李平
- 作品数:5 被引量:18H指数:2
- 供职机构:中国科学技术大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 表面表位包埋法制备肿瘤表面抗原P185^(neuc-erbB-2)单克隆抗体及其性质研究被引量:14
- 2000年
- 目的 :细胞表面表位包埋法 (SEM)是一种选择细胞表面特定的表达分子制备单克隆抗体的新途径。由于P185 neu c erbB 2 是乳腺癌及其他肿瘤的一个重要表面标志 ,这个研究旨在应用SEM法制备特异性好 ,灵敏度高的P185单克隆抗体并分析其特性以便于临床。方法 :采用细胞表面表位包埋法免疫BALB C小鼠 ,常规杂交瘤技术进行细胞融合 ,ELISA法测定 ,有限稀释法克隆化。结果 :筛选得到 3株能稳定分泌抗人癌基因erbB 2产物P185蛋白的McAb杂交瘤细胞。经间接免疫过氧化物酶染色和流式细胞术分析证明该McAb特异性与P185阳性细胞膜结合 ,而不与结构类似的EGFR膜阳性细胞结合。免疫印迹实验证明这些McAb特异地与P185蛋白结合 ,病理切片免疫组化结果证明该单抗对乳腺癌组织呈特异膜阳性反应。结论 :SEM法制备的肿瘤表面抗原P185的McAb杂交瘤具有很好的用于临床诊断肿瘤抗原P185的价值及工程化改造的前景。
- 王琛李昀李平刘兢杨正洪吕源冈朱德厚张荣兴姚阳吴强管伟宁杨枫
- 关键词:单克隆抗体
- 血清肿瘤标记物erbB-2/HER-2蛋白检测试剂的研制
- p185是由neu/erbB-2/HER,2编码的一种重要的肿瘤表面标记蛋白,在乳腺、卵巢、肺、胃、肝等十余种癌症中均显示有过量表达的p185蛋白。检测p185对多种肿瘤的鉴别诊断,判断预后以至治疗均有重要意义。尤其对乳...
- 李平
- 文献传递
- 抗肿瘤表面抗原P185erbB-2单克隆抗体的工程化嵌合抗体的制备和性质鉴定
- 以本实验已构建的具有抗肿瘤细胞生长的单克隆抗体杂交瘤为基础,通过RT-PCR方法从杂交瘤细胞中分离出重链和轻链的可变区基因V和V,再通过SOE-PCR方法构建成鼠源单链抗体(ScFv)克隆入pCANTAB 5E载体,并在...
- 刘兢李平程联胜
- 关键词:嵌合抗体单克隆抗体ERBB-2工程化
- 文献传递
- 抗人p185单克隆抗体的体外直接抗癌效应被引量:9
- 2002年
- 目的:对使用“表面表位包埋法”构建成功的抗人肿瘤抗原p185的单克隆抗体(mAb)的抑癌活性进行研究。方法:采用免疫荧光染色法、MTT法、软琼脂培养法及细胞长期增殖法等,测定3株mAb的对高表达p185的乳腺癌细胞及转染p185基因的成纤维细胞的抑制活性,以及mAb对提高癌细胞的化疗药物敏感性的效应。结果:这3株mAb均可特异性地明显抑制癌变细胞的生长,并不同程度上提高癌细胞对化疗药物的敏感性。结论:这几株mAb具有治疗p185高表达肿瘤的应用前景。
- 李平李昀王琛刘兢
- 关键词:P185单克隆抗体乳腺癌抗癌效应
- c-erbB-2单克隆抗体A18在乳腺癌中表达特性的研究
- 2002年
- 目的 研究一株自制的 c- erb B- 2单克隆抗体 A18在乳腺癌中表达的特性。方法 应用免疫组织化学 SP法、蛋白质印迹分析法和荧光激活的流式细胞分选检测技术检测 A 18在 6 35例乳腺癌组织、10 0例癌旁乳腺组织、不表达 c- erb B-2的 NIH /3T3(鼠成纤维细胞 )和 NE91(转表皮生长因子受体基因的 NR6鼠成纤维细胞 )细胞株及高表达 c- erb B- 2的 T6 -17(转 c- erb B- 2基因的 NIH /3T3细胞 )和 SKBR3(人乳腺癌细胞 )细胞株中的表达状况 ,并与市售进口 c- erb B- 2抗体 (MaximBiotech产品 )进行了平行对照研究。 A 18系采用细胞表面区域表位包埋法免疫小鼠制备而成。结果 A18阳性染色定位于细胞膜 ,部分伴微弱的细胞浆着色 ,无明显非特异性染色。 A18和进口抗体对 NIH/3T3、 NE91细胞均呈阴性 ,T6 - 17、 SKBR3细胞均呈阳性。在乳腺癌组织中 ,A18的阳性率为 6 0 .3%,明显高于癌旁乳腺组织的 5 .0 %。 A18与进口同类单抗的阴性、阳性及总符合率分别为 84.0 %、82 .8%及 83.2 %,与进口同类多抗的阴性、阳性及总符合率分别为 88.0 %、90 .2 %和 89.5 %。A18和进口同类单抗与乳腺癌临床病理特征的关系一致。经反复冻融 7次或 4℃保存 10个月 A18效价仍保持在 3μg/ml。结论 A18特异性强、定位准确、效价高?
- 吴强杨枫官伟宁李平刘兢
- 关键词:单克隆抗体免疫组织化学流式细胞仪技术乳腺肿瘤