刘宁宁
- 作品数：13 被引量：18H指数：2
- 供职机构：广州医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 维拉帕米对藤黄酸抗肿瘤作用的增敏效应及其机制研究
- 背景与目的：藤黄酸（gambogic acid，GA）是从藤黄科植物藤黄中提取的主要活性成分，能够通过作用于转铁因子受体，调节NF-κB途径，诱导包括肝癌、胃癌、白血病等多种肿瘤细胞在内的肿瘤细胞死亡。藤黄酸作为一种具有...
- 刘宁宁
- 关键词：藤黄酸抗肿瘤作用维拉帕米肿瘤细胞死亡联合用药
- 文献传递
- MicroRNA-378＊通过抑制CTGF促进人骨髓间充质干细胞凋亡被引量：2
- 2014年
- 目的:研究年龄相关microRNA-378*(miR-378*)对人骨髓间充质干细胞(h MSCs)存活和凋亡的调控作用。方法:通过microRNA芯片和qRT-PCR检测供体年龄对h MSCs中miR-378*表达的影响;通过H2O2诱导h MSCs凋亡;通过转染miR-378*模拟物或抑制物,过表达或抑制miR-378*的表达;用MTT、LDH、caspase-3/7、TUNEL检测等方法研究其对h MSCs存活和凋亡的影响;通过siRNA研究结缔组织生长因子(CTGF)对h MSCs存活和凋亡的影响。结果:随供体年龄增加,h MSCs中miR-378*的表达增加。H2O2刺激可促进miR-378*表达,抑制CTGF表达。过表达miR-378*可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。相反,抑制miR-378*的表达促进h MSCs的存活,减少细胞凋亡。同时抑制miR-378*和CTGF的表达,使miR-378*失去对h MSCs存活和凋亡的调控作用。直接抑制CTGF的表达可减少h MSCs的存活,促进细胞凋亡。结论:miR-378*通过抑制CTGF的表达减少h MSCs存活,促进h MSCs凋亡。
- 董珺曾波航刘宁宁莫沛熊龙根刘世明黎佼
- 关键词：人骨髓间充质干细胞细胞凋亡
- 去泛素化酶USP14调控H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤
- 2017年
- 目的:观察抑制泛素特异性蛋白酶14(ubiquitin-specific protease 14,USP14)的活性对H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化应激损伤的影响。方法:体外培养H9c2心肌细胞,用H_2O_2(25μmol/L)处理2 h,建立心肌细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为对照(control,CON)组、模型组(H_2O_2组)、USP14抑制剂IU1处理组(IU1组)和IU1处理后建模组(IU1+H_2O_2组)。MTS法检测H9c2心肌细胞活力;流式细胞术检测细胞内活性氧簇(ROS)的产生和细胞存活率;Western blot法检测丝裂原活化蛋白激酶家族相关蛋白的表达变化。结果:与CON组相比,H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著降低,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38的蛋白水平显著增加(P<0.05);与H_2O_2组比较,IU1+H_2O_2组细胞活力、细胞存活率显著增加,细胞内ROS含量、Bax/Bcl-2、P53、p-ERK1/2、p-JNK和p-P38蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:抑制USP14活性可以减轻氧化应激条件下H9c2心肌细胞的损伤,其机制可能与抑制丝裂原活化蛋白激酶信号活化和下调凋亡相关蛋白有关。
- 辜洪娇陈晓华孔田玉胡欢刘宁宁熊旭明张振辉
- 关键词：氧化应激细胞凋亡丝裂原活化蛋白激酶
- HPLC-MS法测定大鼠血浆与组织中薤白皂苷的含量被引量：2
- 2016年
- 目的：建立测定薤白皂苷在大鼠血浆及组织中浓度的HPLC-MS方法。方法：采用液相色谱/串联四级杆质谱联用仪对薤白皂苷提取物中暴露量最高的单体化合物进行检测,运用稀释比标准曲线法获取其相对血药浓度-时间曲线及相对组织药物浓度-时间曲线,计算药动学参数。结果：血浆与组织中薤白皂苷的标准曲线在0.001~1 mg/L浓度范围内线性良好,方法加样回收率为86.97%~116.25%。大鼠给予薤白皂苷提取物灌胃后,药时曲线呈双峰,达峰时间为30 min,半衰期约20 h,其在肝肾含量较其他组织为高,脑及肺组织中未检测到该药物原型。结论：所建立的HPLC-MS方法简单、专属性强,可用于大鼠血浆及组织中薤白皂苷的含量测定。
- 区文超靳丽君冯俊灵刘宁宁
- 关键词：LC-ESI-MS血药浓度
- 异紫花前胡内酯对离体大鼠胸主动脉的舒张作用及机制被引量：6
- 2016年
- 目的 探讨草药隔山香中异紫花前胡内酯（marmesin）的血管舒张作用及机制。方法 以离体血管环实验研究异紫花前胡内酯在Kreb’s液中对去甲肾上腺素（NE）、氯化钾（KCl）预收缩血管的舒张作用及静息状态下血管张力的影响,以及阻断剂维拉帕米（VER）、氯化四乙胺（TEA）对其血管舒张作用的影响;在无钙Kreb’s液中考察异紫花前胡内酯对氯化钙（CaCl_2）量效曲线、NE诱导血管收缩的影响;并结合激光共聚焦显微镜,考察其对血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响。结果 异紫花前胡内酯（25,50,100μg·m L-1）浓度依赖性舒张NE及KCl诱导收缩的离体血管,最大舒张率可达60%~80%,且内皮去除后舒张作用不受影响,同时不影响静息状态下血管环张力;阻断剂VER、TEA预孵后,异紫花前胡内酯的血管舒张作用均明显降低（P〈0.01,P〈0.05）;无钙环境下,异紫花前胡内酯能使CaCl_2量效曲线右移,NE诱导的收缩幅度降低;不同浓度的异紫花前胡内酯预孵血管平滑肌细胞（VSMCs）后,KCl、NE及CaCl_2诱导的细胞荧光密度值明显降低（P〈0.01）。结论异紫花前胡内酯可能通过抑制受体操纵钙通道（receptor-operated calcium channel,ROCC）、L型电压依赖性钙通道（voltage-dependent calcium channels,VDCC）、内钙释放以及开放钙激活钾离子通道（KCa）等机制,发挥非内皮依赖性的血管舒张作用,是草药隔山香的药效物质之一。
- 张双伟张军刘宁宁刘彬李爱群刘慰华刘世明
- 关键词：血管舒张钙离子
- 去泛素化酶抑制剂的发现及意义
- 背景： 泛素（Ubiquitin，Ub）是一种含76个氨基酸的多肽，存在于除细菌外的许多不同组织和器官中，具有标记待降解蛋白质的功能。泛素标记的蛋白质被输送到蛋白酶体进行降解。泛素-蛋白酶体系统（Ubiquitin-p...
- 刘宁宁
- 关键词：金诺芬胆红素抗肿瘤作用
- 文献传递
- miR-486-5p在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞凋亡中的作用被引量：5
- 2015年
- 目的:观察microRNA-486-5p(miR-486-5p)在氧化应激引起人骨髓间充质干细胞(h MSCs)凋亡中的作用并探讨其作用机制。方法:h MSCs经培养鉴定后分为5组:空白对照组、H2O2组、miR-486-5p模拟物+H2O2组、抑制物(αnti-miR)+H2O2组及相应的阴性对照(scrambled control)+H2O2组。荧光定量PCR(real-time PCR)检测氧化应激诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达变化。用脂质体分别转染miR-486-5p的模拟物、抑制物及阴性对照到h MSCs。应用MTT、Hoechst标记和流式细胞术的方法检测miR-486-5p对氧化应激介导细胞活性下降及凋亡效应的影响,Western blotting检测凋亡相关蛋白、Akt与其磷酸化水平,采用试剂盒测定caspase-3活性。结果:H2O2诱导h MSCs凋亡过程中miR-486-5p的表达较对照组显著下降(P<0.05)。与阴性对照组相比,在h MSCs中过表达miR-486-5p,能使细胞在氧化应激情况下活性显著下降,凋亡发生率增高,蛋白Bcl-2/Bax比值、caspase-3酶原含量及Akt磷酸化水平降低,caspase-3活性增强;而使用抑制物阻遏miR-486-5p的作用后,细胞在氧化应激条件下活性增加,凋亡发生率降低,蛋白Bcl-2/Bax比值及Akt磷酸化水平升高,caspase-3活性下降。结论:过表达miR-486-5p促进氧化应激引起的h MSCs凋亡,阻遏miR-486-5p的作用抑制氧化应激条件下的h MSCs凋亡,其中作用机制可能与调控Akt通路有关。
- 胡明黎佼刘宁宁黄桢钧伍崇海钟赟刘世明
- 关键词：间充质干细胞氧化应激
- 去泛素化酶USP14对大鼠心肌成纤维细胞增殖的影响
- 2015年
- 目的 研究抑制去泛素化酶USP14的活性对大鼠心肌成纤维细胞（CFs）增殖的影响.方法 用胰酶消化法和差速离心法分离培养新生SD大鼠CFs,加入不同浓度去泛素化酶USP14的抑制剂IU1作用48小时后,采用MTS、细胞计数法和结晶紫染色法检测CFs的增殖,采用LDH释放检测测定IU1对CFs的细胞毒性作用.结果 IU1可以浓度依赖的抑制CFs的增殖,并且没有明显的细胞毒性作用.结论 抑制去泛素化酶USP14活性可以抑制CFs的增殖,去泛素化酶USP14可能是一个抗心肌纤维化的重要靶点.
- 刘宁宁廖宇宁黄洪标
- 关键词：大鼠心肌成纤维细胞增殖
- 高良姜素抑制LPS诱导巨噬细胞的炎症反应
- 2017年
- 目的 探讨高良姜素对内毒素脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞的炎症反应作用.方法 用PMA诱导单核细胞（THP-1）成巨噬细胞;用MTS法检测高良姜素对巨噬细胞活性的影响;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的水平;免疫印迹（Western blot）法检测基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）蛋白水平的变化.结果 高良姜素在0~20 μmol/L范围内对细胞活力无明显影响.LPS的用药浓度为500 ng/mL;与LPS模型组比较,高良姜素2.5~20 μmol/L能有效抑制炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6的释放（P〈0.05）;高良姜素10、20 μmol/L能够抑制MMP-2、MMP-9的表达,但对 TIMP-1的表达无调节作用.结论 高良姜素抑制LPS刺激的巨噬细胞炎症反应,降低炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-6、MMP-2、MMP-9的表达.
- 胡欢张振辉刘宁宁孔田玉辜洪娇熊旭明
- 关键词：高良姜素巨噬细胞
- 漆树酸对人前列腺癌细胞LNCaP细胞周期的影响及机制被引量：1
- 2015年
- 目的观察漆树酸对人前列腺癌细胞LNCa P细胞周期的影响并分析其机制。方法人前列腺癌细胞LNCa P经漆树酸处理后,MTS法观察不同时间、不同浓度的漆树酸对细胞增殖率的影响,流式细胞术分析细胞周期变化,Western blot方法观察漆树酸作用后细胞周期相关因子CDK4、CDK6、cyclin D1和P27蛋白水平的表达变化。结果 (1)漆树酸时间和浓度依赖性地抑制细胞增殖;(2)经漆树酸处理后的细胞出现生长抑制,细胞主要阻滞在G0/G1期;(3)漆树酸作用细胞后,CDK4、CDK6、cyclin D1蛋白表达水平低于溶剂对照组,而P27蛋白表达水平高于溶剂对照组。结论漆树酸可抑制LNCa P细胞增殖,其机制可能是与细胞周期相关蛋白P27的上调,CDK4、CDK6、cyclin D1表达下调有关,导致细胞阻滞在G0/G1期。
- 刘宁宁董晓先华先良廖宇宁黄洪标
- 关键词：前列腺癌细胞周期
