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侧脑室微量注射瘦素对大鼠下丘脑GnIH表达的影响被引量：1: 2015年; 目的:探讨侧脑室微量注射瘦素对下丘脑促性腺激素抑制激素(GnIH)蛋白表达的影响。方法:10只雌性Wistar大鼠随机分为注射生理盐水6h组和注射瘦素6h组,每组5只大鼠。大鼠去卵巢手术同时给予17β-雌二醇后,分别于侧脑室微量注射生理盐水和瘦素各4μl。采用蛋白印迹技术检测下丘脑GnIH蛋白表达的变化。结果:与注射生理盐水6h组相比,微量注射瘦素可明显降低下丘脑GnIH的表达水平(P<0.05)。结论:瘦素可能通过抑制GnIH的表达发挥对下丘脑-垂体-性腺轴的调节作用。; 魏萌武俭苏玮杨松鹤程露阳乔跃兵; 关键词：侧脑室瘦素 GNIH 下丘脑-垂体-性腺轴

肥胖相关癌症的研究进展被引量：8: 2017年; 肥胖已成为继吸烟之后的第二大重要致癌因素，在过去的几十年里，已有很多流行病学证据显示肥胖症可提高癌症的发病率和死亡率。过度肥胖是多种癌症发生的重要危险因素，如肝癌、胰腺癌、结直肠癌等，在肥胖促进癌症发生、发展的过程中，干扰因素很多，分析和探讨肥胖与癌症之间的关系将有助于了解癌症发生的相关机制，从而为制定相应的预防和治疗措施提供依据。; 魏萌杨旭庆程露阳杨松鹤; 关键词：癌症肥胖肝癌胰腺癌结直肠癌

GnIH对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠下丘脑POMC阳性神经元的影响被引量：2: 2019年; 目的:探讨促性腺激素抑制激素(Gn IH/RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)阳性神经元的影响。方法:65只成年雌性SD大鼠,随机选取2只用于免疫荧光多重染色,观察Gn IH/RFRP-3与POMC在大鼠下丘脑神经元的表达;随机选取3只用于免疫共沉淀(Co-IP)实验,检测Gn IH/RFRP-3与POMC的相互作用;余下60只建立卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型,模型组随机分成注射Gn IH实验组和生理盐水对照组,每组30只,每组根据注射时间不同分为20、40、60、120、240、360min等共6个亚组,每组5只,采用Western Blot法检测Gn IH/RFRP-3处理对下丘脑POMC表达的影响。结果:免疫荧光多重标记结果显示,Gn IH/RFRP-3与POMC共表达于大鼠下丘脑神经元; Co-IP结果证明,Gn IH/RFRP-3与POMC存在相互作用; Western Blot结果表明,注射Gn IH/RFRP-3后20 min组大鼠下丘脑POMC蛋白表达量显著高于对照组(P <0. 05),注射60、120、240、360 min实验组大鼠POMC蛋白表达量明显低于对照组(P <0. 05)。与20 min实验组相比,60、120、240 min组蛋白表达量依次呈下降趋势,360 min组蛋白表达量有升高趋势但是仍然低于20 min组(P <0. 05)。结论:Gn IH/RFRP-3可直接作用于POMC神经元。; 陈磊司丽娜魏萌郭森杨松鹤陈志宏程露阳乔跃兵; 关键词：下丘脑 GNIH POMC 卵巢摘除

侧脑室微量注射GnIH对OEP大鼠血浆GnRH、LH水平的影响: 2016年; 目的:观察侧脑室注射促性腺激素抑制激素(Gn IH)对OEP大鼠血浆促性腺激素释放激素(Gn RH)和黄体生成素(LH)水平的影响。方法:健康成年雌性SD大鼠40只,均建立卵巢摘除兼予雌激素注射(OEP)模型。随机分为Gn IH实验组和生理盐水对照组,每组20只,大鼠分别给予侧脑室注射Gn IH(5μl)和同等剂量生理盐水。采用ELISA法检测注射后1h、2h、4h、6h(n=5)大鼠血浆Gn RH和LH的水平。结果:与对照组相比,注射Gn IH1h、6h Gn RH、LH水平无明显变化(P>0.05);注射Gn IH 2h、4h Gn RH、LH水平明显降低(P<0.05)。结论:侧脑室注射Gn IH可影响OEP大鼠血浆Gn RH和LH的水平,且影响作用与时间有关。; 苏玮魏萌冯超杨正江陈心悦乔跃兵

GnIH对去卵巢兼予雌激素大鼠下丘脑POMC的调节作用被引量：1: 2017年; 目的:探讨侧脑室微量注射促性腺激素抑制激素(GnIH)对下丘脑阿片-促黑素细胞皮质素原(POMC)蛋白表达的影响。方法:40只雌性SD大鼠建立卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型后随机分为对照组(n=20)和实验组(n=20),分别于侧脑室微量注射生理盐水和GnIH 4μl;每组根据注射时间不同分为注射1h、2h、4h、6四个亚组(n=5)。采用蛋白印迹技术检测下丘脑POMC蛋白表达的情况。结果:注射1h、2h、4h,实验组大鼠下丘脑POMC蛋白的表达量与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。注射6h,实验组大鼠下丘脑POMC蛋白的表达量明显低于对照组(P<0.05)。结论:侧脑室微量注射GnIH可以抑制下丘脑POMC蛋白的表达。; 魏萌司丽娜陈磊杨松鹤程露阳乔跃兵; 关键词：侧脑室 GNIH POMC 下丘脑-垂体-性腺轴

CnIH侧脑室注射后大鼠下丘脑组织中神经肽Y mRNA及蛋白表达变化被引量：1: 2016年; 目的观察促性腺激素抑制激素(Gn IH)侧脑室注射后大鼠下丘脑组织中神经肽Y(NPY)mRNA及蛋白表达变化。方法雄性SD大鼠60只,随机分为实验组和对照组各30只,分别给予侧脑室注射Gn IH(1μg/μL,5μL)和生理盐水(5μL),分别于注射1、2、4 h后各处死10只,取下丘脑组织。采用real-time PCR法检测NPY mRNA,免疫印迹法检测NPY蛋白。结果实验组注射后1、2、4 h下丘脑组织中NPY mRNA相对表达量分别为0.759±0.025、1.755±0.219、2.671±0.696,NPY蛋白相对表达量分别为0.225±0.015、0.244±0.015、0.264±0.009;对照组分别为0.633±0.021、0.568±0.006、0.631±0.015和0.113±0.004、0.125±0.007、0.128±0.011。两组注射后2、4 h NPY mRNA表达量相比,P均<0.05;两组注射后各时点NPY蛋白表达量比较,P均<0.05。结论Gn IH侧脑室注射后,大鼠下丘脑组织中NPY mRNA及蛋白表达上调。; 苏玮魏萌冯超杨正江陈心悦程露阳杨松鹤乔跃兵; 关键词：下丘脑动物实验

GnIH/RFRP-3通过受体GPR147抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导雌激素受体阳性人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的研究被引量：4: 2021年; 目的:基于G蛋白耦联受体147(GPR147)受体探讨促性腺激素抑制激素(gonadotropin inhibitory hormone,GnIH)对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡和PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响及分子机制。方法:①体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7,设空白调零组、对照组和GnIH实验组(0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL、10000ng/mL)。应用CCK-8法检测细胞增殖能力;用流式细胞仪检测凋亡率;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白免疫印记分析(Western Blot),在mRNA和蛋白质水平上检测GnIH对凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、cytochrome C、Caspase-3、P53)和PI3K/AKT/mTOR信号通路上PI3K、AKT/p-AKT、mTOR蛋白表达情况。Western Blot法检测GnIH的受体GPR147在MCF-7细胞系上的表达情况。②将细胞分为PBS对照组、DMSO对照组、GnIH组和GnIH+RF9抑制剂组培养24h,分别加入PBS15μL、DMSO3μL、GnIH10000ng/mL和GnIH10000ng/mL+RF910μmoL进行干预,继续培养24h。Western Blot检测AKT/p-AKT蛋白表达情况。结果:①CCK-8结果显示:GnIH实验组0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL的细胞与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);GnIH10000ng/mL实验组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测结果:对照组和GnIH实验组10000ng/mL时的细胞凋亡率分别为(7.76±1.57)%和(16.14±3.001)%,差异有统计学意义(F=6.164,P=0.0351)。凋亡相关蛋白Bax、cytochrome C、Caspase-3蛋白表达(P<0.01)和P53蛋白表达显著上调(P<0.05),Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.01)。PI3K/AKT/mTOR信号通路中,PI3K、AKT/pAKT、mTOR蛋白表达显著下调(P<0.05)。MCF-7细胞系上存在GnIH的受体GRP147,当药物浓度为10000ng/mL时,与对照组比较受体激活(P<0.01)。抑制剂干预后,与GnIH组相比,GnIH+抑制剂RF9组细胞的AKT/p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论:乳腺癌细胞系MCF-7上存在GnIH受体GPR147。GnIH可能通过与GPR147受体结合抑制乳腺癌细胞MCF-7的增殖和诱导凋亡,并且�; 王凤霞魏萌司丽娜杨松鹤程露阳乔跃兵马秀艳; 关键词：人乳腺癌MCF-7细胞细胞凋亡

GnIH对下丘脑POMC神经元的调节作用: ＜正＞探讨侧脑室注射GnIH对下丘脑POMC表达的影响。本实验用40只雌性健康SD大鼠,首先建立摘除卵巢并注射雌激素（OEP）的大鼠模型。动物随机分为GnIH组和生理盐水对照组,于注射后3 h取脑组织。免疫组化检测下丘脑...; 赵连志魏萌苏玮杨松鹤乔跃兵程露阳; 文献传递

侧脑室注射促性腺激素抑制激素/RF酰胺相关肽-3对卵巢摘除术后补充雌激素大鼠子宫腔液影响的蛋白质组学分析被引量：1: 2021年; 目的运用生物信息学方法分析侧脑室注射促性腺激素抑制激素(GnIH)/RF酰胺相关肽-3(RFRP-3)对卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠子宫腔液蛋白的影响,探索GnIH/RFRP-3影响子宫的分子机制。方法本研究通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)技术结合生物信息学分析侧脑室微量注射GnIH对OEP模型大鼠(n=30)子宫腔液蛋白的影响。比较侧脑室注射GnIH/RFRP-3实验组(n=15,给予2 g/L RFRP-3,16μl/kg)与生理盐水对照组(n=15,给予生理盐水16μl/kg) 6 h后子宫腔液的蛋白质组分,利用Uni Prot数据库筛选差异蛋白并对所得差异蛋白进行基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因百科全书(KEGG)通路分析。从STRING数据库获得蛋白相互作用数据,利用Cytoscape 3.7.1软件构建蛋白相互作用网络(PPI)并筛选中心节点蛋白。结果应用LC-MS/MS技术所得质谱数据利用Uni Prot数据库进行搜索鉴定,筛选出差异蛋白419个,其中279个上调,138个下调;GO功能富集分析显示,差异蛋白主要富集于对有机物质的反应,对内源性刺激的反应,对含氧化合物的反应等生物过程;KEGG通路分析显示,差异蛋白在糖酵解、碳代谢、肌动蛋白骨架调节、甲状腺激素合成等代谢途径富集(P<0.05);分析蛋白相互作用网络获得5个中心节点蛋白:白蛋白(Alb)、α-烯醇化酶1(Eno1)、过氧化物酶6(Prdx6)、组织型基质金属蛋白酶抑制剂1(Timp1)、Ras相关C3肉毒素底物1 (Rac1)。结论本实验结果提示,GnIH可能通过下丘脑-垂体生殖轴调节子宫腔液蛋白的分泌,并可能通过上调Alb、Eno1和Prdx6,下调Timp1和Rac1,调节子宫生理及病理过程。; 赵雪莹司丽娜魏萌乔跃兵杨松鹤程露阳; 关键词：卵巢摘除术

基于蛋白质组学分析侧脑室微量注射GnIH对下丘脑蛋白的调节作用: 2021年; 目的观察侧脑室微量注射促性腺激素抑制激素(GnIH)对下丘脑蛋白质的调节作用。方法构建卵巢摘除术补充雌激素(OEP)大鼠模型(n=30),随机分为实验组和对照组各15只,侧脑室分别微量注射等量GnIH和生理盐水。给药6 h后取下丘脑,制备蛋白样品。应用液相色谱—串联质谱(LC-MS/MS)技术联合生物信息学分析工具[Omicsbean、基因本体论(GO)和京都蛋白与蛋白组百科全书(KEGG)]分析下丘脑蛋白质组分和差异蛋白质的分布、功能及作用机制。应用UALCAN数据库中CPTAC分析程序,分析关键蛋白在激素相关性肿瘤的表达情况。体外培养激素依赖性乳腺癌细胞系MCF-7,运用蛋白印迹检测关键蛋白的表达。结果鉴定出253个差异表达蛋白,其中129个蛋白上调,124个蛋白下调。GO结果显示,差异蛋白的生物过程主要在单体代谢过程和小分子代谢过程中富集,细胞成分主要分布在细胞质和细胞核,分子功能主要涉及小分子结合功能。KEGG结果显示,差异蛋白参与了代谢途径、糖酵解/糖异生、内分泌和其他因子调节的钙重吸收等10条重要信号通路。Omicsbean软件可视化蛋白—蛋白相互作用分析显示:关键蛋白GALM、ADPGK、PGM1、PFKL上调,ALDH2下调。CPTAC分析显示,关键蛋白GALM、ADPGK、PGM1、PFKL和ALDH2在乳腺癌中的表达高于正常乳腺组织。蛋白印迹结果显示,ADPGK在MCF-7表达下调。结论侧脑室微量注射GnIH后可引起OEP大鼠下丘脑蛋白的差异变化。; 王凤霞司丽娜魏萌杨松鹤程露阳乔跃兵; 关键词：蛋白质组学差异表达蛋白

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魏萌

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