张力
- 作品数:10 被引量:45H指数:3
- 供职机构:中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 伤寒沙门菌CT18和新疆XJ19体外培养条件下的蛋白质组差异分析
- 2009年
- 目的:分析我国新疆伤寒沙门菌分离株XJ19与全基因组测序的国际标准菌株CT18的蛋白表达差异,并推算基因差异。方法:运用二维蛋白电泳,对CT18和XJ19在体外培养基中的全菌蛋白进行分离,使用PDQuest软件找到其差异蛋白,进行质谱鉴定;对CT18差异蛋白编码基因设计引物,以XJ19DNA为模板进行PCR扩增,检测CT18差异蛋白编码基因在XJ19的存在情况。结果:菌株XJ19中存在53个特异蛋白点,鉴定出47个,但这些蛋白的编码基因在CT18中均存在,其中36个蛋白点在CT18的蛋白谱中不存在,11个蛋白在CT18中处于其他修饰状态;CT18中找到13个特异蛋白点,质谱鉴定出7个,其中6个所对应基因在XJ19中均能扩增出目的片段,但点C9蛋白的编码基因在XJ19中不存在。菌株XJ19中的多个差异蛋白参与磷酸戊糖途径的代谢及信号感应调控,此外超氧化物歧化酶、外膜蛋白OmpA呈现与CT18不同的修饰状态。结论:我们认为不同伤寒沙门菌分离株的遗传差异不仅仅是基因的有或无,还包括蛋白的不同表达和修饰所造成的不同调控机制和代谢的差异。
- 张力张茜张红芝阚飙
- 关键词:伤寒沙门菌差异蛋白代谢
- 伤寒与甲型副伤寒实验室诊断方法的研究进展被引量:2
- 2009年
- 伤寒沙门菌和副伤寒沙门菌是引起肠热症的病因,在发展中国家是威胁人们健康的重要问题。两者临床症状难于区分,确切的病原学检测及鉴别诊断非常必要。本文回顾了伤寒从分离培养、血清学方法到PCR方法,以及鉴别伤寒和甲型副伤寒沙门菌感染的几种多重PCR方法。这几种多重PCR方法分别以扩增rfb基因簇中伤寒和甲型副伤寒沙门菌各自特异基因,扩增O抗原、Vi抗原、鞭毛蛋白编码基因及扩增多个特异的蛋白编码序列达到鉴别诊断的目的。
- 张力阚飙
- 关键词:伤寒甲型副伤寒
- 脉冲场凝胶电泳和自动化核糖体分型方法用于霍乱弧菌分子分型能力的比较被引量:3
- 2011年
- 目的比较脉冲场凝胶电泳(PFGE)和自动化核糖体分型两种方法对霍乱弧菌的分型能力。方法应用PFGE和自动化核糖体分型分析254株O1群和37株O139群霍乱弧菌,比较两种方法的分型力、分辨力和对暴发菌株的分析能力。结果 PFGE将254株O1群和37株O139菌株分别分为211和21个型别,分型D值分别为0.9952和0.9339;自动化核糖体分型将同样的菌株分为101和10个型别,分型D值分别为0.9075和0.8033。PFGE和自动化核糖体分型均可以区分O1群霍乱的暴发相关和不相关菌株。PFGE能够将不同起O139暴发来源的菌株分开,同时将相同暴发来源的菌株分为相同的型别;自动化核糖体分型不能完全区分不同起O139暴发来源的菌株,也不能将同起O139霍乱暴发来源的菌株分为相同的型别。结论在霍乱弧菌分型方面,PFGE和自动化核糖体分型方法均具有相同的分型力,但PFGE具有更高的分辨力和更好的暴发菌株分析能力。自动化核糖体分型方法在霍乱暴发调查中具有局限性,更适合用于菌株鉴定。
- 周海健张力韩辉刁保卫逄波章丽娟阚飙
- 关键词:脉冲场凝胶电泳分子分型霍乱弧菌
- 肠炎沙门菌可变数目串联重复序列位点用于多位点可变数目串联重复序列分型分析的评价被引量:6
- 2011年
- 目的 评价不同肠炎沙门菌可变数目串联重复序列(VNTR)位点用于多位点可变数目串联重复序列(MLVA)分型的可行性.方法 选取已报道使用的肠炎沙门菌11个VNTR位点,对中国不同时间和地区分离的16株菌进行初步评价,选取具有单一扩增条带的位点进行104株肠炎沙门茵的MLVA分型分析.对这些菌株同时进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析,比较MLVA分型方法与PFGE分型方法对菌株分型能力的强弱.结果 初筛得到7个VNTR位点用于扩大菌株的分析,这些位点将104株菌分为16个MLVA型别,D值为0.7222,这些菌株同时被分为22个PFGE型别,D值为0.7974.对两种方法各自所分的最大组包含的菌株进行比较,发现PFGE具有更强的分辨能力;从频数分布看,PFGE方法分型结果比较分散,MLVA分型较为集中.结论 用于国际肠炎沙门菌分型具有扩增多态性的VNTR位点在国内分离株中并不都具有多态性结果,在MLVA方法学建立中应选择更多的VNTR位点进行广泛的筛选才有利于国际实验室间的方法的统一.
- 张力韩辉周海健崔志刚闫梅英章丽娟阚飙
- 关键词:细菌分型技术串联重复序列
- 鉴别脑膜炎奈瑟菌A、B、C、Y、W_(135)群的多重聚合酶链反应诊断方法被引量:26
- 2006年
- 目的建立一种能鉴别脑膜炎奈瑟菌(Nm)A、B、C、Y、W135个血清群的多重聚合酶链反应(PCR)方法。方法首先PCR扩增Nm crgA基因,确定Nm感染;再通过多重PCR扩增荚膜表达基因orf-2和siaD基因,根据特异条带区分不同群Nm。结果多重PCR检测61株Nm与4株非Nm,能准确地鉴定并可将Nm分成5个血清群;检测4例流行性脑脊髓膜炎患者的脑脊液,2例出现A群400 bp的特异条带,而细菌培养和胶乳凝集方法检测均为阴性;检测18份流行性乙型脑炎患者标本,与胶乳凝集试验结果一致。结论多重PCR诊断方法能正确鉴别不同群Nm,对流行性脑脊髓膜炎的临床诊断与流行病学调查有重要意义。
- 张力邵祝军徐丽
- 关键词:脑膜炎奈瑟菌多重聚合酶链反应流行性脑脊髓膜炎
- 伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌分离株的外膜蛋白谱比较被引量:1
- 2011年
- 目的:比较伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌流行菌株的外膜蛋白谱差异。方法:运用二维蛋白电泳方法,对我国伤寒沙门菌株XJ90和甲型副伤寒沙门菌株JX2005-92在实验室通用营养条件下培养提取的外膜蛋白进行分离,比对其差异,对差异蛋白点进行质谱鉴定,对鉴定蛋白点的基因序列也进行比较。结果:菌株XJ90中发现20个特异蛋白点,质谱鉴定出16个;菌株JX2005-92中发现29个特异蛋白点,鉴定出18个。在这些蛋白中,OmpA是数目最多的同种差异蛋白。这些差异蛋白点中的大部分编码基因在2种细菌中序列高度相似或相同。结论:伤寒沙门菌和甲型副伤寒沙门菌基因序列高度相似的外膜蛋白具有不同的修饰形式,提示其不同遗传背景在相同的环境条件下表现出精细的功能差异。
- 张力王瑞白闫梅英肖迪阚飙
- 关键词:外膜蛋白二维电泳伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌
- 1961-2010年中国O1群El Tor型霍乱弧菌产毒株ctxB和rstR基因变迁被引量:3
- 2014年
- 目的 分析1961-2010年中国不同地区分离的O1群El Tor型霍乱弧菌产毒株的ctxB变异特征和rstR基因类型.方法 选取中国1961-2010年间分离的O1群霍乱弧菌菌株作为研究对象,共385株.应用PCR方法扩增ctxB基因并进行序列测定和分析;使用rstR型特异性引物扩增rstR基因,确定其基因型别.结果 ctxB基因序列分析表明,385株被检菌株中52.5%(202/385)携带ctxBET,47.5%(183/385)携带ctxBc1ass,即第39位的酪氨酸(Y)变为组氨酸(H),68位的异亮氨酸(Ⅰ)变为苏氨酸(T),呈现古典生物型菌株(O395)的序列特征.1961-1992年以携带ctxBET的菌株占绝对优势,比例高达98.4%(182/185);1993年后,携带ctxBclass的菌株增加,其中1993-2005年间携带ctxBc1ass菌株的比例达到97.2% (174/179);自2006年开始,重新出现了ctxBET为主导或二者共存的局面.rstR基因的检测表明约62.9%(242/385)的菌株携带rstRET,6.8% (26/385)的菌株携带rstRclass,其余菌株中存在不同的rstR组合形式,其中,以rstRET+ rstRc1as的组合最多,占75.7%(75/99).与ctxB相似,不同型别rstR的分布呈现时间特异性,1961-1992年期间以携带rstRET的菌株占主导(87%,161/185),1993年以后出现多态性变异,携带其他类型rstR如rstRclass,rstRenv及不同rstR组合的菌株明显增多,与rstRET共同存在.96%(25/26)、84%(63/75)和18/18的分别携带rstRclass、rstRET+ rstRclass组合和rstRET+ rstRc1ass+ rstRenv组合的菌株均分离于1993年之后.结论 中国霍乱弧菌菌株中ctxB和rstR的型别分布有明显的时间特异性,rstR存在多种组合形式,反映了菌株多样性的遗传和进化特征.
- 梁未丽赵璇张力崔志刚李杰阚飙
- 关键词:基因型
- 中国O1群El Tor霍乱弧菌产毒株表型多态性研究被引量:3
- 2014年
- 目的:了解近50年中国不同地区分离的O1群El Tor型霍乱弧菌产毒株的生物表型特征变化。方法采用多粘菌素B敏感试验、第Ⅳ组霍乱噬菌体裂解试验、VP试验和溶血实验进行表型特征分析。结果生物型表型特征分析表明133株菌具有典型的El Tor生物型表型特征,其余251株菌呈现不典型的El Tor生物型表型特征;综合ctxB、rstR基因型和生物型表型特征分析,385株检测菌株中64株为典型El Tor生物型菌株,21株菌有典型的El Tor生物型表型特征但携带古典型ctxB基因,杂合型特征菌有280株,根据ctxB、rstR和表型特征的不同组合可再分为45个杂合型。结论中国O1群El Tor霍乱弧菌菌株呈现明显的表型多态性,传统的表型分型特征不能有效区分古典生物型和El Tor生物型菌株。
- 赵璇张力李杰阚飙梁未丽
- 关键词:霍乱弧菌生物型
- 产毒和非产毒霍乱弧菌在甘露醇发酵液和Luria-Bertani培养液中的基因表达差异
- 2009年
- 【目的】分析霍乱弧菌产毒株和非产毒株在甘露醇发酵液和LB(Luria-Bertani)培养液中生长的基因表达谱和代谢差异特征。【方法】提取甘露醇发酵液和LB培养液中霍乱弧菌甘露醇慢发酵株(产毒株)N16961和快发酵株(非产毒株)93097生长第一小时的总RNA,应用霍乱弧菌N16961基因组芯片分析各菌株在不同培养液中的表达差异基因。【结果】筛选出产毒株N16961在甘露醇发酵液和LB中表达差异基因142个,非产毒株93097有418个,这些表达差异基因主要分属于6个不同的功能类群,主要是转运结合、能量代谢以及蛋白质合成代谢功能。【结论】甘露醇发酵液和LB中产毒株和非产毒株的许多功能基因的转录水平有显著差异,这些表达差异基因可能与霍乱弧菌在甘露醇发酵液中代谢产酸有关,这为进一步分析霍乱弧菌代谢甘露醇的机制、以及分析产毒株与非产毒株的甘露醇发酵快慢机制提供了基础。
- 张红芝逄波张力阚飙
- 关键词:霍乱弧菌表达谱芯片
- 聚合酶链反应扩增STY3671基因鉴别伤寒与甲型副伤寒沙门菌被引量:2
- 2012年
- 目的评价伤寒沙门菌基因STY3671用于特异性检测该血清型沙门菌的可能性。方法根据伤寒沙门菌与甲型副伤寒沙门菌外膜蛋白质组比较得到的伤寒沙门菌特异性蛋白点编码基因STY3671的序列设计引物,提取伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌以及其他非伤寒沙门菌血清型菌株的基因组DNA进行PCR检测,对引物特异性和灵敏性进行分析。结果检测的184株伤寒沙门菌均得到807 bp长度片段,部分菌株扩增产物测序结果与伤寒沙门菌标准株CT-18一致。146株甲型副伤寒沙门菌以及其余163株其他血清型沙门菌均未扩增出该片段。结论 STY3671基因能够作为特异性检测伤寒沙门菌的靶标,能够区别于甲型副伤寒沙门菌及其他常见非伤寒沙门菌血清型,在发热患者的伤寒沙门菌感染诊断、尤其使用血液标本检测中具有良好的潜在价值。
- 张力樊粉霞闫梅英阚飙
- 关键词:伤寒沙门菌聚合酶链反应