余永恒
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
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- 重组人乳铁蛋白cDNA表达研究
- hlf基因cDNA被克隆入酵母表达载体获得pPIC9-hlf质粒,该质粒与毕赤酵母基因组同源重组,经G418筛选后获得多拷贝重组酵母菌株,对其进行甲醇诱导表达,SDS-PAGE、免疫及活性检测表明,表达产物为有乳铁蛋白,...
- 张述王革非王贞慧张裕平吴海祥熊春发余永恒
- 文献传递
- 重组人乳铁蛋白基因克隆及表达被引量：10
- 2005年
- 目的 构建重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株 ,并对表达产物进行评价。方法 由外周血白细胞总RNA经RT- PCR克隆获得HLF基因结构cDNA ,测序后克隆入酵母表达载体获得质粒pPIC9K- HLF ,线性化后电转化入毕赤酵母 ,经G4 -18 YPD筛选多拷贝后进行甲醇诱导表达。结果 获得基因与GenBank中的人HLF0 1基因基本相符。 2株多拷贝菌株诱导表达产物均能与人HLF抗体反应 ,具有抑制大肠杆菌生长的作用。结论 获得了能分泌有活性HLF的重组人乳铁蛋白 (HLF)的毕赤酵母分泌表达菌株。
- 张述王革非王贞慧张裕平吴海祥熊春发余永恒
- 关键词：分泌表达外周血白细胞人乳铁蛋白克隆抗体反应电转化
- 乳糖诱导重组人睫状神经营养因子在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：9
- 2007年
- 目的利用乳糖替代IPTG,诱导重组人睫状神经营养因子(Recombinanthumanciliaryneurotrophicfactor,rhC-NTF)在原核工程菌BL-TCS中可溶性表达,并选择最适的诱导表达条件。方法在不同的温度下,利用不同浓度的乳糖及0·5mmol/L的IPTG,诱导含有人CNTF基因的工程菌9h,比较菌体生长、乳糖消耗以及目标蛋白的表达规律。结果乳糖组的菌体A600值均高于IPTG组。乳糖诱导产生的rhCNTF主要以可溶形式表达,各浓度乳糖的诱导效果均能接近或超过IPTG的效果。以2%乳糖在25℃下诱导6h,可以达到比较好的诱导效果。结论乳糖可取代IPTG诱导人CNTF基因表达,并获得良好效果。
- 余永恒李清雄王革非邓远鹏王贞慧朱俊铭
- 关键词：乳糖诱导剂人睫状神经营养因子大肠杆菌
