王居立
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 供职机构：天津科技大学生物工程学院工业微生物教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 弗氏柠檬酸菌1,3-丙二醇合成的代谢工程研究
- 2015年
- 【目的】研究弗氏柠檬酸菌(Citrobacter freundii)1,3-丙二醇合成的代谢过程。【方法】构建甘油脱氢酶基因GSR-lac Z、1,3-丙二醇氧化还原酶基因PDO-lac Z和甘油脱水酶基因GL-lac Z等报告基因。在此基础上,构建3个相应的转座子突变文库。【结果】筛选到6株突变子,其相应关键酶表达水平提高1-11倍,1,3-丙二醇产量提高幅度为3%-50%。对转座子插入位点分析显示,5株突变子插入位点均为β-内酰胺酶(CKO_02592)编码基因,1株突变子插入位点为二氢硫辛酰胺基转移酶(CKO_02433)编码基因。进一步分析发现,β-内酰胺酶基因突变显著提高甘油脱水酶和甘油脱氢酶的表达水平,而1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平没有变化;二氢硫辛酰胺基转移酶基因突变显著提高1,3-丙二醇氧化还原酶表达水平,其他两种关键酶基因表达水平不变。【结论】β-内酰胺酶和二氢硫辛酰胺基转移酶基因能够分别影响1,3-丙二醇合成代谢途径关键酶的表达,为构建工程菌株打下基础。
- 于越郭文逸王居立杨洪江
- 关键词：3-丙二醇
