杜丽丽
- 作品数：7 被引量：11H指数：2
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 人类胚胎干细胞的系列研究及应用
- 卢光琇林戈欧阳琦杨胜杜丽丽
- 人胚胎干细胞(hESCs)是再生医学中重要的种子细胞。项目组在hESCs临床应用相关技术的研发上取得了一系列原创性突破，成功建立了hESCs分离、培养、鉴定和诱导分化以及人类治疗性克隆等关键技术平台，构建了世界最大规模的...
- 关键词：
- 关键词：人类胚胎干细胞种子细胞
- 人胚胎干细胞建系、建库及诱导分化的系列研究及初步应用
- 林戈卢光琇欧阳琦杨胜陆长富杜丽丽杜娟王建周菂谢常青徐小明张前军
- 该项目在国家自然科学基金、863、973及省市各级有关项目的支持下，对人胚胎干细胞(hESCs)应用相关技术的研发取得了一系列原创性突破，主要技术创新如下：1、在国内率先建立具有自主知识产权的胚胎干细胞系，建立了国际上最...
- 关键词：
- 关键词：人胚胎干细胞冷冻技术
- 人类胚胎干细胞分化过程中DPPA2基因的表达情况分析(英文)被引量：3
- 2010年
- DPPA2(Developmental Pluripotency-Associated gene2)是近年来发现的在多能性细胞中特异表达的一个基因,它被认为参与维持干细胞的"干性".但目前为止,并没有关于该基因在人类胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)分化过程中的表达情况的报道,其功能也尚不清楚.通过Real-time PCR对DPPA2基因在hESCs分化过程中的表达情况进行分析,此外还对其在异常核型hESCs,人类胚胎癌细胞(human embryonic carcinoma cells,hECCs)NTERA-2以及其它5种癌细胞中的表达情况进行检测.结果表明DPPA2基因在hESCs中特异表达,其表达水平随着hESCs的分化而显著下调.该基因在异常核型hESCs和NTERA-2细胞中也有表达,但在其它肿瘤细胞中未检测到该基因的表达.此外,以EGFP-N1系统为基础的亚细胞信号定位结果表明,DPPA2是一个核蛋白.这些结果提示,DPPA2基因可能在维持hESCs特性的过程中发挥着重要的作用.
- 陈天姬杜娟杜丽丽欧阳琦卢光琇
- 关键词：人类胚胎干细胞干性核蛋白
- 十二种疾病特异的iPS系和血小板无力iPS疾病模型的建立以及hESCs胞质中重编程相关因子的检测
- 疾病材料的获得对人类疾病的研究是十分重要的。人类疾病的发生发展十分复杂，以人本身作为实验和研究对象来深入探讨疾病发生机制以及致病机理，对医药学发展的推动是十分缓慢的，而且许多涉及人体的实验在道义上和方法上也受到限制。而疾...
- 杜丽丽
- 关键词：体细胞重编程
- 4种全能性基因转入人胚胎成纤维细胞诱导多能性干细胞系的建立及其鉴定(英文)被引量：2
- 2009年
- 目的:利用人类胚胎成纤维细胞(human embryonic fibroblast cells,hEFs)获得诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs)系并对其全能性进行鉴定。方法:本研究采用慢病毒感染的方法将含有Oct4,Sox2,Nanog和Lin28全能性基因的慢病毒颗粒转导hEFs,获得iPSCs,并对其进行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)染色,以及检测表面标记,端粒酶活性,EB分化和畸胎瘤形成等,同时进行核型分析以及短串联重复序列(short tandem repeat,STR)分析。结果:所获得的iPSCs表达多能性细胞的表面标记,具有高的端粒酶活性,可在体内体外向内中外三胚层分化,与hESCs相似。经STR分析证实,iPSCs确实来源于hEFs而非胚胎干细胞的污染。结论:4种全能性基因转入hEFs可诱导获得与胚胎干细胞相似的iPSCs,有助于进一步的表观遗传学重编程以及干细胞多能性维持的研究。
- 杜丽丽林戈卢光琇
- 关键词：诱导性多能干细胞慢病毒感染胚胎干细胞胚胎成纤维细胞
- 人类胚胎干细胞与小鼠囊胚嵌合的探讨
- 2011年
- 【目的】探讨人类胚胎干细胞（Human embryonic stemcells,hESCs）能否在小鼠胚胎环境中生存并参与其各个组织器官的分化,为hESCs与小鼠囊胚嵌合的可行性研究提供依据。【方法】将154枚受精后3.5 d（3.5days postcoitum,3.5 dpc）ICR品系小鼠囊胚随机分为3组：试验组（注射hESCs）、模拟注射组（注射针仅刺破透明带及滋养层细胞,但不注射细胞和溶液）及对照组（未注射）,于注射后培养24 h统计囊胚完全孵化率。将稳定转染增强绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein,EGFP）的含有9~15个hESCs的小细胞团块,显微注射入3.5 dpcICR品系小鼠囊胚腔内,注射后分别于3,24,48,69,77,94和116 h,在普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞的定位与动态分布情况,并将嵌合体胚胎移植入假孕母鼠子宫内,分别于移植后第4天和第6天处死孕鼠,普通荧光显微镜下观察EGFP阳性细胞在整个小鼠胚胎中的分布情况。【结果】注射后24 h,试验组和模拟注射组的囊胚完全孵化率分别为73.6%和77.1%,均极显著高于对照组（38.3%）（P〈0.01）,有88.9%（32/36）的胚胎中的hESCs迁移并定位在小鼠内细胞团（ICM）及其临近的滋养层细胞上;体外培养48 h后,EGFP阳性细胞数进一步减少;116 h后,只有1枚胚胎仍残留3~4个EGFP阳性细胞,且散在分布于ICM克隆之外。体内发育试验结果显示,将43枚注射后的嵌合体囊胚移植入6只代孕母鼠子宫内,获得了22枚脱膜,有17枚脱膜中含有胚胎,其中形态正常胎儿14枚,没有胚胎含有EGFP阳性细胞。【结论】hESCs很难与小鼠囊胚正常嵌合。
- 徐小明杜丽丽林戈段馨卢光琇
- 关键词：人类胚胎干细胞囊胚小鼠嵌合体
- 人诱导多能干细胞与人胚胎干细胞分化过程中Oct4/Nanog基因表达的比较被引量：6
- 2011年
- 目的:比较通过慢病毒方法获得的人诱导多能性干细胞(iPSCs)与人胚胎干细胞(hESCs)分化过程中全能性基因Oct4、Nanog的表达变化。方法:收集分化不同时间点的拟胚体(EBs),检测三胚层分化基因以及全能性基因Oct4/Nanog的表达,并通过畸胎瘤组织切片的荧光染色分析Oct4的表达。结果:iPSCs获得的EB中内外三胚层分化基因表达的出现明显晚于hESCs来源的EB。不同于hESCs,iPSCs悬浮培养获得的EBs在体外培养18天未见内源性Oct4、Nanog基因表达的下调。未分化的iPSCs注射严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠培养10周后获得的畸胎瘤中仍存在Oct4阳性的细胞,但iPS-#2中明显少于iPS-#5。结论:通过慢病毒方法获得的iPSCs虽然具有向三胚层分化的能力,但在分化过程中仍维持较高水平的全能性基因Oct4、Nanog的表达。
- 杜丽丽林戈卢光琇
- 关键词：诱导性多能干细胞胚胎干细胞拟胚体
