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降钙素基因相关肽对高血压性勃起功能障碍大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖及表型转化的影响被引量：2: 2018年; 目的探讨降钙素基因相关肽(CGRP)对高血压性勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)增殖及表型转化的影响。方法选取20只自发性高血压Wistar大鼠(SHR)及10只同系正常血压健康大鼠(WKY),测量大鼠尾部动脉收缩压,通过颈部皮下注射阿朴吗啡后观察大鼠阴茎勃起情况,SHR大鼠中无阴茎勃起的归为高血压勃起功能障碍(HBP-ED)组,出现阴茎勃起的归为高血压(HBP)组,WKY大鼠归为对照组。取各组大鼠阴茎海绵体平滑肌组织行细胞原代培养。不同浓度(1、10和100nmol/L)CGRP作用于培养的细胞后,采用MTT法检测细胞增殖情况,采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞碱性调宁蛋白(Cnn1)和骨桥蛋白(OPN)mRNA表达水平。结果不同浓度CGRP均可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,且抑制程度随CGRP浓度增加而加剧。当CGRP作用的终浓度为100nmol/L时,HBP组和HBP-ED组Cnnl m RNA表达水平较组内0nmol/L浓度均上调(均P<0.05),OPN mRNA表达水平较组内0nmol/L浓度均下调(均P<0.05)。结论 CGRP可抑制高血压性ED大鼠CCSM的增殖,可使高血压性ED大鼠CCSM表型发生逆转化,即由合成型向收缩型转化。; 叶挺宇卢湧湧潘悦黄锡玺杨宇蔡健; 关键词：降钙素基因相关肽勃起功能障碍阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化

慢病毒介导shRNA特异性干扰MRPL18基因对胰岛素瘤细胞线粒体能量代谢的影响: 2014年; 为了观察线粒体核糖体蛋白大亚基18(mitochondrial ribosomal proteins L18,MRPL18)基因低表达对小鼠胰岛素瘤细胞(MIN6)线粒体能量代谢的影响,该研究利用慢病毒介导的MRPL18 shRNA特异性干扰MRPL18基因,构建MRPL18基因低表达的MIN6细胞模型。Real-time PCR和Western blot检测干扰前后MRPL18 mRNA和蛋白质的表达情况。流式细胞仪检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平变化。海马生物能量代谢仪检测细胞线粒体功能。高效液相色谱检测细胞ATP、ADP和AMP含量。结果显示:转染MRPL18-shRNA后,MRPL18 mRNA和蛋白质表达均显著降低(P<0.05、P<0.01),细胞ROS明显升高(P<0.05);细胞氧耗率、基础呼吸、最大呼吸和储备呼吸能力显著降低,同时ATP产量和质子漏也减少(P<0.05、P<0.01)。细胞ATP含量和能荷较对照组减少,ADP和AMP含量显著增加(P<0.05、P<0.01)。证实了MRPL18基因表达下调后细胞内发生了代谢障碍。推测MRPL18是影响线粒体功能的关键蛋白质,该蛋白在细胞代谢过程中发挥着重要作用。MRPL18表达下降所建立的线粒体功能障碍的MIN6细胞模型,可用于线粒体糖尿病发病分子机制的研究。; 施孟如陈琳周林双杨宇吕建新李伟; 关键词：慢病毒 RNA干扰线粒体能量代谢

胰岛素样因子3用于青少年精索静脉曲张评估被引量：2: 2017年; 目的:探讨胰岛素样因子3(INSL-3)应用于青少年精索静脉曲张评估的可行性。方法:将80例青少年精索静脉曲张患者作为阳性组,另外纳入80例健康青少年志愿者作为正常对照组,对比分析两组左侧睾丸体积,睾丸萎缩指数(AI)、血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)、睾酮(T)、精液量、精子密度、精子活力(a+b)、正常形态精子率及INSL-3等参数,统计分析阳性组和对照组在INSL-3表达是否存在差异,分析INSL-3与其他检测指标的相关性。结果:和对照组比较,阳性组左侧睾丸体积、睾丸萎缩指数显著偏小(P<0.05)。阳性组血清促卵泡激素(6.21±2.41)IU/L、黄体生成素(6.02±1.47)IU/L、睾酮(7.87±1.66)μg/L显著升高;而精液量(2.86±1.19)mL、精子密度(60.77±35.97)M/mL、精子活力(a+b)(29.14±16.77)%和正常形态精子率(60.31±18.66)%明显降低(P<0.05);INSL-3水平(259.6±30.7)pg/mL明显下降(P<0.01);INSL-3的浓度与精子活力(a+b)和正常形态精子率显著相关(P<0.05)。结论:血清INSL-3水平与青少年精索静脉曲张紧密相关,相比于常规指标与疾病的相关性更强,有望用于青少年精索静脉曲张的诊断和干预。; 黄锡玺李萍杨宇; 关键词：青少年精索静脉曲张胰岛素样因子3 激素

个体化导航技术在下胸段复杂骨折脱位伴截瘫翻修术中的临床研究被引量：1: 2020年; 目的探讨利用个体化导航技术实施复杂下胸段骨折脱位伴截瘫患者翻修术的临床应用价值。方法选取需行翻修术的复杂下胸段骨折脱位伴截瘫患者4例。通过术前采集患者CT影像学资料(DICOM格式)并借助逆向工程设计软件(Mimics18.0、Geomagic studio12.0、Unigraphics NX10.0等)构建患者伤椎及邻近椎体数字模型,进而寻找、运算、设计最佳椎弓根置钉通道和置钉椎体后部骨性结构解剖贴合的反向模板,并将其进行拟合、转化,继而输出到快速成型设备用以制作导航组件应用于临床治疗。结果4例患者共成功置入31枚螺钉,1枚螺钉因患者软组织遮挡与椎体后部骨性结构吻合不佳改为传统置钉,根据Gertzbein和Robbins置钉评级标准:A级29枚,B级1枚,C级1枚,置钉准确率为96.8%;根据ASIA分级:1例B级患者恢复到C级,其余无变化;术后平均随访(29.0±4.7)个月,未发生内固定失效、骨折脱位复发等并发症。结论个体化导航技术可提升下胸段骨折脱位伴截瘫患者翻修手术的成功率、预后及疗效,对促进术前健康宣教和开展临床教学工作均有着积极的应用价值。; 杨宇叶亚飞夏弢凯赛尔江·艾合买提袁赤亭; 关键词：截瘫骨折脱位再手术导航技术

委陵菜酸改善前列腺癌的作用及机制研究被引量：1: 2020年; 目的基于PPARβ/Twist1信号通路,探讨委陵菜酸干预前列腺癌的作用及相关分子机制。方法体外培养人前列腺癌细胞株(LNCaP),加入不同浓度(10、20、40μmol/L)委陵菜酸进行干预。划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测细胞中PPARβ、Twist1、E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达情况。随后在BALB/c-nu裸鼠前列腺腺体背外侧包膜内注射LNCaP细胞悬液继而构建前列腺癌原位移植瘤模型,2周后灌胃不同浓度(0.75、1.5、3mg/kg)委陵菜酸进行治疗。取前列腺组织,测定药物治疗后瘤质量及瘤体积,HE染色法考察组织病理学改变,Western blot检测组织中PSA、PPARβ、Twist1、E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达情况。结果体外实验表明,委陵菜酸可有效抑制前列腺癌细胞迁移及浸润(P<0.01,P<0.05),WB检测结果显示:委陵菜酸可明显上调前列腺癌细胞中E-cadherin的表达水平(P<0.01,P<0.05),下调PPARβ、Twist1、N-cadherin及vimentin的表达水平(P<0.01,P<0.05)。体内实验表明,委陵菜酸可有效降低瘤质量及瘤体积(P<0.01,P<0.05)。结论委陵菜酸通过调控PPARβ/Twist1信号通路,抑制前列腺癌细胞的上皮细胞-间充质转化,从而有效发挥其抗前列腺癌迁移与侵袭的能力。; 黄航叶雪挺杨宇陈伟; 关键词：前列腺癌

线粒体DNA 3243A→G异质水平定量检测方法的建立及应用被引量：3: 2014年; 目的针对线粒体糖尿病致病位点mtDNA 3243A→G异质性突变，建立一种快速简便、低成本，但相对准确、敏感的定量检测方法，为不同条件下选择最佳检测方案提供参考。方法收集浙江省温州市一个母系遗传性线粒体糖尿病伴耳聋家系（maternally inherited diabetes and deafness MIDD）共17人，提取外周血全基因组DNA，同时分别应用PCR-限制性片段长度多态性技术（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism PCR-RLFP）、实时荧光定量PCR结合突变阻滞形成系统（realtime-amplification refractory mutation system-quantitative PCR，RT-ARMS-qPCR）和焦磷酸测序技术检测mtDNA A3243G突变的异质水平；并以0～100％不同比例A3243G突变负荷的11个标准品为对照，3种方法同时分别检测，根据实际检测值与预期检测值的相关程度，对这三种检测方法做出可靠性比较分析。结果PCR-RFLP、RTARMS-qPCR和焦磷酸测序技术对A3243G定量标准品的检测结果中，PCR-RFLP相对定量分析结果与预期值之间呈直线相关，决定系数R2=0．828；RT-ARMS-qPCR检测11个标准对照的突变负荷结果与预期值之间呈直线相关，决定系数R2=0．998；焦磷酸测序技术检测结果与预期值之间呈直线相关，决定系数R2=0．997。定量检测A3243G异质水平结果PCR-RFLP介于10％～60％，RTARMS-qPCR为0到100％，焦磷酸测序技术为1％到95％；RTARMS-qPCR和焦磷酸测序技术的检测结果均接近预期值；针对MIDD家系17位成员的检测中A3243G突变携带者有13例，非A3243G突变携带者有4份，这三种方法定性检测结果一致。RT-ARMS-qPCR和焦磷酸测序技术两种方法定量检测结果差异无统计学意义（t=1．140，P〉0．05）。结论针对mtDNA 3243A→G异质性突变的定量检测方法，PCR-RFLP不适合定量检测，但可作为一种临床检测方法用于人群初步筛查。对于低异质水平的A3243G突变可用RT ARMS-qP; 张小勤陈琳杨宇郑超颜景斌路兆宁吕建新李伟; 关键词：线粒体DNA

基于硫氧还蛋白还原酶1探究堆心菊灵对人前列腺癌细胞中活性氧产生的影响: 2022年; 目的探究堆心菊灵在人前列腺癌细胞中的抗癌作用及其潜在的作用机制。方法人前列腺癌DU145和PC-3细胞分别以不同浓度的堆心菊灵处理48 h,CCK-8法检测细胞存活率;qRT-PCR法检测硫氧还蛋白还原酶1(thioredoxin reductase1,TrxR1)m RNA表达情况。从人类蛋白免疫组化表达数据库中检测前列腺癌组织和正常组织中TrxR1蛋白表达情况;经堆心菊灵或活性氧(reactive oxygen species,ROS)抑制剂处理后,采用DCFH-DA染色法检测ROS的产生;敲除或过表达TrxR1,经堆心菊灵处理后,检测2种细胞中ROS水平。结果堆心菊灵显著抑制前列腺癌细胞存活率和TrxR1 m RNA表达水平(P<0.05、0.001),呈剂量相关性。与正常组织相比,TrxR1在前列腺癌组织中高表达。堆心菊灵显著诱导了前列腺癌细胞中ROS的产生,敲除TrxR1显著提高了前列腺癌细胞中ROS水平,过表达TrxR1抑制了前列腺癌细胞中ROS产生;而堆心菊灵可改善TrxR1过表达对ROS产生的抑制作用。结论堆心菊灵可以通过靶向人前列腺癌细胞中的TrxR1来促进ROS的产生,进而发挥抗前列腺癌的作用。; 潘聪桃张晓燕廖爱玲潘海飞周超峰杨宇; 关键词：活性氧前列腺癌细胞抗癌

利用血清miRNAs表达谱分析荔枝核提取物降低db/db小鼠血糖的可能机制: 2013年; 目的:利用血清miRNAs表达谱初步分析荔枝核提取物降低db/db小鼠血糖的可能机制。方法:荔枝核提取物连续灌胃治疗12周,追踪观察其对db/db小鼠体质量、空腹血糖、糖耐量和胰岛素耐量等的影响,并利用血清miRNAs芯片初步分析血清中miRNAs的改变,然后通过Real-time PCR确定组织中相关基因的表达改变。结果:db/db小鼠荔枝核处理组与未处理组相比,体质量、摄食量均无明显改变(P>0.05);但饮水量在灌胃6周时明显减少(P<0.05);空腹血糖值明显下降(P<0.05)。血清miRNAs芯片结果显示db/db小鼠荔枝核处理组miRNAs表达谱出现明显改变,其中均来自于Sfmbt2第10内含子的mmu-miR-297a-3p、mmu-miR-669f-5p、mmu-miR-467d-3p、mmu-miR-466c-5p表达一致性下降;并且Sfmbt2在肝脏组织中表达出现明显下降,为未处理组的64.4%,Sfmbt2在肌肉组织中表达无明显改变。结论:荔枝核灌胃治疗可明显降低db/db小鼠的空腹血糖水平;可改变血清中miRNAs的表达量及肝脏中Sfmbt2的表达量;考虑荔枝核提取物对db/db小鼠的降糖作用可能与miRNAs及Sfmbt2参与的机制有关。; 张婷郭景阳乔敏敏杨宇陈琳李春梅吕建新; 关键词：荔枝核提取物 MIRNAS 小鼠

超声引导经皮肾镜取石术中不行人工肾积水的随机对照研究被引量：20: 2018年; 目的探讨超声引导下经皮肾镜取石术中行输尿管插管制造人工肾积水的必要性。方法对2016年1月至2017年5月温州医科大学附属第一医院泌尿外科收治的肾积水为5～20 mm并符合纳入排除标准的肾或输尿管上段结石病例行前瞻性随机对照研究。入组的291例患者按术前肾盂分离程度（5～〈10 mm、10～20 mm）分2层进行试验，每层均分为人工肾积水组与非人工肾积水组，人工肾积水组术中留置5 F输尿管导管，人工肾积水后行俯卧位肾穿刺碎石；非人工肾积水组直接俯卧位肾穿刺碎石。分别采用t检验、χ2检验、重复测量方差分析比较两组手术结果。结果全部患者中4例术中因脓肾改行二期手术，予以剔除。5～〈10 mm层人工肾积水组和非人工肾积水组的术后发热率（14.6%比4.8%，χ2＝5.07，P＝0.03）、手术时间[（65.7±9.9）min比（50.3±7.4）min，t＝11.47，P＝0.00]，医疗费用[（18 327±903）元比（14 583±784）元，t＝24.50，P＝0.00]差异有统计学意义；10～20 mm层人工肾积水组和非人工肾积水组的术后发热率（14.5%比3.39%，χ2＝4.53，P＝0.03）、手术时间[（66.0±9.9）min比（52.4±8.9）min，t＝8.30，P＝0.00]，医疗费用[（16 548±537）元比（13 102±629）元，t＝32.10，P＝0.00]差异有统计学意义。各层两组的一针穿刺成功率、结石碎片下移输尿管肾镜处理失败数、顺行双J管留置失败率、结石清除率等均无差异。2例因术后出血量较大予输血，经数字减影血管造影动脉栓塞后痊愈；4例顺行留置双J管困难，经超滑导丝引导后留置成功；4例结石碎片下移输尿管肾镜处理失败，均通过输尿管镜成功处理。未发生感染性休克及周围器官损伤等严重并发症。结论超声引导下经皮肾镜取石术治疗肾积水为5～20 mm的肾或输尿管上段结石时，经验丰富的术者可尝试不常规进行人工肾积水。; 叶俊杰杨宇张会江郑元财潘悦谢辉; 关键词：肾结石碎石术肾盂积水

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杨宇

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