刘宁
- 作品数：6 被引量：33H指数：3
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- 线栓法大鼠MCAO模型的实验研究被引量：23
- 2013年
- 目的对大鼠线栓法脑缺血模型进行改进,评价短暂性脑缺血模型和永久性脑缺血模型两种试验方法的效果。方法参照Zea-Longa改良法,制作大鼠局灶脑缺血模型,根据手术时间、成功率、病死率、神经功能评分、脑梗死体积百分比来比较两种模型。结果神经功能评分及脑梗死体积百分比两种方法并无明显差别,而永久性缺血模型组成功率和病死率高于短暂性缺血模型组,手术时间明显缩短。结论制备大鼠短暂性脑缺血模型和永久性脑缺血模型有各自的优点,术者应根据实际选择。
- 张小冲赵浩马建华刘宁
- 关键词：MCAO
- Pcdh11x蛋白对体外培养皮层神经元树突发育的影响
- 2016年
- 目的探讨Pcdh11x蛋白对神经元树突分支的影响。方法通过增加与敲低Pcdh11x的表达水平,评价Pcdh11x蛋白对神经元树突的影响。应用SPSS13.0软件使用单因素方差分析的方法对树突分支数量进行统计分析。结果培养3 d时,与对照质粒组(2.60±0.22)相比,pcdh11x-sh RNA转染组可明显增加一级(5.80±0.39)和二级(9.80±0.81)树突的数目,而pCAG-Pcdh11x-GFP转染组可减少一级(1.40±0.16)和二级树突(2.90±0.46)的数目。同时发现,过表达Pcdh11x时则会减少树突点的数目(3.11±0.51),而敲低Pcdh11x会增加树突点的数目(14.44±0.56)。通过Sholl分析发现过表达Pcdh11x时可减少树突终末分支的数目,而敲低Pcdh11x时可增加树突终末分支的数目。培养六天时,亦有相似结果。由此可见,过表达Pcdh11x可降低树突的复杂度,而抑制Pcdh11x的表达可增加树突的分支数量,增加其复杂度,因此,Pcdh11x蛋白负性调控小鼠体外培养的发育16 d胎脑源皮层神经元的的树突发育。结论 Pcdh11x蛋白抑制培养的皮层神经元一级、二级树突、树突点以及树突终末分支的发育。
- 吴翠莹张鹏牛力军陶庆霞刘宁王翀徐如祥
- 关键词：中枢神经系统
- 2种神经干细胞移植方法对宿主脑损伤和移植物维系的影响被引量：1
- 2015年
- 目的比较2种神经干细胞（NSCs）颅内移植方法对宿主脑损伤和移植物维系的影响。方法体外原代培养NSCs并用5-溴脱氧尿嘧啶核苷（Brdu）标记，将NSCs单细胞悬液（5×10^5个，5μL）定向注射到42只健康成年C57BL／6小鼠两侧大脑运动皮层内，左侧颅骨采用磨钻钻孔，右侧采用微量进样器钻孔。移植后1d、2d、3d、7d、14d、21d和28d采用随机数字表法各选取6只小鼠处死，观察脑大体标本，HE染色观察脑移植区的损伤，免疫荧光双重标记染色Brdu／神经元核抗原（NeuN）、Brdu／神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）分析脑移植区NSCs、神经元和星形胶质细胞的分布情况。结果（1）与微量进样器钻孔侧相比，磨钻钻孔侧脑组织结构破坏较严重，移植后1～3d神经细胞坏死明显，并伴有大量红细胞外溢及炎症细胞浸润，7d时可见瘢痕组织形成，直到28d仍可见较多瘢痕组织聚集在移植区。（2）移植后1～3dBrdu标记的NSCs分布较为集中，7～21d可见NSCs明显迁移并分化为神经元和星形胶质细胞．左侧脑移植区可见大量星形胶质细胞．而神经元分布较少，右侧则相反；（3）与左侧比较，右侧脑移植区各时间点Brdu、NeuN阳性细胞百分率较高，GFAP阳性细胞百分率较低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论采用微量进样器钻孔较磨钻钻孔能有效减轻移植损伤，明显提高NSCs存活率，有利于神经元生长，并减少胶质瘢痕形成。
- 高谋徐如祥杨志军董勤张洪钿朱建伟刘宁邹明明籍新潮
- 关键词：神经干细胞脑损伤星形胶质细胞
- 两种干细胞对颅脑创伤炎症反应调控作用的对比研究被引量：4
- 2015年
- 目的比较神经干细胞（neural stem cells,NSCs）与间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）移植对颅脑创伤（traumatic brain injury,TBI）后炎症反应的调控作用。方法将264只成年雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为假手术组（54只）和TBI组（162只）,采用自由落体脑打击装置制备TBI模型并于伤后12 h进行NSS评分,将3~7分者按随机数字表法分为3组,每组54只,于伤后24 h将离体培养的同品系小鼠成体NSCs、MSCs和PBS分别定向注射到创伤模型鼠脑内。于移植后24、72 h和7 d处死动物,取脑组织病理切片染色,观察脑损伤修复和免疫细胞浸润情况;分别提取脑组织mRNA和蛋白检测细胞因子表达量。结果 1NSCs或MSCs移植7 d后,脑损伤较PBS处理组局限,组织内渗出减少。2NSCs或MSCs移植72 h和7 d后,脑组织内浸润的小胶质细胞/巨噬细胞数量明显少于PBS处理组（P〈0.05）;NSCs移植7 d后,脑内浸润的T细胞数量明显少于PBS处理组（P〈0.05）。3MSCs移植后IL-6和TNF-αmRNA和蛋白水平在各时间点均低于PBS处理组（P〈0.05）;NSCs移植后IL-10 mRNA水平在24 h和72 h明显高于PBS处理组（P〈0.05）,其蛋白水平在72 h和7 d也较PBS处理组和MSCs移植组明显升高（P〈0.05）。结论 NSCs与MSCs可影响TBI后炎症反应中免疫细胞浸润和细胞因子表达,二者调控作用既有相同之处,也有明显差异。
- 高谋徐如祥杨志军董勤姚慧张洪钿杨阳刘宁陈晨朱建伟邹明明籍新潮
- 关键词：神经干细胞间充质干细胞颅脑创伤炎症反应细胞因子
- 不同穿刺点行子宫内电转对小鼠胚胎皮层发育的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨子宫内电转技术操作过程中三种不同的穿刺点对胚胎死亡率、皮层厚度和皮层面积,以及细胞分化、增殖、迁移和细胞凋亡的影响。方法通过应用免疫荧光染色对Tbr1,Tbr2,Pax6,Ctip2,Caspase-3和Ki67等标记物的检测分析,评价三种不同穿刺点对细胞分化、增殖、迁移和细胞凋亡的影响。应用SPSS13.0软件使用单因素方差分析的方法对分化、增殖和凋亡实验中的细胞数量进行统计分析。结果三种不同的穿刺点无论对胚胎死亡率、皮层厚度和皮层面积,还是细胞分化、增殖、迁移和细胞凋亡的影响均无统计学意义(P>0.05)。结论三种不同的穿刺点对宫内电转胚胎无显著性影响。
- 张鹏吴翠莹陶庆霞牛力军陈文锦刘宁徐如祥
- 关键词：基因转移技术穿刺点分化增殖
- 槲皮素促进小鼠脊髓损伤后轴突生长及功能恢复研究被引量：4
- 2016年
- 目的评价槲皮素对小鼠脊髓损伤后轴突生长及功能恢复的影响。方法 C57BL/6雌性小鼠24只,随机分为2组,各12只。将2组小鼠T10节段施以完全性脊髓钳夹伤,治疗组分别于损伤前30 min、损伤后即刻、损伤后1-10 d每天1次腹腔注射槲皮素(50 mg/kg),对照组则腹腔注射等量0.9%氯化钠溶液。于损伤后14 d将BDA神经示踪剂注入小鼠皮层感觉运动区,示踪皮质脊髓束,组织切片复染GFAP标记损伤边界。通过荧光显微镜观察损伤区近段皮质脊髓束轴突退缩及再生情况。在术后当日及1、3、7、14、28 d,采用BMS(Basso mouse scale)量表评价小鼠后肢及躯干运动功能。结果损伤后第28天,与对照组相比,槲皮素治疗组轴突出芽量化比值上升;神经轴缩球量化比值下降;传导束到损伤边缘距离下降,差异均有统计学意义(P<0.01)。行为学评估表明槲皮素显著提高小鼠BMS评分(P<0.01),第28天治疗组BMS显著高于对照组(P<0.01)。结论槲皮素可明显促进脊髓损伤后轴突出芽,减少回缩,促进运动功能恢复。
- 党圆圆张洪钿杨艺籍新潮张岩刘宁徐如祥
- 关键词：脊髓损伤槲皮素轴突
