陈艳
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 供职机构：吉林大学军需科技学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 富铁亚硝基猪血红素肽的制备被引量：1
- 2014年
- 目的制备富铁亚硝基猪血红素肽。方法以新鲜猪血为原料制备血红蛋白,分别取胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶及碱性蛋白酶,在各自最适温度和p H条件下水解,有限酶解成较长的多肽链,分析水解效果,选择最适酶进行酶解条件确定试验。取酶解后的产物,合成富铁亚硝基血红素肽,定性检测合成肽产物。结果综合螯合物颜色和铁螯合活性,确定最佳酶解用酶为胰蛋白酶。最佳酶解条件为:底物浓度10%,加酶量5 000 U/g,反应时间4 h,在此条件下,水解产物与亚硝酸钠反应生成亚硝基血红素肽,且螯合铁的效果最好。定性检测显示,产物中生成了亚铁血红素肽及亚硝基血红素肽。结论成功制备了富铁亚硝基猪血红素肽。
- 潘风光陈艳赵静王占博杨巍朱丹
- 关键词：猪血
- 利用同源片段交换提高腈水合酶的热稳定性被引量：1
- 2015年
- 目的通过计算机辅助半理性设计对热不稳定的恶臭假单胞菌Psedomonas putida NRRL-18668腈水合酶（EC4.2.1.84,nitrile hydratase,简称NHase）分子进行改造,提高酶催化的热稳定性和活性。方法以嗜热假诺卡菌Pseudonocardia thermophila JCM3095和睾丸酮丛毛单胞菌Comamonas testosterone 5-MGAM-4DNHase作为模板,利用位点靶向氨基酸重组（site-targeted amino acid recombination,STAR）软件和分子动力学模拟分析选择合适的同源靶片段,通过同源交换替换Pseudomonas putida NRRL-18668NHase相应的片段,构建7株分别含有3种不同来源片段的新型杂合NHase,检测其热稳定性及活性;圆二色光谱分析野生酶和杂合酶3AB的二级结构。结果 7株杂合NHase（1A、2B、2C、2BC、3AB、3AC、3ABC）经50℃热处理10 min后,与野生型NHase相比,热稳定性分别提高了1.5~3.5倍,其中杂合NHase 3AB的热稳定性提高了3.5倍,酶活力提高了1.4倍;野生酶和杂合酶3AB二级结构中α螺旋含量分别为（34.56±3.21）%和（36.88±1.41）%,,β折叠含量分别为（19.78±3.21）%和（18.69±1.74）%。结论通过利用热稳定性的同源片段来替换相应的热不稳定结构域这种理性设计的方法,成功将不耐热的NHase改造成耐热杂合NHase,同时提高了酶的比活力,并能维持NHase分子的基本二级结构不改变。
- 房月芹崔文璟崔幼恬陈艳周哲敏
- 关键词：腈水合酶稳定性杂合酶分子改造
