张宇
- 作品数：32 被引量：37H指数：4
- 供职机构：东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金教育部重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 抗人IL-1β单链抗体的构建及其中和活性的检测被引量：2
- 2013年
- 目的:原核表达抗人IL-1β(hIL-1β)的scFv,并对纯化后抗体的特异性、亲和力以及中和活性进行检测,为研制治疗类风湿关节炎的小分子抗体药物奠定基础。方法:使用PCR方法从含有抗hIL-1β抗体基因的质粒中获得抗hIL-1β的单链抗体基因,将其插入原核表达载体pET-27b(+)中,构建重组表达载体pET-27b-A-hIL-1β-scFv。将该载体转化大肠杆菌Rosetta后诱导表达,经包涵体变性、复性得到可溶的抗hIL-1βscFv蛋白。利用高效液相色谱仪对其纯度进行分析后使用Western blot和ELISA方法测定scFv抗体对抗原特异性结合能力和亲和力,使用MTT的方法检测scFv抗体中和人IL-1β蛋白的能力。结果:成功地对抗hIL-1β单链抗体进行构建、诱导、表达和纯化。得到纯度为72.05%、相对分子质量约为28 ku的目的蛋白。ELISA和Western blot结果证实scFv蛋白对hIL-1β具有特异性结合能力。MTT实验结果证实该scFv抗体可以有效阻断hIL-1β刺激L929细胞的增殖。结论:通过原核表达系统得到的抗hIL-1β单链抗体,纯化后,鉴定其与hIL-1β蛋白有特异性结合能力,并且表现出中和hIL-1β的活性,为进一步研究治疗RA的小分子抗体奠定了基础。
- 李天鹤任桂萍徐黎明周兵郭茉齐剑英张宇赵景壮于引航尹杰超李德山
- 关键词：单链抗体包涵体复性中和活性MTT
- 不同乳腺炎乳中部分相关酶变化的研究
- 为验证用药前后奶牛乳腺炎乳中乳酸脱氢酶(LDH)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)含量变化是否与乳腺炎发病程度存在相关性，以及是否可以将上述指标作为判定乳腺炎损伤的技术参数。对哈尔滨某牛场10头健康奶牛和自然发...
- 张宇王洪伟魏成威李晓蕾高利
- 关键词：奶牛疾病乳腺炎
- 氯胺酮复合麻醉剂对小型猪中枢神经NO-cGMP等信号通路的影响
- 氯胺酮复合麻醉剂是基于小型猪独特生理特点研制的一种专用于猪的制剂，为明确药物对中枢神经系统中ATP酶跨膜信号转导系统、cAMP信号转导通路和NO-cGMP信号转导通路的影响，探讨其组方成分发挥麻醉作用的主要作用脑区，及相...
- 张宇
- 关键词：小型猪氯胺酮静松灵信号转导通路
- 文献传递
- 2,6二甲苯胺噻嗪麻醉对大鼠大脑皮质、丘脑和海马ATP酶活性的影响被引量：4
- 2013年
- 为了研究2,6二甲苯胺噻嗪麻醉状态下对大鼠不同脑区Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的影响,试验采用紫外-可见光分光光度法对对照组、麻醉组、恢复Ⅰ组和恢复Ⅱ组中大鼠的大脑皮质、丘脑和海马Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性进行分析。结果表明:大鼠腹腔注射2,6二甲苯胺噻嗪后,其大脑皮质的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性分别较对照组降低48.3%和52.9%(P<0.01);丘脑的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性分别较对照组降低40.3%(P<0.05)和31.0%(P<0.01);海马的Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性分别较对照组降低28.8%(P>0.05)和29.2%(P<0.01);大鼠翻正反射恢复后和动物完全清醒后2种ATP酶活性的变化与对照组相比差异不显著(P>0.05)。说明Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性的改变在2,6二甲苯胺噻嗪全麻作用机制中可能起重要作用。
- 张宇魏成威刘本君韩光高利
- 关键词：NA+-K+-ATP酶CA2+-ATP酶大脑皮质丘脑海马
- 糖浓度对三维培养体系下小鼠胚胎干细胞成骨分化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨明胶海绵作为小鼠胚胎干细胞(ESCs)成骨诱导支架材料的可行性,并考察葡萄糖浓度对三维培养体系下小鼠ESCs骨向分化的影响。方法:体外培养小鼠ESCs,将消化所得的单细胞接种到可降解明胶海绵上,分别于高糖骨诱导培养液和低糖骨诱导培养液中进行培养,同时设立自然分化对照组。结果:诱导后第7、14天茜素红染色结果显示,高糖组矿化结节数少于低糖组。结论:明胶海绵可以作为小鼠胚胎干细胞体外成骨诱导的培养支架;在骨诱导过程中高葡萄糖浓度抑制了小鼠胚胎干细胞的骨向分化能力。
- 高雨蔚张宇邢舰誉王屹博丁超薛冰华吕嘉伟史久慧刘忠华
- 关键词：小鼠胚胎干细胞明胶海绵成骨分化
- 抗IL-1βscfv抗体与TNF—α可溶性受体融合蛋白的构建及其生物学活性分析被引量：2
- 2012年
- 目的设计原核表达抗人白细胞介素．1B单链抗体（IL-1βscfv）与TNF．仪可溶性受体的融合蛋白，并分析其生物学活性，为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物。方法利用RT-PCR方法从HeLa细胞总RNA中扩增了人肿瘤坏死因子I型受体胞外区基因片段，与抗人IL-1βscfv通过抗体铰链区融合，克隆至pET27b（＋）表达载体中，构建成pET-IL-1scfv：TNFR1质粒；转化大肠杆菌Rosetta进行表达。从包涵体中纯化得到IL-1scfv：TNFR1蛋白，进行IL-1scfv：TNFR1的鉴定及活性检测。结果ELISA结果证明，IL-1scfv：TNFRl可以分别结合hIL-1β和hTNF-α，并呈现剂量依赖性，表明IL-1scfv：TNFR1的单链抗体部分和可溶性受体部分可以各自形成正确的空间构象；免疫斑点分析证明，IL-1scfv：TNFRl与hTNF—α结合后仍可以结合hIL-1β，具有同时结合hlL-1β和hTNF-α的两种靶分子的能力，表明IL-1scfv：TNFR1的两个部分不会相互影响与靶分子的结合。活性测定结果表明，IL-1scfv：TNFRl可以有效封闭肿瘤坏死因子对L929细胞的细胞毒效应，具有显著抑制hlL-1β促进L929细胞增殖的活性，IL-1scfv：TNFR1对两种靶分子的拮抗作用均呈现明显的剂量依赖性。结论成功构建了能够同时结合hIL-1β和hTNF-α两种靶因子的双特异性IL-1scfv：TNFR1融合蛋白，并能有效抑制hTNF-α和IL-1β的生物活性，为类风湿关节炎的治疗提供新的候选药物。
- 阚方明任桂萍郭茉韩阳齐剑英张宇张雅坤李德山
- 关键词：白细胞介素1Β肿瘤坏死因子Α类风湿关节炎
- 猪原始生殖细胞生物学特性的研究
- 胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)是由胎儿原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)经体外驯化培养获得的一种多潜能干细胞.研究猪PGC生物学特性对于建立猪EG细胞系及了解...
- 马婧张宇王健宇薛冰华伟人悦李妍刘忠华
- 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞重编程
- 低聚果糖诱导的马急性蹄叶炎模型中三种相关酶质量浓度的变化
- 2015年
- 为探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和集硅酶-1在低聚果糖诱导的马急性蹄叶炎中发挥的作用,将24匹蒙古马随机分为试验组和对照组,每组12匹。试验组灌服低聚果糖,从灌服后第0到72小时,每隔4h采集1次颈静脉血(5mL),3 000r/min离心10min后用ELISA检测血浆中MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度。结果显示,MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度分别在灌服后第24、28和48小时达到峰值,峰值分别为37.96ng/mL±4.91ng/mL、199.37ng/mL±25.39ng/mL和15.11ng/mL±1.50ng/mL,与对照组差异性显著(P<0.05)。结果表明,MMP-1、MMP-9和集硅酶-1的质量浓度随时间发生较大变化,可能在急性蹄叶炎的发展过程中起到重要作用,其中MMP-9可能是关键的分子指标。
- 李欣然姜仁礼王冠颖李玥范晓静刘旭王晶璐潘佳亮陈希马云峰赵洋张宇吴越张建涛于文会高利
- 关键词：低聚果糖基质金属蛋白酶-1基质金属蛋白酶-9
- 高校青年志愿者组织管理工作探索被引量：1
- 2014年
- 在我国高校的志愿服务发展进程中，随着时代的进步而对志愿者的要求日益提高，这就要求在实践中探索出科学的志愿服务组织管理方法，形成一套科学的理论体系，引导我国高校的志愿者事业实现可持续发展。
- 陈建名张宇
- 关键词：青年志愿者高校可持续发展
- 猪原始生殖细胞生物学特性的研究被引量：1
- 2014年
- 胚胎生殖细胞(embryonic germ cell,EGC)是由胎儿原始生殖细胞(primordial germ cell,PGC)经体外驯化培养获得的一种多潜能干细胞。研究猪PGC生物学特性对于建立猪EGC及了解猪生殖细胞发育机制具有重要意义。该研究以原代培养的猪PGC为对象,探讨了其生长行为特征及其重编程过程中多能性、生殖系标志基因的表达模式。结果显示,26 d胚胎生殖嵴分离的PGC呈碱性磷酸酶阳性,细胞体积及核质比较大;体外培养初期呈现出较强的增殖及迁移能力,培养第5 d细胞增殖达到平台期,此时克隆高表达Oct4、Sox2、Nanog、c-Myc、Klf4和Ifi tm3(P<0.05),低表达Blimp1(P<0.05),Nanos1和Stella的表达水平与猪胎儿成纤维细胞无差异;猪PGC形成的原代克隆已经具有多向分化潜能。
- 马婧张宇王健宇薛冰华伟人悦李妍刘忠华
- 关键词：原始生殖细胞胚胎生殖细胞重编程
