夏丹
- 作品数：13 被引量：27H指数：4
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- 关岭牛MyoD基因家族对MyoD1启动子活性的影响被引量：5
- 2016年
- 【目的】生肌决定因子(myogenic determination gene,MyoD)家族是肌肉生成过程中参与分子调控作用的一个重要家族。该家族包括MyoD1,Myf5,Myo G和Myf6,只表达在成熟的骨骼肌细胞和其前期细胞中;在其他的非肌细胞中,MyoD基因家族会被抑制。该家族中,MyoD1负责早期胚胎成肌祖细胞的激活并参与胚后骨骼肌的生长、发育和修复等的调节,以维持个体骨骼肌的相对稳定,是启动和维持骨骼肌细胞分化和生长的重要因素,具有尤为重要的作用,已成为研究热点。目前MyoD1在多态性和关联性分析等方面的研究较多,表达调控方面主要是研究小鼠、鸡和猪肌细胞生成机理;在牛上对它的研究主要在转录后和翻译水平的表达,但对MyoD1在转录调控方面的作用机制还不明确。文章研究关岭牛MyoD基因家族对MyoD1启动子活性的影响,为探讨牛MyoD1的表达调控机制奠定基础。【方法】通过设计特异性引物克隆关岭牛MyoD基因家族CDS区和MyoD1启动子片段P1和P2;同时利用双酶切的方法分别将CDS区和克隆的启动子序列连入pcDNA3.1(+)和p GL3-Basic基本骨架,构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-Myf5、pcDNA3.1(+)-Myf6、pcDNA3.1(+)-MyoD、pcDNA3.1(+)-Myo G和含萤火虫荧光素酶报告基因的报告载体p GL3-P1、p GL3-P2。重组质粒经酶切和测序鉴定后,利用共转染的方法将真核表达载体和报告载体转染小鼠C2C12细胞,30 h后裂解细胞并检测细胞裂解液的双荧光素酶活性。最后根据荧光素酶的相对活性来分析MyoD基因家族对MyoD1启动子活性的影响。【结果】克隆得到的关岭牛MyoD基因家族CDS区和MyoD1启动子序列测序正确,载体pcDNA3.1(+)-Myf5、pcDNA3.1(+)-Myf6、pcDNA3.1(+)-MyoD、pcDNA3.1(+)-Myo G、p GL3-P1和p GL3-P2经酶切和测序鉴定,证实载体构建成功;与相应剂量的对照组相比,转染pcDNA3.1(+)-Myf5、pcDNA3.1(+)-Myf6、pcDNA3.1(+)-MyoD后,p GL3-P1的相对荧光素酶活性明显增�
- 张雯许厚强陈伟陈祥赵佳福桓聪聪夏丹周迪
- 关键词：转录因子启动子报告基因
- 基于洋葱模型的产前诊断中心护理分层培训模式的构建
- 2023年
- 根据医院产前诊断中心护士岗位的实际情况构建基于洋葱模型的护理分层培训模型,为其培训提供理论依据。方法 在2019年7月至2022年7月,回顾国内外相关文献,基于洋葱模型创建产前诊断中心护理分层培训模式和指标体系,并对护士进行培训,分析护士培训效果。结果 本院受训护士中CN0层级护士对知识和技能的需求率较高均为40.00%,能力需求率为20.00%素养的需求率为0.00%;CN1护士对知识和技能的需求率均为30.77%,能力需求率为15.38%,素养的需求率为23.08%;CN2层级护士对知识和技能的需求率为16.67%,能力的需求率为50.00%,素养的需求率为16.67%;CN3层级护士对知识和技能的需求率为20%,能力的需求率为40.00%,素养的需求率为20.00%。依据相关需求和组织者的意见,培训课合理安排在每个月进行,根据培训内容的重要性和复杂性设置为不同培训时长,主要以专科理论知识和检查项目预约服务流程及疾病知识健康宣教结合为主,根据不同分层的护士进行培训。结论 按照护理人员护龄进行分层,经理论阐述和数据分析创建的基于洋葱模型的产前诊断中心护理分层培训模式,具有可行性。
- 夏丹夏丹罗婷文谢颖
- 贵州地方黄牛不同组织中PPARγ基因表达水平研究被引量：7
- 2017年
- 试验旨在研究威宁牛、思南牛、关岭牛和黎平牛不同组织中过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptorsγ,PPARγ)基因mRNA的表达差异。以这4个贵州地方品种黄牛为试验动物,提取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪和背最长肌组织的总RNA,设计PPARγ基因的实时荧光定量引物,以牛GAPDH基因为内参,应用实时荧光定量PCR技术检测PPARγ基因在4个品种不同组织中mRNA的相对表达量。结果显示,PPARγ基因在4个品种黄牛的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、脂肪和背最长肌组织中均有表达,但在脂肪组织中的表达量高于其他组织,且差异极显著(P<0.01),在脾脏和肺脏中也有较高表达,而在肾脏、肝脏、心脏和背最长肌中表达量较低;不同品种PPARγ基因的表达在部分组织中存在差异。研究表明,PPARγ基因在不同组织中的表达量存在差异,可能与其在不同组织中的功能有关,而品种对于PPARγ基因的表达影响不大。
- 张青青许厚强陈伟陈祥周迪夏丹赵焕平孙成娟王圆圆杨洋张鸣
- 关键词：黄牛PPARΓ基因实时荧光定量PCR
- 女性精神疾病主题下《黄色墙纸》的译本分析
- 2020年
- 外国小说汉译能否再现原文人物形象,一直是汉译者们研究的重点。吴其尧于1997年发表了《黄色墙纸》的译作,译文用词精湛细腻,还原了"精神压迫"下的人物心理。短篇小说《黄色墙纸》由美国女作家夏洛特·帕金斯·吉尔曼所著,其女性精神疾病(如抑郁症、歇斯底里、神经衰弱症等)主题,揭示出十九世纪美国社会对女性的歧视与压迫。笔者通过分析原文中的精神层面现象以及译者再现人物时采用的翻译技巧(如分译和增译等),以期引起人们对涉及女性精神疾病类文学作品及其翻译研究的重视。
- 夏丹黎晓容
- 关键词：《黄色墙纸》翻译技巧
- 关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及其真核表达载体构建
- 2015年
- [目的]通过关岭牛MyoD基因CDS区的克隆、序列分析及pcDNA3.1(+)-MyoD真核表达载体的构建,为后续研究MyoD基因的调控机制奠定基础。[方法]通过设计特异性引物克隆关岭牛MyoD基因的CDS区,并用DNAStar、Ex PASy等软件对该基因CDS区进行序列分析;同时利用双酶切的方法构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD。[结果]关岭牛MyoD基因的CDS区全长957bp,编码318个氨基酸;其编码的蛋白属于亲水性蛋白,蛋白二级结构主要以α-螺旋及无规则卷曲为主,含有b HLH结构域,无明显的跨膜区域。同源性分析显示,关岭牛MyoD基因的CDS区序列与海福特牛和山羊的同源性最高,核苷酸同源性为98.96%和96.9%,氨基酸同源性为100%和89.3%。MyoD蛋白的氨基酸肽链长度由低等动物到高等动物有逐渐加长的趋势。[结论]成功克隆了关岭牛MyoD基因的CDS区,并构建了其真核表达载体pcDNA3.1(+)-MyoD,为进一步研究MyoD基因在成肌分化过程中的作用及其调控机制奠定基础。
- 张雯张雯许厚强陈伟陈祥桓聪聪夏丹
- 关键词：真核表达载体
- 关岭牛MyoD基因原核表达载体的构建及生物信息学分析被引量：1
- 2015年
- 本实验采用RT-PCR方法克隆关岭牛MyoD基因的CDS区,利用Eco RⅠ、XhoⅠ酶对目的片段与pET32a(+)原核表达载体进行酶切,T4连接酶连接过夜,通过转化,测序,构建重组表达载体,并对该基因进行相关生物信息学分析。实验结果获得了关岭牛Myo D基因CDS区,成功构建了p ET-32a(+)-MyoD重组表达载体。MyoD基因编码区为954 bp,编码318个氨基酸,共有31个稀有密码子,表达蛋白大小为34.2 kD。该蛋白为水溶性蛋白,等电点p I=5.8,在体内带负电,二级结构中α-螺旋、无规则卷曲较多。蛋白没有信号肽和明显的跨膜区,为胞内蛋白,主要存在于细胞核中。重组载体表达的Myo D蛋白带有His等标签,蛋白大小为53.6 kD,共497个氨基酸。实验对关岭牛Myo D蛋白的理化性质、结构特点进行了初步分析,以期为研究牛MyoD蛋白特性及其作用机制奠定理论基础。
- 夏丹许厚强陈伟陈祥周迪张雯桓聪聪赵焕平张青青孙成娟
- 关键词：原核表达载体生物信息学
- 关岭牛MyoDI基因启动子上转录因子结合位点的筛选被引量：4
- 2015年
- 本研究旨在筛选出关岭牛MyoDI基因启动子上的转录因子结合位点。根据GenBank已公布的牛MyoDI基因的启动子序列,设计特异性PCR引物,扩增贵州关岭牛MyoDI基因的启动子区,构建重组克隆载体pUCM-TMyoDI-pro,并对阳性质粒进行测序鉴定。再利用筛选试验和生物信息学分析筛选出关岭牛MyoDI基因启动子上的转录因子结合位点。结果,筛选出关岭牛MyoDI基因启动子上含有的转录因子结合位点有SATB1、Xbp、MEF2、Pax-3、Pbx1、PPAR、TFⅡD、COUP-TF、Gfi-1、HNF-1、HOX4C、NRF2(ARE)、MEF1、RXR、SMUC、Snail、MyoD、VDR。结合在线软件分析和文献,最终筛选出关岭牛MyoDI基因启动子上含有MyoD、TFIID、Pax3、MEF1、VDR和MEF2转录因子结合位点,这些转录因子对启动子活性起着重要的调控作用。结果显示,关岭牛MyoDI基因启动子上含有MyoD、TFIID、Pax3、MEF1、VDR和MEF2转录因子结合位点。
- 张雯许厚强陈伟陈祥桓聪聪夏丹周迪
- 关键词：转录因子结合位点启动子生物信息学分析
- 不同年龄关岭黄牛生长性状及肌肉氨基酸组成分析被引量：7
- 2015年
- 为研究年龄与关岭黄牛肉质的关系,为关岭黄牛开发利用提供参考依据,试验对不同年龄关岭黄牛体尺、粗蛋白、粗脂肪、肌肉嫩度及氨基酸含量等指标进行了测定分析;并通过计算氨基酸比值系数分评价关岭黄牛牛肉营养价值。结果表明:关岭黄牛不同年龄组间体斜长、体高、体重差异极显著(P<0.01),胸围、胸宽、粗脂肪含量和肌肉嫩度差异显著(P<0.05),粗脂肪、粗蛋白含量随年龄的增长呈增加趋势。18月龄和30月龄关岭黄牛肌肉氨基酸总量分别为76.26和76.18 g/100 g,富含各种氨基酸,不同年龄组间氨基酸含量差异不显著(P>0.05)。参考WHO/FAO氨基酸模式谱,关岭黄牛肌肉必需氨基酸组成基本符合模式谱参考值,且氨基酸比值系数分都在78分以上,氨基酸组成满足理想氨基酸模式,营养价值均衡。关岭黄牛肉富含蛋白质、必需氨基酸和鲜味氨基酸,营养丰富,是一种优质蛋白质来源。
- 刘忠伟陈伟夏丹
- 关键词：年龄生长性状氨基酸营养价值
- 关岭牛MSTN基因启动子相关转录因子的筛选、克隆及表达纯化
- 肌肉生长抑制素（Myostatin，MSTN），是动物肌肉生长发育过程中一个重要的负调控主效基因，MSTN基因具有组织特异性，主要在骨骼肌中特异性表达;肌抑素能调控肌肉生长、动物脂肪的沉积和骨骼的生长发育，还能影响肌键和...
- 夏丹
- 关键词：MSTN基因转录因子肌肉生长启动子活性
- 关岭牛MyoD Ⅰ基因在不同组织和时期中的表达分析被引量：4
- 2015年
- 为研究MyoDⅠ基因在关岭牛不同组织表达量的差异及在肌肉发育过程中的表达情况,试验采用实时荧光定量PCR技术对关岭牛背最长肌、大腿肌、心脏、肝脏、脂肪、小肠6个组织的MyoDⅠ基因相对表达量进行检测。同时分析关岭牛胎儿、18月龄、30月龄时期背最长肌组织中MyoDⅠ基因的表达规律。结果显示,MyoDⅠ基因在背最长肌中表达量最高,在出生后的关岭牛肌肉组织中也具有较高的表达量,且随着出生时间的推移呈上升趋势。推测可能由于背最长肌是肌肉富集地方,因此基因表达量较高,随着年龄增大,肌肉丰满度增加,基因表达量也随着增加。
- 桓聪聪许厚强陈伟陈祥赵佳福张雯周迪夏丹
- 关键词：MYOD实时荧光定量PCR表达量
