谷魏
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 供职机构：山东宝来利来生物工程股份有限公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的克隆表达及其生物学特性的初步研究
- 2015年
- 为了研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)N蛋白的生物学特性,根据Gen Bank上登录的PRRSV的基因序列设计引物,以生物研究院保存的PRRSV病料的总RNA为模板进行RT-PCR,获得N基因的完整开放阅读框为372bp,构建原核表达载体p ET-28a-N并转化到大肠杆菌BL21中,IPTG诱导表达得到重组蛋白包涵体,经破碎、纯化、透析复性后通过SDS-PAGE电泳检测和Western blot分析表达产物的特性。结果显示,获得的重组蛋白大小约为21KD,能与抗PRRSV N蛋白的多抗发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。BCA法测定蛋白浓度为540μg/m L,说明蛋白表达量较高。因此,试验重组蛋白表达量较高,且具有良好的免疫原性。
- 房栋程福亮聂兆晶陈甜甜樊梅娜刘洋庆李复辉程合刚谷魏
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白原核表达生物学特性
- 大肠杆菌K99噬菌体的分离鉴定及在小鼠上的防治效果被引量：4
- 2018年
- 【背景】产肠毒素大肠杆菌K99是引起仔猪腹泻的主要致病菌之一,目前对该病的治疗主要依赖于抗生素,但大量抗生素的长期使用造成了病原菌耐药性的增强,亟待寻求一种新的产品来解决这一问题。【目的】以一株产肠毒素大肠杆菌K99为宿主菌,从畜禽粪水中分离噬菌体并对其基本生物学特性进行研究,同时在小鼠上检验噬菌体对小鼠大肠杆菌感染的防治效果。【方法】双层平板法分离筛选烈性噬菌体并观察噬菌斑形态;纯化后进行电镜观察、核酸类型鉴定;测定噬菌体热稳定性、p H稳定性、最佳感染复数及一步生长曲线;通过小鼠体内实验检测噬菌体对小鼠大肠杆菌感染的防治效果。【结果】从畜禽粪水中分离出1株产肠毒素大肠杆菌K99强裂解性噬菌体,命名为ФK99-1,经电镜观察及核酸类型鉴定,应属于肌尾噬菌体科(Myoviridae)。噬菌体能耐受50°C左右的高温,在p H 3.0-10.0范围内效价稳定。最佳感染复数为0.000 01,暴发量为108 333 PFU/cell;运用噬菌体ФK99-1预防和治疗小鼠产肠毒素大肠杆菌K99感染,结果显示小鼠发病症状较阳性对照组明显减轻,小鼠血液内大肠杆菌K99含量也显著低于阳性对照组,通过病理切片观察显示脏器发病情况也较阳性对照组减轻。【结论】ФK99-1是一株在不同温度、不同酸碱性环境中有较强适应能力,且在小鼠大肠杆菌感染上表现出良好防治效果的裂解性肌尾科大肠杆菌噬菌体。
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- 关键词：生物学特性
- 一株鼠伤寒沙门氏菌噬菌体的分离鉴定及对小鼠的防制效果研究被引量：13
- 2018年
- 本研究旨在通过双层平板法从鸡粪中分离鼠伤寒沙门氏菌烈性噬菌体,并通过电镜观察、热稳定性、pH稳定性、最佳感染复数、一步生长曲线和在小鼠上的防制效果试验对噬菌体进行评估。结果显示,从鸡粪中成功分离出一株鼠伤寒沙门氏菌噬菌体(ФBLCC8-0050-3),该噬菌体有一个正多面体立体对称的头部,头径直径约65nm,无尾部结构,应属于盖噬菌体科(Tectiviridae)烈性噬菌体;噬菌斑成圆形空斑,周围有晕环,直径为2~3mm;温度耐受范围是30~50℃;pH耐受范围为3~10。当感染复数(multiplicity of infection,MOI)为0.0001时,子代噬菌体滴度最高;按照一步生长曲线结果,潜伏期为20 min左右,爆发时间为180 min左右,爆发量为43 333PFU/cell;从噬菌体对鼠伤寒沙门氏菌的防制效果来看,处理14d后,阳性对照组小鼠存活率为0,噬菌体预防组小鼠存活率为90%,噬菌体治疗组小鼠存活率为70%。说明与阳性对照组相比,预防组和治疗组都对小鼠抵抗沙门氏菌感染有一定的作用。结果表明,ΦBLCC8-0050-3是一株具有良好应用前景的噬菌体,可作为一种生物抑菌剂用于鼠伤寒沙门氏菌的防制。
- 赵影刘秀侠李金敏徐海燕谷魏
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌生物学特性防制效果
