王昊亮
- 作品数:6 被引量:4H指数:2
- 供职机构:第三军医大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- β2M-绿色荧光蛋白在MHC-Ⅰ肽亲和力实验中的应用被引量:2
- 2009年
- 目的构建并表达β2微球蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白,并应用该蛋白建立一种全新的MHC-Ⅰ肽亲和力实验方法。方法构建β2M-ZsGreen-6×His标签的融合蛋白真核表达质粒,转染293FT细胞表达,并以镍亲和层析法纯化,将该融合蛋白与表位肽共同与T2细胞反应,通过流式细胞术检测T2细胞标记绿色荧光的情况鉴定表位。结果构建了β2微球蛋白-绿色荧光蛋白真核表达质粒并表达、纯化得到融合蛋白,该蛋白可应用于亲和力实验,进行表位鉴定。结论β2微球蛋白-绿色荧光融合蛋白应用于亲和力实验鉴定CTL表位方法可行,步骤简便,适用于大通量表位鉴定。
- 熊锐华王昊亮邹丽云李景怡张晋宇张荣华万瑛
- 关键词:绿色荧光蛋白融合蛋白T细胞表位
- 基于随机引物条码技术建立分析免疫库谱的方法
- 本发明针对医药生物技术,涉及基于引物条码技术的高通量测序方法及其用于免疫基因组学中的研究,具体为基于cDNA分子的标记方法的T细胞受体高通量测序方法,具体包括以下步骤:提取样本中的RNA,对RNA进行逆转录,得cDNA,...
- 尚小云吴玉章董惠王昊亮
- 文献传递
- CT抗原KM-HN-1 HLA-A*0201限制性CTLs表位的鉴定
- 肿瘤是目前影响人类健康的重要疾病之一,目前临床上治疗肿瘤主要依靠手术切除,放射治疗和化学药物治疗这3种手段。令人遗憾的是,尽管有着明显的治疗效果,上述3种手段都有着自身的缺陷往往不能根除体内肿瘤。 目前普遍认为肿瘤的发生...
- 王昊亮
- 关键词:CT抗原CTLS表位预测
- 文献传递
- β2微球蛋白与绿色荧光蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种β2微球蛋白与绿色荧光蛋白的融合蛋白,其氨基酸序列包括与SEQ ID No.1所示序列具有至少85%相同性的第一区和与SEQ ID No.2所示序列具有至少85%相同性的第二区;还公开了编码该融合蛋白的基...
- 万瑛熊锐华王昊亮吴玉章
- 文献传递
- CT抗原KM-HN-1 HLA-A*0201限制性表位预测及其与HLA-A*0201结合强度分析被引量:2
- 2006年
- 目的通过对CT抗原(cancer-testis antigen)KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测,并对候选表位肽与HLA-A*0201分子结合亲和力及复合物稳定性进行分析,为探索基于KM-HN-1的免疫治疗奠定基础。方法利用基于蛋白酶体剪切位点特异性的算法PAProc及基于肽MHC-I结合的算法BIMAS和SYFPEITHI对KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测.合成KM-HN-1相关候选表位肽KM-HN-I321-329(KLLPFRETV),KM-HN-I303-211,(FLPTAPPNV),KM-HN-I629-637。(TLLQIIETV),KM-HN-I87-95(ILNKSIIEV),KM-HN-I538-596。(QMMEALDQL)及阳性对照肽HBVcAg18-27(FLPSDFFPSV);对这些合成肽与HIA-A*0201分子结合亲和力及其复合物稳定性根据文献报道的方法进行分析。结果KM-HN-I321-329(KLLPERETV)结合亲和力最低,KM-HN—I203-211(FLPTAPPNV)结合亲和力最高,其余3条肽结合亲和力介于2者之间;稳定性实验(DC50)结果显示:KM-HN-I538—546(QMMEALDQL)DC50小于2h,KM—HN-I321-329(KLLPERETV)的DC50介于2~4h之间,KM-HN-I87-95。(ILNKSIIEV)的DC50介于6~8h之间,KM-HN-I233-211(HLPTAPPNV)及KM-HN-I629—633(TLLQIIETV)的DC50均大于8h。结论基于蛋白酶体剪切位点特异性的算法及基于肽MHC-I结合的算法对KM-HN-1进行HLA-A*0201限制性表位预测,结合候选表位肽与HLA-A*0201分子结合的亲和力与复合物稳定性实验分析,为该抗原HLA-A*0201限制性表位的鉴定奠定了基础。
- 王昊亮付晓岚姜曼黎万玲唐艳吴玉章
- 关键词:CT抗原表位预测
- β2微球蛋白与绿色荧光蛋白的融合蛋白及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种β2微球蛋白与绿色荧光蛋白的融合蛋白,其氨基酸序列包括与SEQ ID No.1所示序列具有至少85%相同性的第一区和与SEQ ID No.2所示序列具有至少85%相同性的第二区;还公开了编码该融合蛋白的基...
- 万瑛熊锐华王昊亮吴玉章
- 文献传递