 新辅助放化疗 癌胚抗原 藤黄酸对结直肠癌LOVO细胞增殖和血管生成素样蛋白4表达的影响 被引量:4 2015年 目的研究藤黄酸对结直肠癌LOVO细胞生长增殖和血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)表达的影响,探讨藤黄酸可能的抗肿瘤机制。方法采用不同浓度的藤黄酸干预结直肠癌LOVO细胞,分别于12、24、36 h后应用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期分布和细胞凋亡情况,Western blot检测ANGPTL4蛋白表达。结果藤黄酸对结直肠癌LOVO细胞的生长和增殖具有抑制作用,该抑制作用呈现浓度依赖性和时间依赖性(P<0.05)。藤黄酸阻滞LOVO细胞于G2/M期,阻滞作用呈现浓度依赖性(P<0.05)。高浓度藤黄酸能够诱导LOVO细胞凋亡(P<0.05)。藤黄酸抑制LOVO细胞ANGPTL4蛋白表达,ANGPTL4蛋白表达随藤黄酸作用浓度的增加而减少(P<0.05)。结论藤黄酸能够抑制结直肠癌LOVO细胞的生长和增殖,阻滞LOVO细胞于G2/M期,并诱导细胞凋亡,其作用机制可能与抑制ANGPTL4表达相关。 魏建昌 曹杰 杨平 曾山崎 王成兴 邱旭彬 陈华翠关键词:藤黄酸 结直肠癌 外周血循环肿瘤细胞检测在结直肠癌转移早期诊断中的应用 被引量:10 2017年 目的 检测外周血循环肿瘤细胞(CTC)在不同分期结直肠癌(CRC)患者的表达情况,探讨其在结直肠癌转移早期诊断中的意义.方法 选取2014年1月至2015年12月住院治疗的CRC患者60例(Ⅱ~Ⅲ期42例,Ⅳ期18例)和直肠良性疾病患者30例.采用免疫磁珠富集分离技术和免疫荧光原位杂交技术(imFISH)检测CTC数目,同时应用电化学发光法检测癌胚抗原(CEA)的表达水平,分析CTC与CEA的相关性.结果 CRC患者外周血CTC阳性率[CTC≥1、5、10的阳性率分别为73.33%(44/60)、35.00%(21/60)、16.67%(10/60)]显著高于良性疾病对照组[13.33%(4/30)];Ⅳ期CRC患者外周血CTC的阳性率显著高于Ⅱ~Ⅲ期患者;CRC患者外周血CTC数量与血清CEA水平呈明显正相关(r=0.6652,P〈0.01).结论 CRC患者CTC的表达显著高于良性疾病患者,且与临床分期密切相关,外周血CTC检测对CRC转移的早期诊断具有重要的临床意义. 杨平 魏建昌 张通 陈华翠 曾山崎 曹杰关键词:结直肠肿瘤 癌胚抗原