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乙型肝炎病毒SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法的建立及临床应用被引量：6: 2016年; 目的建立 SYBR Green I实时荧光定量 PCR检测乙型肝炎病毒 DNA的快速方法，并探讨其临床应用价值。方法根据GenBank公布的Hepatitis B virus gp1基因序列设计引物，建立SYBR Green I实时荧光定量PCR，并对反应体系和扩增程序进行优化。定量标准品通过基因克隆方法获得，同时以浙江省夸克公司 HBV DNA定量检测试剂盒作对照，应用于随机选取的100份乙型肝炎患者血清检测。结果 SYBR Green I 实时荧光定量 PCR 检出限范围为5＆#215;102 copies／ml～5＆#215;108 copies／ml，HBV DNA浓度与CT值有良好线性关系，无交叉反应，整个过程仅需2.5 h。在随机抽取的100份临床标本应用中，与浙江省夸克公司的 HBV荧光定量 PCR检测试剂相比，建立的 SYBR Green I实时荧光定量PCR体系灵敏度100％，特异度92.5％。结论 SYBR Green实时荧光定量PCR快速、简便、灵敏度高、特异度强，可用于乙型肝炎患者病情监测，有效指导临床用药，准确评价 HBV感染者的病情。; 何维娜吕东月刘和录韩杰辉何玥李培培; 关键词：SYBR 乙型肝炎病毒DNA

枸橼酸钠干粉抗凝管在消除EDTA依赖性假性血小板减少症中的应用研究被引量：2: 2014年; 目的研究一种能消除EDTA依赖性假性血小板减少症(PTCT)的枸橼酸钠干粉抗凝管,以便准确计数此类患者血液中的血小板。方法 1通过观察枸橼酸钠干粉的不同抗凝浓度、不同抗凝血量对PLT值的影响,选出枸橼酸钠干粉的最佳抗凝浓度和最佳抗凝血量。2选取对照人群130例,用EDTA-K2、枸橼酸钠干粉和枸橼酸钠水剂三种方式抗凝,用仪器法测血常规各值。3选PTCT患者28例,各采集3份静脉血和一份末稍血样本,1份静脉血(2m L)用EDTA-K2抗凝、1份静脉血(2m L)用109mmol/L枸橼酸钠水剂抗凝管抗凝,另1份静脉血(2m L)用枸橼酸钠干粉抗凝管抗凝,末稍血用许汝氏稀释液稀释作血小板手工计数用。三种抗凝血分别于0min、5min、15min、30min、1h、2h、4h、8h用日本希森美康公司XE-1000仪器进行血小板计数检测并同时用玻片在显微镜下镜检血小板有无凝集现象。结果 1枸橼酸钠干粉抗凝管的最佳抗凝浓度为12.8mg/管,最佳抗凝血量为200~800μL。2经枸橼酸钠干粉抗凝管对130例对照组人群的血常规仪器检测结果与EDTA-K2、枸橼酸钠水剂二种方式抗凝的血常规检测结果比较,各种检测(WBC、RBC、HGB、PLT)值与前者比较差异均无统计学意义(P>0.05),与后者比较差异均有统计学意义(P<0.05),EDTA-K2与枸橼酸钠水剂二法检测值间比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。328例PTCT患者的枸橼酸钠干粉抗凝管血放置0min^8h和EDTA-K2抗凝血在放置0min用玻片在显微镜下镜检血小板无凝集现象,枸橼酸钠水剂抗凝管血放置60min内未见明显凝集现象,EDTA-K2抗凝血放置5min^8h、枸橼酸钠水剂抗凝管血放置60min后用玻片在显微镜下镜检血小板有不同程度的凝集现象。枸橼酸钠干粉抗凝管血0min^8h仪器血小板计数值与末稍血手工计数值比较,差异均无统计学意义(P>0.05),EDTA-K2抗凝血放置0min仪器检测的血小板计数值与末稍血手工计数值及枸橼�; 黄江浩何维娜华建江常帅刘平汪奇云徐志康; 关键词：枸橼酸钠血小板计数

自制尿HCG定性临界值质控物的应用评价: 2015年; 目的自制尿HCG定性临界值质控物,并建立相应室内质控程序以评价其实际应用效果。方法用生理盐水将已知HCG浓度的尿液稀释至25.00IU/L,加入稳定剂和防腐剂后用一次性塑料离心管分装,分别置于室温、4℃、-20℃保存,每天各监测一次,连续监测一年,并在南方惠桥检验信息系统上建立自制尿HCG室内质控程序及绘制半定量质控图。结果自制尿HCG定性临界值质控物在室温、4℃、-20℃的温度下,分别可稳定121天、300天、365天以上。在检验信息系统建立的HCG半定量质控图,监测到由HCG试剂灵敏度下降引起的3次失控。结论自制尿HCG定性临界值质控物保存在-20℃稳定性最佳,并通过建立室内质控程序能有效监测试剂的灵敏度,可作为尿HCG定性的室内质控物使用。; 何维娜华建江丁华许瑞娜吕冬月梁鸿钟瑜

HCMV-IgM室内质控物的研制及其临床应用被引量：2: 2015年; 目的探讨人巨细胞病毒IgM特异性抗体（HCMV-IgM）室内质控物的制备方法及其临床应用。方法用酶联免疫法检测孕妇HCMV-IgM抗体,收集检测结果全部阴性的混合血清,一部分作为阴性质控物,另一部分按比例加入适量HCMV-IgM抗体阳性的混合血清配制成所需浓度,加入蛋白稳定剂和叠氮钠,制备出HCMV-IgM室内质控物,分别保存于室温、2~8℃、-70℃,每天各监测一次,连续监测一年,以评价其稳定性和临床应用效果。结果自制的HCMV-IgM室内质控物稳定性很好,可验证检测试剂的灵敏度;阴性质控物不含HCMV-IgM抗体,可验证该检测试剂的特异性;HCMVIgM室内质控物在室温、2~8℃和-70℃条件下,分别可稳定35天、80天和365天。结论自制HCMV-IgM室内质控物,-70℃条件下保存稳定性最佳,能满足实验室室内质量控制的要求,使检测结果准确可靠,对优生优育具有重要临床应用价值。; 丁华何维娜华建江陈望许瑞娜陈伟光熊远香; 关键词：优生优育室内质控物稳定性

TORCH-IgM定性检测室内质量控制物的研制及临床应用: 2015年; 目的研制优生优育项目TORCH-Ig M特异性抗体(即CMV-Ig M,TOX-Ig M,RV-Ig M,HSV-Ig M)室内质量控制物的制备方法及在临床免疫实验室室内质量控制中的应用。方法收集孕妇CMV-Ig M,TOX-Ig M,RV-Ig M和HSV-Ig M抗体检测全部阴性的混合血清,一部分作为阴性质量控制物,另一部分加入适量以上4种抗体均阳性的混合血清配制成所需浓度,加入蛋白稳定剂和叠氮钠,制备出TORCH-Ig M弱阳性室内质量控制物,分别保存于室温、4℃、-20℃、-80℃,每天各监测1次,连续监测1年,以评价其稳定性和应用效果。结果自制的TORCH-Ig M室内质量控制物浓度处于试验方法的弱阳性水平,其稳定性较好,可验证检测试剂的灵敏度;阴性质量控制物不含TORCHIg M抗体,可验证该检测试剂的特异性;TORCH-Ig M定性试验质量控制物在室温条件下,至少可稳定30 d,4℃条件下,至少可稳定60 d,-20℃和-80℃条件下,均可稳定365 d以上。结论自制TORCH-Ig M定性试验室内质量控制物,经济、便捷、稳定,可以满足临床免疫实验室室内质量控制的要求,具有较好的临床应用价值。; 丁华韩杰辉华建江何维娜陈望许瑞娜; 关键词：血传病原体

探讨男性尿道拭子与前列腺液取材对沙眼衣原体检出阳性率的影响被引量：1: 2014年; 沙眼衣原体（CT）是一种能通过滤过器寄生在宿主细胞内繁殖的微生物.王宪灵等报道,CT是引起泌尿生殖道感染的主要病原体之一,可引起尿道炎、前列腺炎,甚至不孕不育等.CT检测方法有很多种,为探讨不同的取材对CT检出阳性率的影响,本文采用敏感性较高的ELISA检测法,分别对门诊疑似CT感染的男性就诊者的尿道拭子与前列腺液（EPS）进行CT抗原检测.结果报告如下.; 何维娜黄江浩常帅刘平何玥陈伟光; 关键词：尿道拭子前列腺液沙眼衣原体 ELISA法阳性率

自制枸橼酸钠干粉抗凝管在EDTA依赖性假性血小板减少症中的应用研究: 2014年; 目的：制备最佳抗凝浓度的枸橼酸钠干粉抗凝管，使EDTA依赖性假性血小板减少症患者的血小板计数更加简便、准确。方法：①配置不同浓度枸橼酸钠干粉抗凝管，优选其最佳抗凝浓度、抗凝血量及检测时间范围。②使用不同抗凝管同时采集4种不同类型患者静脉血，进行血小板计数，对EDTA依赖性假性血小板减少症患者同时进行末稍血手工法血小板计数及抗凝血涂片染色观察血小板聚集情况。结果：①枸橼酸钠干粉抗凝管的最佳抗凝浓度为12．8mg／管，在抗凝血量200～800μl、上机检测时间10～120min的条件下计数血小板可得到较准确结果。②最佳抗凝浓度的枸橼酸钠干粉抗凝管在门诊体检者、血小板增多患者、真性血小板减少症患者中，血小板结果与EDTA-K2真空抗凝管血小板结果比较，差异无统计学意义；在EDTA依赖性假性血小板减少症患者中，血小板结果与末稍血手工法计数血小板结果比较，差异亦无统计学意义，枸橼酸钠于粉抗凝血涂片染色观察血小板呈单个散在分布。结论：自制的枸橼酸钠干粉抗凝管可简便、准确地纠正EDTA依赖性假性血小板减少症患者的血小板数量。; 何维娜华建江丁华吕东月黄江浩; 关键词：血小板减少

三种方法联合检测在非 HIV 感染儿童马尔尼菲青霉病的临床应用被引量：1: 2015年; 目的：探讨联合检测曲霉菌半乳甘露聚糖、真菌（1-3）-β-D 葡聚糖及血液培养在非 HIV 感染儿童马尔尼菲青霉病的临床应用价值。方法对1例非 HIV 感染儿童马尔尼菲青霉病患儿静脉血进行曲霉菌半乳甘露聚糖及真菌（1-3）-β-D葡聚糖定量检测，同时对患儿静脉血进行血液培养，血培养仪阳性报警后对培养液进行真菌双相培养，肉眼观察菌落形态，显微镜下观察菌体特征。结果曲霉菌半乳甘露聚糖检测结果14.45μg／L；真菌（1-3）-β-D 葡聚糖检测结果77.14 pg／ml；血液培养检出马尔尼菲青霉菌，培养液25℃菌落为菌丝相，沙保氏培养基上有水溶性酒红色色素产生，35℃为酵母相，菌落可见脑回样皱褶，显微镜下菌体见典型的扫帚状分枝和分隔菌丝。结论曲霉菌半乳甘露聚糖、真菌（1-3）-β-D 葡聚糖定量检测联合血液培养，有助于马尔尼菲青霉病的早期诊断及治疗。; 何维娜苏丹虹吕东月丁华华建江何玥梁鸿; 关键词：非HIV感染儿童马尔尼菲青霉病

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何维娜

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