张宏娟
- 作品数：40 被引量：93H指数：6
- 供职机构：南京医科大学更多>>
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- 相关领域：化学工程医药卫生生物学文化科学更多>>
- L-苏氨酸醛缩酶催化合成L-4-硝基苯基丝氨酸被引量：4
- 2018年
- 利用pGEX-KG载体在大肠杆菌BL21(DE3)中重组表达L-苏氨酸醛缩酶,以对硝基苯甲醛、甘氨酸为底物,采用酶法合成了L-4-硝基苯基丝氨酸,优化了反应条件,得到的最佳条件为:反应温度45℃,pH=8.0,甘氨酸浓度500mmol/L,对硝基苯甲醛浓度100mmol/L,每升转化液含1.6g全细胞,反应24h后,L-4-硝基苯基丝氨酸质量浓度达到9.72g/L,对硝基苯甲醛转化率为43%。放大至500mL后转化液经过活性炭分离纯化得到产物3.92g,总收率为35%。
- 余进海吴婷刘均忠张宏娟焦庆才
- 关键词：对硝基苯甲醛生物工程
- S-苯基-L-半胱氨酸酶法转化制备方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及S-苯基-L-半胱氨酸的酶法转化制备方法。该制备方法采用含有L-丝氨酸的混合氨基酸料液为原料，将具有L-色氨酸合成酶活性的湿菌体或粗酶液与含有L-丝氨酸的混合氨基酸料液混合，添加适量苯硫酚...
- 焦庆才徐礼生刘均忠王治元张宏娟刘茜
- 文献传递
- 双酶级联生物合成D-赖氨酸被引量：2
- 2015年
- 建立了氨基酸消旋酶和赖氨酸脱羧酶双酶级联高效生产D-赖氨酸的方法。利用氨基酸消旋酶全细胞催化消旋L-赖氨酸得到DL-赖氨酸,去除氨基酸消旋酶后再加入赖氨酸脱羧酶,将消旋产物中的L-构型脱羧生成1,5-戊二胺和CO2,剩下D-赖氨酸;最终,通过阳离子交换树脂吸附洗脱得到D-赖氨酸。经考察双酶级联催化的最佳条件为:反应温度40℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲溶液(p H=5.8),底物L-赖氨酸质量浓度为50 g/L,氨基酸消旋酶全细胞和赖氨酸脱羧酶全细胞质量浓度均为10 g/L,4 mmol/L磷酸吡哆醛,0.1 g/L Triton X-100,反应时间12 h,其中消旋反应2 h和脱羧反应10 h,最终D-赖氨酸收率达42%,对映体过量值(e.e.值)=98%。
- 陆阳吴四平张宏娟刘茜焦庆才刘均忠
- 关键词：生物工程
- 3,4‑二甲氧基‑L‑苯丙氨酸的酶法转化制备方法
- 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种3,4‑二甲氧基‑L‑苯丙氨酸的酶法转化制备方法。该制备方法采用含3,4‑二甲氧基苯丙酮酸的料液为底物，加入L‑天冬氨酸和具有天冬氨酸转氨酶活性的菌体细胞或粗酶液，25～55℃、pH ...
- 张宏娟余进海刘均忠魏宇
- 双酶连续催化生物合成D-丙氨酸被引量：4
- 2017年
- 建立了天冬氨酸消旋酶和D-氨基酸转氨酶双酶连续催化制备D-丙氨酸的方法。利用天冬氨酸消旋酶全细胞催化L-天冬氨酸消旋得到DL-天冬氨酸,离心去除天冬氨酸消旋酶全细胞后升温灭活残留的游离天冬氨酸消旋酶,再加入经镍柱亲和纯化的D-氨基酸转氨酶酶液,催化D-天冬氨酸(D-Asp)和丙酮酸(PA)经转氨反应生成D-丙氨酸。经单因素实验得到天冬氨酸消旋酶最佳催化条件为:反应温度40℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲溶液(pH=7.0),底物L-天冬氨酸质量浓度为100 g/L。D-氨基酸转氨酶最佳催化条件为:反应温度42℃,0.2 mol/L磷酸钾缓冲液(pH=7.0),4 mmol/L磷酸吡哆醛,DL-天冬氨酸质量浓度为50 g/L,底物n(PA)∶n(D-Asp)=1∶10。转化产物经等电点结晶和阳离子树脂分离得到D-丙氨酸。在该条件下,D-天冬氨酸转化率达94%,D-丙氨酸收率为84%,对映体过量值(ee值)=98%。
- 张卫卫魏宇张宏娟焦庆才刘均忠
- 关键词：生物工程
- 水/有机溶剂双相体系中色氨酸合成酶酶法合成L-色氨酸被引量：6
- 2011年
- 在水/有机溶剂双相体系中,利用重组大肠杆菌DM206[pET28a-trpBA/BL21(DE3)]色氨酸合成酶催化L-丝氨酸和吲哚合成了L-色氨酸.考察了有机溶剂、有机相乙酸乙酯体积分数、反应温度、水相pH、底物L-丝氨酸与吲哚摩尔比、底物L-丝氨酸浓度、表面活性剂和酶添加量对色氨酸合成酶酶活的影响.结果表明,酶法最佳转化条件为:有机相溶剂为乙酸乙酯,乙酸乙酯的体积分数为2.5%,反应温度为35oC,水相pH值为8,底物L-丝氨酸与吲哚的摩尔比为1:1.2,底物L-丝氨酸浓度为100mmol/L,吐温80的质量分数为0.4%,反应介质中酶的添加量为20g/L.在此条件下酶促反应2.5h,L-丝氨酸转化率可达95%.
- 徐礼生刘均忠王治元张宏娟刘伟刘茜焦庆才
- 关键词：L-色氨酸L-丝氨酸吲哚乙酸乙酯
- 生物催化合成手性药物进展及应用
- 生物催化反应已被全世界制药行业科学家高度重视，特别是不少生物制药公司致力于将生物催化反应发展为手性技术和不对称合成工艺。本文结合实例对生物酶催化不对称合成手性药物的方法作一概述，包括还原酶、氧化酶、水解酶、转移酶等方面，...
- 焦庆才张宏娟刘均忠刘茜
- 关键词：手性药物
- 文献传递
- 2-萘基乙胺类衍生物的合成及减肥作用研究被引量：1
- 2009年
- 目的设计并合成一系列2-萘基乙胺类化合物,研究其减肥作用。方法以7-甲氧基-1-萘满酮为原料,经多步反应合成目标化合物。培养前脂肪细胞3T3-L1,油红O染色法检测各目标化合物对3T3-L1分化的影响,并进一步研究化合物N-1-[1-(7-甲氧基-1-萘基)环丁基]-3-甲基丁基-N,N-二甲胺(9 c)对饮食诱导的肥胖大鼠的减肥作用。结果合成了9个未见文献报道的目标化合物,其结构均经过1H-NMR及MS谱确证。化合物(9 c)在浓度较高时有一定的减肥降脂作用。结论侧链碳上烃基体积增大,脂溶性增强,减肥作用增强;氮上为给电子基团时,碱性提高,减肥作用增强;氮上为吸电子基团时基本没有活性。
- 孙旭殷晓佳季兴王秀珍张宏娟李飞
- 关键词：肥胖减肥作用
- 生物催化合成α-氨基酸和手性胺医药中间体研究
- 生物催化是高效的温和催化体系,具有优良的化学选择性、区域选择性和立体选择性。尤其近年来,基因组学、蛋白质组学等生物技术的飞速发展,大大推动了生物催化的基础和应用研究。目前,利用生物体系(如各种细胞和酶)作为催化剂催化合成...
- 张宏娟
- 关键词：酶催化合成谷氨酰转移酶天冬氨酸转氨酶甲酸脱氢酶
- 文献传递
- 3-甲基-2-氧代戊酸钙的合成被引量：2
- 2008年
- 3-甲基-2-氧代戊酸钙（calcium3-methyl-2．oxovalerate，1），俗名α-酮异亮氨酸钙，是复方α-．酮酸片的-个重要成分。复方α-酮酸片由德国费森尤斯卡比股份有限公司研发上市，商品名为开酮，由4-甲基-2-氧代戊酸（酮亮氨酸）、3．甲基-2-氧代戊酸（酮异亮氨酸）、3-苯基-2-氧代丙酸（酮苯丙氨酸）、3-甲基-2-氧代丁酸（酮缬氨酸）、
- 许贯虹李飞张宏娟王秀珍王武伟
- 关键词：氧代Α-酮酸钙异亮氨酸费森尤斯
