牛明月
- 作品数：11 被引量：18H指数：2
- 供职机构：浙江农林大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 光皮桦LFY同源基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2015年
- 以珍贵用材树种光皮桦(Betula luminifera)为材料,采用同源克隆与RACE的方法,克隆获得LFY同源基因,命名为Bl LFY(Gen Bank号:KP970616)。Bl LFY基因c DNA全长1 305 bp,开放阅读框(ORF)长1 212 bp,编码403个氨基酸。基因结构分析显示,Bl LFY基因具有2个内含子和3个外显子,与其它植物同源基因具有一致的基因结构。多序列比对和系统进化分析表明,Bl LFY基因编码蛋白具有典型的N-domain和C-domain,与板栗(Castanea mollissima)及核桃(Juglans regia)等木本植物的LFY具有最高的同源性和进化关系。进一步的表达模式分析结果表明,Bl LFY基因在光皮桦植株进入成年期时表达水平最高,在开花植株的营养器官和生殖器官中均有表达,且贯穿雌、雄花序发育的整个过程,但在雌花序中的表达明显高于雄花序,说明Bl LFY基因可能与花期转换和花器官的发育有关,但在雌、雄花序发育过程中的调控作用可能不同。
- 牛明月周厚君周世水李玉岭黄华宏童再康林二培
- 关键词：光皮桦LFY开花
- 一种云锦杜鹃多倍体的培育方法
- 本发明提供了一种云锦杜鹃多倍体的培育方法，涉及植物生物技术领域，包括如下步骤：云锦杜鹃种子灭菌后，以氨磺乐灵进行处理；种子萌发后移栽至育苗块进行培养，然后通过气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化，检测确认的染色体加倍植...
- 林二培杨彬楼雄珍牛明月黄华宏童再康
- 文献传递
- 光皮桦实时荧光定量PCR内参基因的筛选被引量：14
- 2016年
- [目的]利用定量PCR和表达分析软件研究候选内参基因在光皮桦不同组织中的表达稳定性,并通过目的基因的表达分析验证其可靠性,以获得可用于光皮桦定量PCR的稳定内参基因。[方法]选取16个常用的看家基因作为候选内参基因,设计引物,通过普通PCR、溶解曲线及琼脂糖凝胶电泳验证引物的特异性;通过实时荧光定量PCR及软件ge Norm、Norm Finder和Best Keeper分析候选内参基因在光皮桦16个不同组织中的表达稳定性,根据分析结果筛选出最佳的内参基因和组合,并进一步通过2个目的基因CSLD和KOR对内参基因的稳定性进行验证。[结果]PCR和电泳结果显示,候选内参基因PCR目的片段条带清晰单一,熔解曲线也呈现明显的单一峰,表明这些引物的特异性良好。利用特异引物,对这些候选基因在16个不同组织的表达进行分析,发现除了18S,其他基因的Ct值均集中在25~30之间,表明内参基因在不同组织中表达较稳定,它们之间的表达水平差异不明显。Norm Finder和Best Keeper分析结果均表明基因EF1α的稳定性最好,ge Norm计算得出最稳定的是TATA,而UBi-lp在所有候选内参基因中表达最不稳定。进一步选取3个稳定表达候选基因（EF1α,TATA和UBi4）及稳定性较差的UBi-lp作为内参基因,对2个目的基因CSLD和KOR在不同组织中的相对表达进行分析,结果表明这2个目的基因相对于3个稳定的内参基因显示出一致的相对表达量,而不稳定的内参基因UBi-lp并没有对表达数据进行有效的标准化,结果存在明显偏差。[结论]通过实时荧光定量PCR及综合3种软件分析的结果,在光皮桦不同的组织中,EF1α,TATA和UBi4内参基因的表达稳定性高,对这3个基因进行验证并明确其作为荧光实时定量PCR内参的可靠性。因此,EF1α,TATA和UBi4可作为研究基因在光皮桦不同组织器官中表达的稳定内参。
- 刘文哲牛明月李秀云林二培黄华宏童再康
- 关键词：光皮桦内参基因实时荧光定量PCR
- 一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法
- 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法，其包括如下步骤：1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株，取当年生的茎段，用流水冲洗5‑20min，剥去树皮；2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行...
- 董玉田林二培楼雄珍牛明月黄华宏童再康
- 文献传递
- 光皮桦成花相关BlLFY基因的克隆和表达分析
- 光皮桦(Betula luminifera H.Wink.)是广泛分布于我国南方珍贵用材树种,材质优良,具有重要的经济价值.同时,光皮桦童期较短,是林木遗传育种研究的良好材料,研究其开花相关基因的功能及分子机制对于了解林...
- 牛明月林二培黄华宏童再康
- 关键词：光皮桦成花克隆
- 光皮桦成花相关MADS-box基因BlMADS1的克隆与表达被引量：3
- 2015年
- MADS-box家族基因广泛分布于植物中,在花发育过程中起着重要调控作用。采用同源克隆结合c DNA末端快速扩增技术(RACE)在光皮桦Betula luminifera中克隆到1个MADS-box基因,命名为Bl MADS1。该基因可能存在2个不同的转录本Bl MADS1S和Bl MADS1L:前者为1 150 bp,编码254个氨基酸,具有MADS-box基因的典型结构,与欧洲白桦Betula pendula的同源基因相似性最高(97%);后者长1 312 bp,但仅含有690 bp的开放阅读框(ORF),编码229个氨基酸,缺失MADS-box蛋白的C端。这种缺失可能由内含子可变剪切造成。同源比对和系统进化分析表明:Bl MADS1属于AP1/SQUA亚家族的AGL79这一分支。定量聚合酶链式反应(PCR)表达分析表明:Bl MADS1基因在根、茎、叶和花器官中均有表达,但Bl MADS1S和Bl MADS1L这2个转录本表达模式存在差异。雄花序发育过程中,Bl MADS1的2个转录本的表达峰值均在萌动雄花序时期;而在雌花序发育过程中,Bl MADS1L和Bl MADS1S表达水平的峰值分别出现在初生雌花芽和萌动雌花序。
- 赵传慧周厚君童再康林二培黄华宏牛明月
- 关键词：林木育种学光皮桦开花MADS-BOX
- 一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法
- 一种光皮桦组培苗生根基质及其生根移栽的方法，属于植物无性繁殖技术领域。其特征在于：所述基质为泥炭、珍珠岩和蛭石混合物，并用MS+蔗糖的液体培养基浸湿。其生根移栽主要包括基质的选取与配制、接种、培养、炼苗移栽等步骤。本发明...
- 牛明月林二培黄华宏董人珲童再康楼雄珍
- 文献传递
- 光皮桦成花相关SPL基因的克隆、表达及功能分析
- SBP-box基因家族是植物特有的一个转录因子基因家族，广泛存在于绿色植物中，在成花过程中起关键的调控作用。本研究以珍贵用材树种光皮桦为材料，采用RACE的方法，克隆获得光皮桦的13个SPL基因，通过生物信息学、亚细胞定...
- 牛明月
- 关键词：光皮桦基因表达
- 文献传递
- 一种云锦杜鹃多倍体的培育方法
- 本发明提供了一种云锦杜鹃多倍体的培育方法，涉及植物生物技术领域，包括如下步骤：云锦杜鹃种子灭菌后，以氨磺乐灵进行处理；种子萌发后移栽至育苗块进行培养，然后通过气孔法和流式细胞仪法检测染色体倍性变化，检测确认的染色体加倍植...
- 林二培杨彬楼雄珍牛明月黄华宏童再康
- 文献传递
- 一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法
- 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法，其包括如下步骤：1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株，取当年生的茎段，用流水冲洗5‑20min，剥去树皮；2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行...
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