赵晶
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省国际科技合作计划中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- CDK1靶向shRNA质粒载体的构建及鉴定被引量：3
- 2011年
- 目的:设计并构建CDK1-shRNA质粒表达载体,转染肝癌HepG2细胞,验证shRNA对肝癌HepG2细胞CDK1基因的沉默效应,便于进一步研究CDK1的功能。方法:设计针对CDK1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的 pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体片段进行连接、转化。经测序等方法鉴定重组克隆。将重组载体质粒经脂质体包裹转染肝癌HepG2细胞,realtime PCR及Western blot检测RNA干扰效果。结果:重组克隆经测序证实插入的序列正确,realtime PCR及Western blot检测证实设计的3条RNA干扰序列有效沉默了肝癌HepG2细胞中的内源性CDK1。结论:所制备的CDK1-shRNA在肝癌HepG2细胞中可获得高效转染,并能产生特异性的基因沉默效应,以CDK1为靶向的shRNA能够有效下调CDK1基因的表达,对周期依赖激酶CDK1功能的研究奠定基础。
- 赵晶韩苏夏马瑾璐黄辰张丹
- 关键词：SHRNACDK1基因沉默肝癌细胞
- 慢病毒介导的融合基因SP-TAT-Apoptin对HepG2细胞的作用被引量：2
- 2010年
- 目的:将已构建的SP-TAT-Apoptin融合基因真核表达载体包装成感染性慢病毒颗粒,并用病毒颗粒感染肝癌HepG2细胞,测定其诱导凋亡的效率。方法:通过脂质体Li-pofectamine TM2000将SP-TAT-Apoptin融合基因真核表达载体与其他包装质粒共同转导入293FT细胞,包装并收集感染性病毒颗粒,用实时定量PCR法测定病毒滴度,免疫荧光法检测重组慢病毒感染的293FT细胞中SP-TAT-Apoptin融合基因的表达,同时通过流式细胞术(FCM)测定慢病毒感染后HepG2细胞的凋亡率。结果:SP-TAT-Apoptin重组慢病毒感染293FT细胞后,用V5抗原单克隆抗体(mAb)进行免疫荧光化学检测,示SP-TAT-Apoptin融合基因可成功表达于293FT细胞;通过Anexin-VPI法检测示SP-TAT-Apoptin融合基因慢病毒感染肝癌HepG2细胞后可引起细胞凋亡,其凋亡效率明显高于单纯脂质体转染组。结论:成功包装出可表达SP-TAT-Apoptin融合基因且具感染性的慢病毒颗粒,感染HepG2肝癌细胞后可引起其凋亡,为进一步研究融合基因SP-TAT-Apoptin体内治疗效果极其在临床中的应用奠定了基础。
- 韩苏夏赵晶马瑾璐黄辰吕毅欧玮贾茜
- 关键词：APOPTIN融合基因慢病毒细胞凋亡
- 肿瘤放射敏感性的研究进展被引量：1
- 2014年
- 恶性肿瘤是一种多发病,常见病,严重威胁着人类的生命健康。在手术、放疗、化疗这三种主要治疗手段中,放疗因其适应证宽、疗效较好而有着不可置疑的重要地位。然而在治疗过程中,依然存在着辐射抵抗和辐射耐受现象,大大降低了放射治疗的疗效。因此提高肿瘤的放疗敏感性已成为目前研究的重点和热点。本文就近年国内外学者对提高肿瘤放疗敏感性问题的研究进展做一述评。
- 赵莹赵晶韩苏夏
- 关键词：DNA损伤修复ATM凋亡
- 冬凌草甲素诱导人多发性骨髓瘤LP-1细胞凋亡的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的探讨冬凌草甲素(Oridonin)对LP-1细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法采用不同浓度冬凌草甲素处理人多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)LP-1细胞,通过MTT比色法检测LP-1细胞的增殖活性,Annexin V/PI双染色法检测LP-1细胞的凋亡效应,透射电子显微镜观察药物作用后细胞超微结构的变化,RT-PCR检测凋亡相关基因mRNA表达变化。结果冬凌草甲素抑制LP-1细胞增殖呈时间和剂量依赖性;Annexin V/PI双染色法检测显示,随着作用药物浓度的增加以及药物作用时间的延长,LP-1细胞凋亡率显著增加。通过透射电子显微镜可见药物作用后的细胞呈现核染色质边集,线粒体肿胀等细胞凋亡的表现。冬凌草甲素作用后LP-1细胞中PDCD5、Bid mRNA表达上调,Bcl-2、NF-κB mRNA表达下调。结论冬凌草甲素通过上调Bid及下调Bcl-2 mRNA表达降低线粒体膜电位、触发LP-1细胞的线粒体凋亡途径诱导细胞凋亡;亦可作为NF-κB活性抑制剂阻断NF-κB激活,诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖。其中PDCD5作为凋亡促进剂的作用仍需进一步的深入研究。
- 赵晶张梅陈颖
- 关键词：冬凌草甲素多发性骨髓瘤细胞凋亡
- 吉西他滨对放射相关DNA损伤修复的影响被引量：4
- 2014年
- 目的研究吉西他滨（GEM）在体外对胰腺癌细胞的放疗增敏作用及机制。方法体外培养胰腺癌Pancl细胞株，将其分为空白对照组、单纯照射组、吉西他滨组及吉西他滨联合放疗组（联合放疗组）。采用源皮距（SSD）为100cm，剂量2、4和6Gy的4MV—X线进行细胞照射；运用MTT实验方法选出细胞生长抑制率≤10％的药物浓度（IC10），即GEM的最佳实验浓度；克隆形成实验观察空白对照组、GEM组、单纯放疗组及联合放疗组胰腺癌细胞Pancl体外增殖情况。流式细胞仪分析上述各组细胞的细胞周期和凋亡改变。免疫印迹法分别检测空白对照组、GEM组、单纯放疗组及联合放疗组DNA损伤以及损伤修复指标ν-H2AX、Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的表达。结果GEM在体外具有放射增敏作用。MTT结果显示，GEM在0．04～0．06μmol／L之间为最佳实验浓度。射线照射后，GEM能显著降低胰腺癌细胞的克隆形成能力，即增殖能力。凋亡结果显示，与GEM组及单独放疗组比较，联合放疗组Pancl细胞的凋亡数明显增加，其凋亡率差异有统计学意义（P＜0．05）；细胞周期检测结果表明，GEM作用于胰腺癌细胞后，S期细胞水平明显升高。胰腺癌细胞DNA损伤指标ν-H2AX蛋白表达水平在GEM组，单纯放疗组及联合放疗组均增加，联合放疗组较GEM组有进一步升高。与空白对照组、单纯照射组、GEM组比较，联合放疗纽胰腺癌细胞中DNA损伤修复指标Rad51、Ku80及p-ATM蛋白的表达均降低。结论GEM对胰腺癌放射治疗有增敏作用。其机制涉及诱导细胞凋亡，改变Pancl细胞生长周期，并通过抑制射线照射后胰腺癌细胞DNA损伤修复，间接对胰腺癌的放疗起增敏作用。
- 赵晶韩苏夏
- 关键词：胰腺癌吉西他滨放疗增敏DNA损伤修复
- 实验诊断学中“临床血液学检验”教学方法探讨被引量：3
- 2017年
- "临床血液学检验"是实验诊断学的重要内容,也是医学生必须掌握的内容。通过病例分析导入式教学激发学生学习兴趣;综合应用多种教学方法,提高课堂学习效率;利用病例分析进行小结,回顾课堂所学内容;开放实验室,加强指导,以提高"临床血液学检验"教学质量,实现教学目标。
- 王晓宁陈颖赵晶贺鹏程张梅
- 关键词：实验诊断学临床血液学检验多媒体教学PBL教学法
- 雄黄诱导人弥漫性大B淋巴瘤SU-DHL-4细胞凋亡及其机制的初步研究被引量：6
- 2014年
- 本研究旨在探讨雄黄(Realgar,As4S4)诱导人弥漫性大B淋巴瘤SU-DHL-4细胞凋亡及其可能的机制。采用MTT法观测雄黄对SU-DHL-4细胞的增殖抑制作用,应用流式细胞术检测药物对SU-DHL-4细胞周期的影响及其诱导凋亡情况,利用琼脂糖凝胶电泳方法观察凋亡细胞的DNA降解情况,通过透射电子显微镜技术观察药物作用前后细胞超微结构的变化,采用Western blot方法检测药物诱导SU-DHL-4细胞48 h后Caspase-3、Bcl-2以及Bax蛋白表达情况。结果表明:20、40、80μmol/L的雄黄均可抑制SU-DHL-4细胞增殖,抑制率呈时间-剂量依赖性(r=0.982;P<0.05);AnnexinV/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率显示雄黄作用SU-DHL-4细胞48 h后,随着药物浓度的增加,早期凋亡细胞所占比率增高(P<0.05);PI单染流式细胞术检测细胞周期发现,雄黄作用SU-DHL-4细胞48 h后处于细胞周期S期的细胞显著减少(P<0.05);透射电子显微镜下观察雄黄作用SU-DHL-4细胞48 h后各浓度组细胞,均呈典型凋亡的改变,偶见坏死细胞;琼脂糖凝胶电泳结果显示,各浓度实验组雄黄干预SU-DHL-4细胞48 h后,细胞核DNA降解呈梯状;Western blot结果显示,雄黄作用SU-DHL-4细胞48 h后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax和Caspase-3蛋白表达增加。结论:雄黄可以诱导人弥漫性大B淋巴瘤细胞凋亡,其作用机制可能是通过抑制细胞增殖、阻滞细胞周期、上调Caspase-3和Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白而诱导细胞凋亡。
- 石利利朱化超张梅刘雁峰王嫄赵晶雷飞贺鹏程
- 关键词：雄黄弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞凋亡
- Apoptin对宫颈癌Hela细胞放疗增敏作用实验研究被引量：1
- 2013年
- 目的探讨Apoptin增加宫颈癌Hela细胞的敏感性及作用机制。方法应用脂质体转染方法将表达Apoptin的重组载体pEGFP-Apoptin转染入人宫颈癌Hela细胞。其中转染pEGFP-Apopti为实验组,转染pEGFP-C2组为阳性对照组,未转染组为阴性对照组。上述各组经射线干预后利用平板克隆形成实验、流式细胞术、MTT及蛋白印迹western-blot等方法分别检测细胞凋亡、周期及相关蛋白表达水平。结果 pEGFP-Apoptin在人宫颈癌Hela细胞中稳定表达。Apoptin可增加宫颈癌Hela细胞对放射线的敏感性,Apoptin可使p21、p27的表达量上调,使Rad50及Ku80的表达量下调,而对XLF的表达量则无影响。结论 Apoptin可增加宫颈癌Hela细胞的放疗敏感性,其机制可能与细胞周期阻滞及同源与非同源重组修复相关蛋白的表达水平改变有关。
- 王丽赵晶韩苏夏
- 关键词：宫颈癌放疗敏感性APOPTINHELA细胞
