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谢泉: 作品数：13 被引量：36H指数：2; 供职机构：扬州大学兽医学院更多>>; 发文基金：江苏高校优势学科建设工程资助项目国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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Gp37蛋白C端调控ALV-J的致病性: 引言/目的与其他亚群ALV(Avian leukosis virus)不同,ALV-J致病性最强,主要诱发鸡造血系统恶性增生、髓细胞型白血病和血管瘤。ALV-J与其他亚群差异极大的Env蛋白被认为与其独特的致病致瘤性相关...; 李拓凡姚晓慧李春平张俊谢泉王伟康路浩符惠李露媛谢菁邵红霞高巍秦爱建叶建强; 关键词：ALV-J 功能型 CTD 酪氨酸

血清4型禽腺病毒Fiber蛋白在杆状病毒中的表达及其在抗体检测中的应用被引量：1: 2022年; 为建立检测血清4型禽腺病毒(FAdV-4)抗体快捷特异方法,本研究首先分别构建含FAdV-4纤突蛋白Fiber-1和Fiber-2的两个重组杆状病毒rBv-Fiber-1和rBv-Fiber-2。在利用IFA以及Western blot鉴定重组杆状病毒分别高效表达Fiber-1和Fiber-2蛋白的基础上,以Ni柱纯化蛋白,并作为特异性识别FAdV-4抗体的包被抗原构建间接ELISA方法。特异性试验表明,间接ELISA仅特异地检出FAdV-4阳性血清,而不与Ⅰ群其他血清型禽腺病毒及其他禽源病毒阳性血清反应。间接ELISA检测灵敏度高于常规IFA方法,批间和批内重复性变异系数均小于10%。临床血清检测结果表明,间接ELISA可有效检出感染FAdV-4或免疫FAdV-4灭活疫苗的鸡群中抗Fiber抗体,且检测结果与BioChek商品化ELISA试剂盒一致。结果表明,本研究利用杆状病毒系统表达的Fiber蛋白及基于表达产物所构建的间接ELISA方法在FAdV-4感染预警和免疫评估有良好的应用前景。; 隆玉兰谢松桦谢泉张伟王伟康张建军万志敏李拓凡邵红霞邵红霞叶建强; 关键词：重组杆状病毒间接ELISA 抗体检测

抗鸡源EphA2蛋白小鼠多克隆抗体的制备及其特性研究被引量：1: 2020年; 为深入探究鸡源EphA2生物学功能,试验首先对鸡源EphA2基因进行了原核分段克隆以及真核表达载体构建。重组原核表达载体分别命名为pGEX-6p-1-EphA2-A(1-534aa)和pGEX-6p-1-EphA2-B(585-972aa),真核表达载体命名为pcDNA3.1-EphA2。重组原核表达载体转化BL21后经IPTG诱导以及SDS-PAGE分析发现,融合蛋白GST-EphA2-A和GST-EphA2-B均获得有效表达。以纯化的GST-EphA2-A和GST-EphA2-B蛋白免疫小鼠制备了抗鸡EphA2多克隆抗体。间接免疫荧光试验以及Western blot试验表明,所制备的抗鸡EphA2多克隆抗体不仅能识别转染pcDNA3.1-EphA2的DF-1及LMH细胞中表达的外源性EphA2,而且还能有效识别内源性鸡源EphA2蛋白。本研究中鸡EphA2的成功表达及其多克隆抗体研制为后续研究鸡EphA2的功能提供了分子生物学工具。; 姚晓慧李拓凡谢泉万志敏邵红霞邵红霞叶建强; 关键词：真核表达多克隆抗体

一株高致病性血清4型禽腺病毒的分离与鉴定被引量：25: 2016年; 研究对临床上疑似禽腺病毒感染鸡病例进行了病毒分离与鉴定。通过对病鸡肝组织研磨液接种鸡胚、电镜观察、PCR及序列鉴定,分离出一株血清4型禽腺病毒,命名为JH。动物回归试验证明,肌肉接种1 000 EID_(50)病毒量对3周龄SPF鸡的致死率高达90%;病死鸡剖解可见典型的心包积液与包涵体肝炎,肝组织切片HE染色可见典型的嗜碱性核内包涵体。这一高致病性血清4型禽腺病毒的分离报道,为探究国内禽腺病毒分子流行与毒力演变提供基础材料。; 梁广成高巍谢泉张建军邵红霞秦爱建叶建强

国内活禽市场新型环形病毒AGV2的发现被引量：1: 2015年; 为了解国内鸡群是否存在新型环形病毒AGV2,研究对来自扬州的一个活禽市场的20份鸡羽囊样品进行了AGV2的PCR检测。通过对鸡羽囊DNA提取、PCR扩增以及序列分析,在20份样品中检测到4份阳性样品。测序比对发现,本研究检测到的国内AGV2序列与NCBI中发表的AGV2的同源性为95.7%~99.4%。并对一份阳性样品的PCR产物进行了TA克隆,测定了该PCR的灵敏度为2.7个拷贝数。这一结果不仅首次证明国内活禽市场存在AGV2,而且为进一步开展国内鸡群AGV2的分子流行病学及其致病性等研究奠定良好的基础。; 张雨沈元朝田晓彦谢泉谢泉王雨蒙邵红霞秦爱建邵红霞; 关键词：鸡群 PCR

基于悬浮培养技术的高效血清4型禽腺病毒灭活疫苗的创制被引量：5: 2022年; 为制备高效血清4型禽腺病毒(FAdV-4)JH株灭活疫苗,首先利用激流式生物反应器的培养参数进行优化,并扩增获得大量JH株FAdV-4。经检验;收获的JH株的病毒滴度大于1×10^(8.5)TCID_(50)/m L,且灭活检验及无菌检验的结果均符合标准。将检验合格的JH株病毒液乳化制备了3批FAdV-4灭活疫苗成品,此灭活疫苗为油包水型,黏度在30 cP左右,性状稳定,离心后无水相析出,并且能够在2~8℃条件下保存长达15个月。将本研究制备的灭活疫苗接种给SPF鸡后鸡群无不良反应,并且在免疫后第21天能够产生高水平的中和抗体,平均效价大于1∶75;在致死剂量FAdV-4攻毒情况下,FAdV-4灭活疫苗能对免疫鸡群提供高达100%的保护率。进一步对疫苗的最低免疫剂量和免疫持续期进行测定,结果,采用皮下或肌注免疫方式对14日龄和120日龄鸡群接种的最低免疫剂量分别为0.3 m L和0.5 m L,免疫后疫苗免疫持续期可长达5月。结果证实,本研究研制的FAdV-4灭活疫苗安全有效,可为FAdV-4的防控提供有力技术支撑。; 周玉双糜飞张伟谢松桦谢泉张建军叶建强吴艳涛; 关键词：灭活疫苗免疫保护中和抗体

血清4型禽腺病毒Fiber蛋白的原核表达及其在抗体检测中的应用: 2024年; 为建立特异的血清4型禽腺病毒(FAdV-4)血清学抗体检测技术,试验将FAdV-4纤突蛋白基因fiber-2克隆至载体pET-28a中,构建原核表达载体pET-28a-Fiber-2,获得纯化的重组蛋白His-Fiber-2,以纯化的His-Fiber-2作为包被抗原建立检测Fiber-2抗体的间接ELISA方法,对该方法进行特异性、重复性、稳定性、灵敏性试验,并与BioChek FAdV商品化ELISA试剂盒检测结果进行比较。结果显示:建立的ELISA仅与抗FAdV-4阳性鸡血清发生反应,与检测的抗其他病原的血清以及SPF鸡血清均无反应性,批间重复性与批内重复性良好,其变异系数分别在4.345%~6.983%和4.326%~9.391%之间,包被酶标板保存12个月后,变异系数为4.4%~10.0%,其检测灵敏度是间接免疫荧光检测技术的8~32倍,是基于包被GST-Fiber-2蛋白ELISA的2倍;建立的ELISA对FAdV-4灭活疫苗免疫的鸡血清检出率高于BioChek试剂盒,两者对临床感染FAdV-4的鸡血清的检测结果一致。研究表明,试验构建的基于重组蛋白His-Fiber-2的检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法为临床上FAdV-4感染监测以及疫苗的免疫评价提供了技术,具有良好的应用前景。; 王圆梦王伟康李拓凡万志敏邵红霞秦爱建秦爱建谢泉; 关键词：原核表达间接ELISA 抗体检测

K亚群禽白血病病毒gp85基因的克隆表达及多克隆抗体的制备被引量：1: 2019年; 研究分别将K亚群禽白血病病毒(ALV-K)的gp85基因以及env基因分别克隆到原核表达载体pColdⅠ以及真核表达载体pcDNA3.1(+),测序验证后分别命名为pCold-K-gp85以及pcDNA3.1-K-env。pCold-K-gp85转化BL21大肠杆菌,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析发现,该Gp85重组蛋白主要表达在包涵体中。利用纯化后Gp85重组蛋白免疫BALB/c小鼠,制备了抗ALV-KGp85蛋白的多克隆抗体。间接免疫荧光以及Westernblot试验进一步证明,所获得的抗Gp85蛋白的多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-K-env质粒以及感染ALV-K的DF-1细胞内表达的Env蛋白。以上研究结果为进一步探究ALV-K宿主范围,细胞受体鉴定及亚群特异性诊断技术研究奠定了基础。; 吕璐胡明月吕璐刘勇李拓凡谢菁刘勇刘勇秦爱建叶建强; 关键词：GP85基因多克隆抗体

趋化因子CCL28基因的克隆表达及其多抗制备被引量：1: 2019年; 将原核表达质粒pGEX-6P-1-CCL28转化至大肠埃希菌BL21中,经IPTG诱导,获得了GST-CCL28可溶性融合表达产物。利用纯化的GST-CCL28蛋白免疫BALB/c小鼠制备了抗GST-CCL28的多克隆抗体。同时将CCL28基因亚克隆进真核表达载体,经测序验证后命名为pcDNA3.1-CCL28。间接免疫荧光及Western blot试验结果进一步证明,所获得的抗GST-CCL28多克隆抗体能特异性的识别转染pcDNA3.1-CCL28质粒的DF-1细胞内高表达的CCL28蛋白。这一研究为制备抗CCL28单克隆抗体和探究与CCL28相关的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。; 陆文静王礼学王国相王伟康谢泉谢菁邵红霞高巍秦爱建叶建强; 关键词：克隆表达多克隆抗体

抗鸡源EphA2单克隆抗体的制备及其敲除细胞系的构建: 引言/目的促红细胞生成素产生肝细胞受体A2 (EphA2)是受体酪氨酸激酶(RTK) EphA家族中的重要成员之一。EphA2在肿瘤细胞生长、增殖、转移等相关的信号转导通路中起到关键性的调控作用。但目前尚未有鸡源EphA...; 姚晓慧李拓凡谢泉万志敏邵红霞秦爱建叶建强; 关键词：单克隆抗体 EPHA2 细胞系

谢泉

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