目的:探讨柚皮素(Nar)对呼吸道合胞病毒(RSV)感染引起的气道黏液高分泌的作用。方法:通过RSV A2株感染人肺腺癌上皮细胞构建气道黏液高分泌细胞模型,在RSV感染及Nar干预作用下,采用实时荧光定量PCR、ELISA和细胞免疫荧光技术检测各组细胞黏蛋白(MUC)5AC的表达情况。结果:RSV感染R1组[感染复数(MOI)=0.5]、R2组(MOI=1.0)、R3组(MOI=5.0)和对照组(C组)MUC5AC m RNA相对表达量分别为1.45±0.10、2.67±0.09、4.82±0.27和1,各组MUC5AC蛋白的表达量分别为(38.61±0.41)μg/L、(44.11±0.96)μg/L、(51.01±0.48)μg/L和(34.38±0.95)μg/L,RSV感染组和C组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。R2组和不同浓度Nar干预组N1组(Nar 30μmol/L+RSV MOI=1.0)、N2组(Nar 100μmol/L+RSV MOI=1.0)、N3组(Nar 30μmol/L)、N4组(Nar 100μmol/L)及DMSO组(D组)的MUC5AC m RNA水平依次为2.52±0.10、2.31±0.06、1.90±0.01、0.99±0.04、0.85±0.03、1.20±0.03,MUC5AC蛋白水平依次为(46.72±0.87)μg/L、(43.60±0.45)μg/L、(40.55±0.45)μg/L、(38.73±0.55)μg/L、(37.08±1.35)μg/L、(37.12±0.91)μg/L,C组MUC5AC蛋白水平为(37.62±1.18)μg/L,与C组相比,R2组MUC5AC m RNA和蛋白水平显著增加(P<0.05),N1、N2组与R2组相比,MUC5AC m RNA和蛋白水平显著降低,随Nar浓度增加,抑制效果更明显,呈剂量相关性(P<0.05),N3、N4组与C组相比,MUC5AC m RNA和蛋白表达水平下降,但差异无统计学意义(P>0.05),D组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。荧光显微镜观察结果显示RSV感染后细胞质内MUC5AC蛋白表达增加,而Nar可下调其表达。结论:RSV A2株感染A549细胞会导致MUC5AC m RNA和蛋白表达增加,Nar通过抑制其表达,抑制RSV感染引起的气道黏液高分泌。
