李蓓蓓
- 作品数：9 被引量：24H指数：2
- 供职机构：石河子大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 致犊牛脑炎E.coli S9922生物学特性及对不同环境消毒剂抵抗力的测定
- 2020年
- 致犊牛脑炎大肠杆菌S9922是从7日龄以内死亡犊牛大脑中分离出的一株肠外致病性大肠杆菌Extrain?testinal pathogenic Escherichia coli(ExPEC),引发犊牛的脑炎及腹泻。为研究E.coliS9922的生物学特性以及对外界消毒剂的抵抗作用,试验对E.coli S9922进行了生化鉴定、血清学鉴定、溶血性试验、药敏试验和LD50的测定,同时测定了E.coli S9922对环境消毒剂稀戊二醛溶液、二氯异氰尿酸钠粉剂、苯扎溴铵溶液和聚维酮碘溶液的抵抗力。结果表明,E.coli S9922 V-P试验为阴性,吲哚试验为阳性,能发酵甘露醇、木糖、葡萄糖、鼠李糖、麦芽糖,且均能产酸不产气;在牛大肠杆菌27种常见血清型中,并未检测到E.coli S9922的血清型;在5%的兔血和5%绵羊鲜血平板上未见溶血圈;E.coli S9922对氯霉素、四环素、庆大霉素、环丙沙星、氨苄青霉素、卡那霉素,左氧氟沙星、头孢噻肟、青霉素耐药,对多粘菌素b和大观霉素不耐药,且具有多重耐药特性;LD50计算结果为107.238mg/kg,表明E.coli S9922是一株强毒株;在高浓度的消毒剂作用下,均能杀灭该菌,而在低浓度消毒剂作用下,稀戊二醛溶液和苯扎溴铵溶液比聚维酮碘溶液和二氯异氰尿酸钠的消毒效果好。研究结果可为肠外致病性大肠杆菌的研究提供试验数据以及对畜舍内环境消毒提供理论指导。
- 钦倩李蓓蓓马勋蒋建军王鹏雁
- 关键词：生物学特性抵抗力
- 牛源致脑炎大肠杆菌多表位抗原的制备及免疫效果的初步评价
- 2022年
- 目的 为了初步评价基于FimD、PilN和PilV蛋白优势表位设计的重组蛋白免疫保护效果。方法 将FimD、PilN和PilV蛋白的优势B细胞表位串联,构建原核表达载体,然后在BL21(DE3)大肠杆菌中进行原核表达及纯化;用弗氏佐剂与重组蛋白充分混匀后免疫小鼠,收集血清,利用间接ELISA方法检测抗体效价,并进行抗原性的检测;三免后进行攻毒保护实验并对小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量进行测定。结果 重组蛋白主要以包涵体形式表达。Western-blot结果显示出现一条特异性条带,与预期的重组蛋白大小相符,表明成功制备出多表位抗原。重组蛋白免疫小鼠后血清特异性抗体效价高达1:204 800。试验组小鼠攻毒后存活率为66%,对照组小鼠肝脏、脑和脾脏载菌量均显著高于试验组。结论 重组蛋白具有良好的抗原性和一定的免疫保护作用,具有研发牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的潜在价值。
- 海永慧钦倩李蓓蓓任静静马勋王鹏雁蒋建军
- 关键词：B细胞表位免疫保护效果
- 食源性单增李斯特菌inlA/inlB/inlC基因缺失株的构建及其生物学特性分析被引量：7
- 2019年
- 为探究内化素inlA/inlB/inlC基因对单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)生物学特性的影响,本研究采用融合PCR方法构建Lm681 inlC基因缺失突变体,并构建pKSV7-△inlC穿梭载体,将其转化Lm681-△inlAB感受态细胞,利用温度(42℃)和氯霉素(10μg/mL)抗性双重压力来实现同源重组,筛选同源重组子进行鉴定并研究其部分生物学特性。结果显示,PCR和测序结果证实成功构建了3基因缺失株(Lm681-△inlABC),且缺失株的生长特性与野生株相比无明显差异,溶血特性与野生株保持一致;小鼠感染试验显示,野生株Lm681、Lm681-△inlAB和Lm681-△inlABC对小鼠的致死率分别为80%(8/10)、60%(6/10)和40%(4/10),对小鼠的LD50分别为4.36×10~4、1.35×10~6和2.95×10~7 CFU,且Lm681-△inlABC在肝脏、脾脏及脑组织中的定植能力极显著低于野生株(P<0.01)。研究结果表明,inlA/inlB/inlC基因对Lm致病性发挥具有一定的作用,为深入研究inlX基因介导Lm入侵宿主细胞过程中的作用机制提供了科学依据。
- 任静静杨铭伟陈云飞尹华王欣雨李蓓蓓蒋建军王鹏雁
- 关键词：单增李斯特菌生物学特性
- 新疆昌吉地区规模化猪场猪瘟免疫抗体水平检测与分析
- 2015年
- 为了掌握昌吉地区5个规模化猪场猪瘟免疫抗体水平的高低及消长规律,同时为养殖户提供一个科学合理的免疫程序,本试验选择昌吉地区5个规模化猪场,收集2012~2013年不同年龄阶段的猪血清共1 350份,采用间接ELISA方法检测其抗体水平并进行分析。经过对昌吉地区5个规模化猪场共1 350份血清采用间接ELISA方法进行了检测,结果总抗体阳性率为80.07%（1 081/1 350）,平均抗体滴度为8log2,标准差为0.856。其中A、B、C、D、E 5个规模化猪场猪瘟抗体阳性率分别为92.22%、82.59%、74.44%、88.51%、62.59%,通过对不同阶段猪群抗体阳性率结果统计可知公猪、后备母猪、哺乳母猪、妊娠母猪、7日龄仔猪、14日龄仔猪、21日龄仔猪、30日龄仔猪、40日龄仔猪、55日龄仔猪等不同阶段猪群的血清抗体阳性率分别为92%、69%、86%、93%、72%、82%、88.67%、80.67%、72.66%、82.67%。结合检测结果、临床生产数据及猪场已采用CSF的免疫程序,建议试验区仔猪猪瘟免疫程序为23~25日龄进行首免疫,60日龄时进行第二次免疫,生产公、母猪每年春秋两秋各普免一次,经产母猪每次断奶前跟胎免疫一次。
- 栾廷波伏寅峰李蓓蓓
- 关键词：猪瘟ELISA抗体水平
- 致犊牛脑炎大肠杆菌生物膜形成特性的研究
- 2019年
- 目的探讨致犊牛脑炎大肠杆菌生物膜形成能力及相关特性。方法本试验以致犊牛脑炎大肠杆菌NJY9957株为对象,设定不同pH、不同温度以及不同时间,于96孔板上制备生物膜,结晶紫染色后酶标仪测OD 600nm值,倒置显微镜观察生物膜形态,确定其生物膜形成的最适条件;在最适条件下,与肠内共生型及禽肠外致病性大肠杆菌同时培养制备生物膜并进行比较。结果致犊牛脑炎大肠杆菌NJY9957株生物膜最适形成条件是温度为37℃,培养基pH=7.0,培养时间为24 h;在最适条件下,与肠内共生型及禽肠外致病性大肠杆菌相比较,共生型大肠杆菌形成生物膜能力较强。结论确定了致犊牛脑炎大肠杆菌NJY9957株形成生物膜的最适条件,并比较了其与肠内共生型及禽肠外致病性大肠杆菌生物膜的形成能力,细菌生物膜的形成能力与其粘附、侵袭、耐药性以及毒力有关。
- 李蓓蓓晁金平蒋建军马勋王鹏雁
- 关键词：生物膜
- 牛源致脑炎大肠杆菌FimD、PilN蛋白的生物信息学分析和优势B细胞表位预测
- 2022年
- 为了筛选出牛源致脑炎大肠杆菌S9922 FimD、PilN蛋白的优势B细胞表位,本试验采用生物信息学分析工具ProtParam、TMHMM、NetPhos、DNASTAR软件、SOPMA、SWISS-MODEL、BepiPred、Immunomedicine Group等对FimD、PilN蛋白进行理化性质、跨膜区、信号肽、糖基化位点、磷酸化位点、二级结构、三级结构和B细胞表位预测,并进行综合分析,最终得出优势B细胞表位。结果显示,FimD、PilN蛋白都为亲水、稳定蛋白,无规则卷曲在二级结构中所占比例最高;FimD蛋白共有48个磷酸化位点,不存在跨膜区和信号肽;PilN蛋白共有85个磷酸化位点,PilN蛋白在1~50位氨基酸上可能出现跨膜区,26~27位氨基酸上出现信号肽;多种参数综合分析最终得到潜在的优势B细胞表位,FimD蛋白:7~18、144~152、307~315、365~373;PilN蛋白:77~86、138~149、516~524。通过对FimD、PilN蛋白进行综合分析,最终得出潜在的优势B细胞表位,为牛源致脑炎大肠杆菌多表位疫苗的进一步研究提供参考依据。
- 海永慧钦倩李蓓蓓任静静马勋蒋建军王鹏雁
- 关键词：生物信息学分析B细胞抗原表位
- 石河子地区规模化牛场奶牛隐性乳房炎的检测与流行特点分析被引量：15
- 2015年
- 为了查明新疆石河子地区规模化牛场奶牛隐性乳房炎的流行现状,本试验选择石河子地区148团某牛场（A牛场）、150团某牛场（B场）、133团某牛场（C牛场）、121团某牛场（D牛场）、石河子周边某牛场（E牛场）及136团某牛场（F牛场）六个规模化牛场为研究对象,采用CMT法对试验区牛场进行了隐性乳房炎检测,经过对480头奶牛、1 868个乳区的测定,共检出196头隐性乳房炎奶牛,阳性乳区数为671,病牛阳性率与乳区阳性率分别为40.8%和35.9%。通过数据统计分析表明,该地区5岁以上奶牛的隐性乳房炎阳性率最高（49.61%）,3岁奶牛阳性率最低;5胎以上的阳性率最高（45.45%）,阳性率最低的为2胎奶牛（31.25%）;隐性乳房炎的阳性率随着产奶量的增加呈下降趋势,产奶量在15kg/d以下的奶牛隐性乳房炎阳性率最高（89.13%）,15~20kg/d的次之（58.33%）,35kg/d以上的最低（14.81%）。
- 栾廷波李蓓蓓
- 关键词：奶牛隐性乳房炎
- 致犊牛脑炎大肠杆菌Flic3和FimD蛋白的生物信息学分析及克隆表达被引量：2
- 2022年
- 为了对致犊牛脑炎大肠杆菌S9922的Flic3、FimD蛋白进行生物信息学分析,并进行诱导表达,试验利用在线分析软件对Flic3、FimD蛋白进行生物信息学分析,利用PCR技术扩增Flic3和FimD基因,构建重组质粒pET32a-Flic3和pET32a-FimD,转化BL21(DE3)大肠杆菌感受态进行原核表达,并进行SDS-PAGE分析和Western-blot检测。结果表明:Flic3蛋白的原子组成为C_(1381)H_(2284)N_(412)O_(496)S_(5),理论等电点为5.08,含有2个糖基化位点,α-螺旋、β-转角、β-片层和无规则卷曲分别占48.24%、6.39%、18.85%、26.52%,有13个可能的抗原表位。FimD蛋白的原子组成为C_(1828)H_(2798)N_(510)O_(588)S_(9),理论等电点为6.16,含有8个糖基化位点,α-螺旋、β-转角、β-片层和无规则卷曲分别占6.54%、5.50%、32.94%、56.02%,有15个潜在的抗原表位。Flic3和FimD蛋白都是亲水、稳定蛋白,都不含跨膜区和信号肽。SDS-PAGE分析结果显示,重组蛋白Flic3大小为51 ku,重组蛋白FimD大小为59 ku,皆以包涵体形式表达。Western-blot检测后目的条带与预期一致,具有良好的免疫原性。说明Flic3和FimD蛋白原核表达成功,可用于制备致犊牛脑炎大肠杆菌疫苗。
- 海永慧钦倩李蓓蓓马勋王鹏雁蒋建军
- 关键词：生物信息学分析原核表达
- 致犊牛脑炎大肠杆菌人工感染孕兔的实验研究
- 目的为探讨致犊牛脑炎大肠杆菌能否引起家兔流产或者死胎的特性。方法实验以怀孕家兔为对象,用腹腔注射的方式人工感染致犊牛脑炎大肠杆菌,观察孕兔的临床表现、剖解变化和组织形态学变化,从感染孕兔组织进行病原菌的分离培养以及鉴定。...
- 钦倩李蓓蓓海永慧马勋王鹏雁蒋建军
