马锐
- 作品数：31 被引量：36H指数：4
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- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术更多>>
- CSFV-PRRSV-JEV联合共检基因芯片的研制与初步应用被引量：4
- 2016年
- 对猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒（PRRSV）和猪流行性乙型脑炎病毒（JEV）联合共检基因芯片的初步应用进行了研究。选用夹缝针,BaiOR点样缓冲液,确定靶基因质量浓度为200mg/L,各样点中心间距300μm,样点直径100μm,在相对湿度为50%~60%、8~30℃条件下用晶芯？SmartArrayerTM48点样仪在氨基化基片上接触式点样,成功制备了CSFV-PRRSV-JEV检测基因芯片。将标记后的探针基因与PRRSV-CSFV-JEV基因芯片经预杂交、杂交、洗涤干燥后,用晶芯？LuxScanTM10K微阵列芯片扫描仪扫描观察结果。结果表明：制备的芯片特异性强,检测灵敏度可达0.295μg/L,4℃条件下可保存120d;用制备的芯片对临床67份疑似繁殖障碍性疾病的病料进行检测,与RT-PCR检测结果符合率均在94%以上,为猪繁殖障碍性疾病的检测提供了理想的检测方法。
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- 关键词：猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒乙型脑炎病毒基因芯片
- 猪瘟病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪瘟病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片和试剂盒。本发明特定方法制备的可视化基因芯片，可以用肉眼直观地看到检测结果，不需要价格昂贵的激光共聚扫描仪，成本低廉，同时，灵敏度较高，与现有荧光标...
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- 文献传递
- 检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪流行性乙型脑炎病毒和/或猪繁殖与呼吸综合征病毒的可视化基因芯片和试剂盒。本发明特定方法制备的可视化基因芯片，可以用肉眼直观地看到检测结果，不需要价格昂贵的激光共聚扫描仪，成本低廉，同时，灵敏度较高，...
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- 文献传递
- 猪伪狂犬病毒和/或猪圆环病毒2型的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪伪狂犬病毒和/或猪圆环病毒2型的基因芯片，它包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1和/或3所示基因片段，用于分别检测伪狂犬病毒和/或猪圆环病毒2型。本发明公开了一...
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- 文献传递
- 猪细小病毒和/或猪圆环病毒2型的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪细小病毒和/或猪圆环病毒2型的基因芯片，它包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1、2所示基因片段，用于分别检测猪细小病毒和/或猪圆环病毒2型。本发明公开了一种检测...
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- 文献传递
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒和日本脑炎病毒二联基因芯片的构建与应用被引量：3
- 2015年
- 针对靶基因库中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的重组质粒T/PRRS-PS9、T/Y11和日本脑炎病毒(JEV)的重组质粒T/PRM/M、T/JEV-C,设计4对特异性引物,采用PCR扩增获得4个靶基因片段,并用PCR标记Cy3探针,建立了一种检测PRRSV和JEV的芯片方法。特异性试验结果显示,PRRSV、JEV之间无交叉杂交,猪瘟病毒、猪细小病毒、伪狂犬病病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒与PRRSV-JEV基因芯片无杂交反应。灵敏性试验结果显示,50μL杂交体系中探针DNA的质量浓度为0.295pg/μL时仍为杂交阳性。对从猪场收集的31份样品进行处理并用基因芯片检测,PRRSV的检出率为12.9%(4/31),JEV的检出率为9.68%(3/31),PRRSV与JEV混合感染的检出率为0(0/31)。此方法的结果与PCR的检测结果完全符合。结果表明,所建立的二联基因芯片有望成为一种快速鉴别PRRSV与JEV的新方法。
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- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒日本脑炎病毒基因芯片繁殖障碍
- 猪蓝耳病、猪瘟、流行性乙型脑炎可视化共检基因芯片的构建及初步应用
- 引言猪繁殖障碍性疾病是一大类影响养猪业的常见疾病,如乙脑同时也是人兽共患病。在发病的猪群中,猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)流行性乙型脑炎(JEV)、猪瘟(CSF)是致病性较高的也是较为常见的由RNA病毒引起的发病。病原体...
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- 文献传递
- 两种标记方法对cDNA芯片杂交信号的初步分析被引量：1
- 2016年
- 为研究两种不同的标记方法对杂交效率的影响,将含NDV的F和HN基因、IBV的M和N基因、ILTV的TK和gB基因的重组质粒作为靶基因,分别采用Cy3直接引物标记法和间接掺入标记法进行PCR扩增。然后将荧光标记的样品与芯片进行杂交,收集扫描后的输出图像和荧光强度信号值,分析两种标记方法对芯片杂交效率的影响。结果显示,Cy3引物标记方法所获得NDV、IBV、ILTV芯片扫描数据结果,图像直观判断均优于间接掺入标记方法。表明Cy3直接引物标记法是一种能够提高杂交的信号值,降低背景信号值,提高杂交效率的方法,有利于检测型基因芯片的应用。
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- 关键词：基因芯片
- 猪伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的可视化基因芯片以及试剂盒
- 本发明公开了一种检测猪伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的基因芯片，它包括固相载体以及固定在固相载体上的探针；所述探针包括SEQ ID NO：1、3、4所示基因片段，用于分别检测伪狂犬病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型...
- 文心田曹三杰常晓霞黄小波文翼平伍锐张仙马锐杨国淋
- 文献传递
- 猪病毒性腹泻检测基因芯片的两种样品标记技术比较被引量：4
- 2016年
- 对猪病毒性腹泻检测芯片的两种样品标记方法进行比较。分别选取猪流行性腹泻病毒(PEDV)的S和M基因,猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的N和S基因,A型猪轮状病毒(GAR)的VP7和NSP4基因设计引物,用PCR扩增制备靶基因,纯化后制备猪病毒性腹泻联合检测基因芯片。提取样品核酸,采用Cy3直接标记法和间接标记法进行PCR扩增标记,标记的样品再与芯片杂交、扫描和数据分析,同时对两种标记方法的特异性、敏感性等进行了比较。结果表明,两种方法标记的样品均能与基因芯片特异性杂交,但直接法的中位信号值(median)均高于间接法的中位信号值,直接法的芯片杂交信噪比是用间接法的5倍以上。两种标记方法制备样品特异性好,猪蓝耳病毒、猪瘟病毒、猪乙型脑炎病毒、猪伪狂犬病毒验证检测为阴性;直接法和间接法的最低检测浓度分别为10~5和10~7 copies·μL^(-1),前者的灵敏性是后者的100倍。应用优化的直接标记法处理56份临床样品,进行芯片的检测应用,结果与RT-PCR一致。本研究结果表明直接法荧光标记样品可明显提高病毒性腹泻检测芯片的检测效果。
- 马锐尹人杰黄小波文心田杨国淋常晓霞张仙滑翔赵玉佳曹三杰文翼平伍锐
- 关键词：基因芯片
