王昆
- 作品数：2 被引量：6H指数：1
- 供职机构：第三军医大学西南医院更多>>
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- 类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统蛋白BsaL的制备和免疫反应性分析
- 2016年
- 目的构建表达重组的类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统结构蛋白Bsa L的大肠工程菌,制备高纯度、高质量的重组Bsa L蛋白样品,探讨其作为类鼻疽菌检测的候选抗原的可行性。方法基因工程技术构建表达重组Bsa L蛋白的大肠工程菌,通过亲和层析、凝胶过滤层析等纯化方法得到高纯度的Bsa L蛋白。包被Bsa L蛋白于96孔板,分析其用于检测临床类鼻疽菌株的敏感性和特异性。结果成功构建了表达重组Bsa L蛋白的大肠工程菌,诱导、表达及纯化后得到高纯度(>99%)、高浓度(20 mg/m L)的重组Bsa L蛋白。该蛋白在类鼻疽菌检测方面表现出较好的灵敏度(85%)和特异性(89%)。结论成功表达了重组的Bsa L蛋白,获得了高纯度的Bsa L蛋白样品,在类鼻疽菌的诊断方面展示出较好的应用价值。
- 方瑶胡艺朱攀任春艳马腾飞王昆毛旭虎
- 关键词：类鼻疽伯克霍尔德菌ELISA
- 具核梭杆菌诱导的肠上皮细胞Caco-2炎症反应及凋亡被引量：6
- 2015年
- 目的研究具核梭杆菌诱导人肠上皮细胞(Caco-2)的炎症反应与凋亡,并初步探讨其机制。方法具核梭杆菌感染Caco-2细胞后,采用RT-PCR及ELISA检测促炎细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α的转录水平和蛋白水平的表达,利用透射电镜、流式细胞术、Western blot和RT-PCR等技术检测具核梭杆菌诱导的肠上皮细胞凋亡情况及促凋亡相关蛋白PARP剪切、BECN1、Caspase3剪切和AKT磷酸化的情况。结果具核梭杆菌感染人肠上皮细胞系Caco-2后,无论在转录水平还是蛋白水平,促炎细胞因子IL-1β、IL-8和TNF-α的表达均比对照组显著升高,其中感染6 h后促炎细胞因子表达最高。其次,具核梭杆菌能够诱导Caco-2细胞凋亡,其中感染6 h凋亡率最高;具核梭杆菌感染6 h后,凋亡通路相关蛋白PARP剪切、Caspase3剪切显著增加,BECN1显著上调,而抗凋亡蛋白AKT磷酸化则显著下调。结论具核梭杆菌能够诱导人肠上皮细胞的炎性反应和凋亡。
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- 关键词：具核梭杆菌肠上皮细胞炎症凋亡
