顾建新
- 作品数：94 被引量：338H指数：11
- 供职机构：复旦大学上海医学院卫生部糖复合物重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 大鼠肾脏系膜细胞转染人TGF-β1基因可增强MMP-2表达被引量：13
- 2000年
- 目的 研究转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）对培养的大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）基质金属蛋白酶２（ＭＭＰ２）表达的影响。方法 采用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ将人ＴＧＦβ１基因转染培养的大鼠ＭｓＣ，经Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ鉴定其转染成功否；又分别应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ．Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ．酶谱分析法检测阳性表达人ＴＧＦβ１的ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白及酶活性变化。结果 成功获得稳定过表达人ＴＧＦβ１的大鼠ＭｓＣ克隆（ＭＴＧ１），该细胞克隆的ＭＭＰ２ｍＲＮＡ．蛋白表达及其酶活性均获增强。结论 ＴＧＦβ１可增强ＭｓＣＭＭＰ２ｍＲＮＡ、蛋白表达，并提高其酶活性，这为进一步阐明ＴＧＦβ１在肾小球硬化发生机制中的作用提供了重要的实验手段和依据。
- 林文生张农张颂文刘琛顾建新郭慕依
- 关键词：基因转染TGFΒ1MMP-2肾小球疾病
- 不同肝病病人血清转铁蛋白糖链的变化被引量：1
- 1996年
- 目的寻找新的肝癌标志物。方法选择四种凝集素即小扁豆凝集素（ＬＣＡ），欧曼陀罗凝集素（ＤＳＡ），麦胚凝集素（ＷＧＡ）和红腰豆凝集素（ＥＰＨＡ），利用点印迹方法测定了不同肝病病人血清转铁蛋白（Ｔｆ）的糖链结构。结果转移性肝癌和肝脏良性肿瘤无明显变化，慢性肝病活动及原发性肝癌中可有Ｔｆ糖链的变化，包括多天线糖链的增加，含核心岩藻糖及含平分型Ｎ－乙酰氨基葡萄糖糖链的出现，而原发性肝癌病人的Ｔｆ的多天线糖链的含量较肝硬化高。结论提示Ｔｆ的ＤＳＡ结合反应可望成为原发性肝癌的诊断指标。
- 李力杨秉辉李溪冰江松敏顾建新
- 关键词：慢性肝病转铁蛋白糖链
- 全反式维甲酸可增强大鼠系膜细胞基质金属蛋白酶-2表达被引量：2
- 1999年
- 林文生张农张颂文顾建新郭慕依
- 关键词：全反式维甲酸系膜细胞MMP-2肾小球
- 正、反义β1,4半乳糖基转移酶-I表达质粒的构建
- 2002年
- 目的 :为了探讨不同 β1,4半乳糖基转移酶 - I(β1,4 - galactosyltransferase I,β- 1,4 - Gal T- 1)表达水平的生物学意义。方法 :通过分子生物学手段 ,构建正、反义β- 1,4 - Gal T- I表达质粒。:设计β- 1,4 - Gal T- I全长引物 ;提取小鼠脑总 RNA,通过 RT- PCR方法 ,得到全长 β- 1,4 - Gal T- I基因片段 ,将其克隆到 p GEM- T载体。再通过多克隆酶切位点 ,将β- 1,4 - Gal T- I全长序列克隆到 pc DNA3.1表达载体中。设计反义引物 ,以 p GEM- β- 1,4 - Gal T- I质粒为模板 ,将 PCR产物克隆到 pc DNA3.1表达载体中。通过酶切和测序鉴定构建的质粒。结果 :通过酶切和测序证实 ,实验得到了正、反义β- 1,4 - Gal T- I表达质粒。结论 :正、反义β- 1,4 - Gal T- I表达质粒的构建 ,为进一步研究不同 β- 1,4 - Gal T-
- 沈爱国姚登兵丁斐王汉洲顾建新
- 关键词：逆转录-聚合酶链反应小鼠
- Fas/APO-1基因途径治疗胶质瘤的实验研究
- 2000年
- 目的：研究Ｆａｓ抗原在ＳＨＧ－４４ 胶质瘤细胞株中的表达及Ｆａｓ抗体促进其凋亡的情况，并观察转ＴＮＰ－α基因对Ｆａｓ表达的影响．方法：用逆转录病毒载体将 ＴＮＦ－α基因导入 ＳＨＧ－４４胶质瘤细胞。在细胞培养液中加入 Ｆａｓ抗体后，检测 Ｆａｓ对转基因前后ＳＨＧ－４４细胞的杀伤性，并用流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：Ｆａｓ抗原在ＳＨＧ－４４ 胶质瘤细胞株内没有明显表达。转ＴＮＦ－α 基因后，ＳＨＧ－４４细胞内的Ｆａｓ表达并不能显著增加。Ｆａｓ抗体对转基因前后的ＳＨＧ－４４细胞均不敏感，不能明显诱导细胞凋亡．结论：ＴＮＦ－α基因的转染对Ｆａｓ阴性的胶质瘤细胞无明显促进Ｆａｓ抗体诱导的凋亡作用。
- 张荣周良辅周范民王晨王宇倩顾建新
- 关键词：胶质瘤FAS抗体TNF-Α基因基因治疗APO-1
- 高密度脂蛋白受体的酶标测定法
- 1996年
- 高密度脂蛋白受体的酶标测定法雷涛，朱禧星，顾建新，陈惠黎（上海医科大学华山医院糖尿病研究室２０００４０，基础医学院生物化学教研室２０００３２）蛋白质非酶糖化是糖尿病慢性并发症的主要发病环节之一［１］。高密度脂蛋白（ＨＤＬ）的非酶糖化与糖尿病并发症的发...
- 雷涛朱禧星顾建新陈惠黎
- 关键词：高密度脂蛋白受体糖尿病
- β-1,4-半乳糖苷键在周围神经损伤后的表达变化
- 2003年
- 为了探讨正常和损伤的周围神经中β-1,4-半乳糖苷键的表达定位和表达变化 ,本研究用特异识别β-1,4-半乳糖苷键的蓖麻凝集素 -I免疫组织化学方法结合 S-10 0和 neurofilam ent免疫双标记 ,研究了大鼠坐骨神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的合成影响。结果表明 ,β-1,4-半乳糖苷键主要分布在正常和损伤坐骨神经的 Schwann细胞中 ,图像分析表明β-1,4-半乳糖苷键的表达在周围神经损伤后 1～ 2 d内有所增高 ,以后随时间延长表达量逐步下降。本研究结果提示 ,周围神经损伤对 β-1,4-半乳糖苷键的表达有影响 ,Schwann细胞表达的β-1。
- 沈爱国周鸣鸣丁斐顾晓松王汉洲顾建新
- 关键词：周围神经损伤
- 一种新的糖化低密度脂蛋白受体酶联免疫测定法被引量：2
- 1996年
- 人低密度脂蛋白（ＬＤＬ）的羧基先肼化再用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记后，与固定于细胞培养板的人胚肺成纤维细胞（ＨＬＦ）进行受体结合反应。结果表明：酶标ＬＤＬ与ＨＬＦ受体特异结合量呈可饱和性，求得ＬＤＬ的最大高亲和结合为１０８ｎｇ／ｍｇ细胞蛋白，表面解离常数为４．７μｇ／ｍｌ；未标记ＬＤＬ可竟争酶标ＬＤＬ与ＨＬＦ的受体特异结合。该法不受ＬＤＬ非酶糖化与否的影响，是测定正常及糖化ＬＤＬ受体特异结合的一种较理想的方法。
- 雷涛朱禧星顾建新陈惠黎
- 关键词：低密度脂蛋白糖基化ELISA
- 肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达变化被引量：4
- 2003年
- 目的 :探讨肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达情况。方法 :将实验动物分为二组 :(1)正常对照组 ;(2 )肾阳虚证大鼠模型组 ,于第 12周留取尿标本。肾组织病理学检查、用Northernblot杂交检测皮质Ⅲ型胶原基因表达。结果 :肾阳虚证大鼠模型组 ,肾病理损伤 ,肾皮质Ⅲ型胶原mRNA表达上调。结论 :肾阳虚证大鼠肾皮质Ⅲ型胶原基因的表达明显上调。
- 董兴刚安增梅顾建新杨海春
- 关键词：肾阳虚证肾小球硬化基因表达
- N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶在大鼠坐骨神经损伤后的表达变化被引量：1
- 2004年
- 为了分析与 N-糖链合成相关β-1,4-半乳糖基转移酶 - 、 、 (β-1,4-galactosyltransferase , , ,β-1,4-Gal T- , , ) m RNA在正常和损伤坐骨神经组织的表达变化。本研究采用 RT-PCR方法 ,分析 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在。以扩增的 c DNA片断标记探针 ,Northern blot分析β-1,4-Gal T- 、 、 m RNA在正常和损伤大鼠坐骨神经的表达变化。结果表明 :通过 RT-PCR方法 ,检测到 β-1,4-Gal T- 、 、 在小鼠坐骨神经中的表达存在 ;采用 Northern blot方法 ,发现β-1,4-Gal T- 、 、 在正常大鼠坐骨神经中有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化 ,但三种同功酶的表达变化各不相同。结论 :本实验发现 β-1,4-Gal T- 、 、 在坐骨神经有表达 ,并在坐骨神经损伤后发生表达变化。提示与
- 沈爱国严美娟龚蕾蕾关晓颖程纯顾建新
- 关键词：坐骨神经RT-PCRΒ-1,4-半乳糖基转移酶
