向月
- 作品数：6 被引量：13H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学基础医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 过表达脑红蛋白通过激活PI3K/Akt信号通路防治AD的体外研究
- 2014年
- 目的:探索过表达脑红蛋白(neuroglobin,NGB)对转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞的神经保护作用及机制。方法:成功构建过表达NGB的质粒p EGFP-NGB并转染入已预先转染了p APPswe的SH-SY5Y细胞,MTT法检测过表达NGB对该细胞存活率的影响;JC-1法检测其对细胞线粒体膜电位的影响;流式细胞术检测过表达NGB对细胞凋亡的影响;Western blotting法检测其对细胞中p-Akt、Akt和caspase-3/9表达的影响;ELISA法检测其对细胞内Aβ42生成的影响。结果:MTT结果显示,与对照组和空质粒组比较,转染NGB后,p APPswe-SH-SY5Y细胞的存活率明显提高,差异有统计学意义(P<0.05)。JC-1染色结果显示过表达NGB能够明显抑制转染p APPswe对SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的降低作用(P<0.05)。流式细胞术结果显示过表达NGB能够抑制早、晚期细胞的凋亡。而Western blotting显示过表达NGB不仅能抑制细胞内caspase-3和caspase-9蛋白水平的表达,而且还能够促进细胞内p-Akt蛋白的表达,而这种促进作用能够被PI3K/Akt的抑制剂LY294002所抑制。ELISA结果显示过表达NGB能够明显抑制细胞内Aβ42的生成。结论:过表达NGB能够显著抑制p APPswe诱导的细胞损伤,而且还抑制与细胞凋亡密切相关的caspase-3和caspase-9等蛋白表达。NGB的神经保护作用可能是通过激活PI3K/Akt信号通路来实现的。
- 杨军戴颂阳向月张雄
- 关键词：脑红蛋白SH-SY5Y细胞PI3K/AKT信号通路
- miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达在AD中发挥神经保护作用的机制研究
- 目的：阿尔茨海默病(Alzheimer，sdisease，AD)是最常见的痴呆类型，其发病机制仍未明确。microRNA(miRNA)在神经系统疾病的发生、发展过程中的作用日益受到重视，近年来，miR-124在神经系统退...
- 向月
- 关键词：TAU蛋白CAVEOLIN-1表达神经保护
- miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达N2a/APPswe细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨在阿尔茨海默病(Alzheimer’s diseases,AD)细胞模型中miR-124-3p通过调控Caveolin-1的表达对细胞凋亡率及钙离子浓度的影响。方法:体外培养野生型N2a(N2a/WT)和N2a/APPswe细胞,real-time PCR及Western blot分别检测miR-124-3p与β-淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)m RNA及蛋白的表达。双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p与Caveolin-1之间靶向调控关系。N2a/APPswe细胞瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics),real-time PCR、Western blot分别检测Caveolin-1 m RNA和蛋白的表达。N2a/APPswe细胞分别瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics)、pc DNA-Caveolin-1、Caveolin-1-si RNA,流式细胞仪分析细胞凋亡水平,测定细胞内游离钙离子浓度。结果:与WT组相比,APPswe组APP m RNA和蛋白水平表达都明显升高(分别为P=0.000,P=0.000),miR-124-3p表达明显降低(P=0.000)。双荧光素酶报告实验表明,和与突变型载体(p GL3-Caveolin-1 3’UTR MUT)共转染组相比,与野生型载体(p GL3-Caveolin-1 3’UTR WT)共转染组的相对荧光素酶活性和明显减弱(P=0.004);转染miR-124-3p mimics后,与空载体组比较,miR-124-3p mimcs转染组的Caveolin-1 m RNA和蛋白的表达明显下调(分别为P=0.000,P=0.000);分别转染miR-124-3p mimics、Caveolin-1-si RNA后,与空载体组比较,细胞凋亡率降低(分别为P=0.000,P=0.000),游离钙离子浓度降低(分别为P=0.000,P=0.000);转染pc DNA-Caveolin-1后,得到与上述相反的结果(分别为P=0.000,P=0.000)。结论:miR-124-3p可以通过靶向下调Caveolin-1的表达,抑制AD细胞凋亡,降低细胞中游离钙离子浓度,从而发挥神经保护作用,为AD的防治提供新的思路和靶点。
- 向月张雄杨军戴颂阳李昱
- 关键词：CAVEOLIN-1凋亡钙离子浓度
- 姜黄素影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的机制研究被引量：3
- 2015年
- 目的:研究姜黄素(Curcumin)对N2a/APP695swe细胞钙调神经磷酸酶(Calcineurin,CaN)活性和三磷酸腺苷结合转运子A1(ATP-binding cassette transporter A1,ABCA1)表达的影响;探讨Curcumin影响N2a/APP695swe细胞中ABCA1表达的可能机制。方法:MTT法分别检测1、5、10、20、40μmol/L Curcumin或0.1、0.5、1、2、4μmol/L CaN活性抑制剂环孢素A(Cyclosporin A,Cs A)对N2a/APP695swe细胞存活率的影响;依据MTT筛选结果,分为正常对照组、模型组、Curcumin组:5μmol/L Curcumin处理24 h的N2a/APP695swe细胞、Cs A组:0.5μmol/L Cs A处理48 h的N2a/APP695swe细胞。酶底物显色法检测CaN活性,real-time PCR、Western blot检测ABCA1表达水平的变化。结果:与未处理组比较,5μmol/L Curcumin组细胞存活率[(110.495±4.005)%]最高(P=0.023);0.1、0.5、1、2、4μmol/L Cs A组细胞存活率依次为(105.532±4.292)%、(115.211±4.826)%、(76.317±4.475)%、(69.177±5.267)%、(54.687±3.912)%,与未处理组比较,0.5、1、2、4μmol/L Cs A组差异均有统计学意义(P值依次为0.001、0.000、0.000、0.000);酶底物显色法显示与正常对照组[(18.519±1.664)nmol/mg]比较,模型组CaN活性[(24.488±3.041)nmol/mg]增加(P=0.007),Curcumin组[(16.717±2.055)nmol/mg]、Cs A组[(4.928±1.232)nmol/mg]CaN活性明显受到抑制(P值依次为0.002、0.000);real-time PCR和Western blot显示Curcumin组ABCA1表达量(real-time PCR:1.988±0.355;Western blot:0.294±0.015)高于模型组(real-time PCR:1.000±0.000;Western blot:0.175±0.008),差异有统计学意义(real-time PCR:P=0.009;Western blot:P=0.000);与模型组比较,Cs A组(real-time PCR:4.000±0.464;Western blot:0.470±0.016)的ABCA1表达水平增加(real-time PCR:P=0.000;Western blot:P=0.000)。结论:Curcumin能上调N2a/APP695swe细胞中ABCA1的表达,其机理可能与抑制CaN活性有关。
- 许可向月孙洁芸张雄李昱
- 关键词：钙调神经磷酸酶三磷酸腺苷结合盒转运子A1姜黄素环孢素A
- 姜黄素在脑血流低灌注致血管性痴呆青年鼠和老年鼠中的作用及差异比较被引量：5
- 2016年
- 目的:观察姜黄素(curcumin)对脑血流低灌注所致血管性痴呆(vascular dementia,VD)青年鼠和老年鼠学习记忆能力以及海马组织形态学的影响,并进一步观察比较姜黄素对VD的疗效是否有年龄差异性。方法:分别将50只青年及50只老年Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组、假手术组、单纯缺血组(2VO)组、低剂量组(curcumin,50 mg/kg)及高剂量组(100mg/kg),每组各10只,采用永久性双侧颈总动脉结扎法(2VO法)制备VD模型。药物治疗组于术后24 h开始每日腹腔注射curcumin,连续给药30 d;采用Morris水迷宫实验测试两个年龄段各组大鼠的学习和空间记忆能力变化;采用HE染色和尼氏(Nissl)染色观察两个年龄段各组大鼠海马CA1区组织形态学改变。结果:Morris水迷宫试验表明,脑血流低灌注可导致老年大鼠及青年大鼠学习记忆能力下降(P<0.05),经姜黄素处理后学习记忆能力均明显改善(P<0.05);HE染色及尼氏染色显示脑血流低灌注可导致老年及青年VD大鼠海马CA1区出现病理形态学改变,姜黄素能减轻老年及青年VD大鼠海马CA1区的病理形态学改变;但2个年龄段大鼠间的学习记忆能力及病理改变差异无统计学意义(P>0.05)。结论:姜黄素能减轻老年及青年VD大鼠的脑损伤并改善认知功能障碍,其治疗效果具有一定的量效关系,但无年龄差异性;减轻海马组织的病理性损伤可能是姜黄素改善VD大鼠认知功能障碍的机制之一。
- 戴颂阳向月张鹏田茗源杨军张雄李昱
- 关键词：血管性痴呆姜黄素学习记忆组织病理学MORRIS水迷宫
- miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达降低N2a/APPswe细胞内Tau蛋白磷酸化水平被引量：1
- 2015年
- 目的探讨在阿尔茨海默病(AD)细胞模型中miR-124-3p通过调控Caveolin-1的表达对细胞内Tau蛋白磷酸化水平的影响。方法体外培养野生型N2a(N2a/WT)和N2a/APPswe细胞,荧光定量PCR及Western blot分别检测miR-124-3p、APP和Caveolin-1的表达;N2a/APPswe细胞分别转染miR-124-3p模拟物、Caveolin-1过表达载体及干扰RNA后,用荧光定量PCR及Western blot分别检测Caveolin-1、Tau和Tau-Ser404表达。结果与野生型N2a细胞比较,N2a/APPswe细胞中miR-124-3p表达降低(P<0.01),APP表达升高(P<0.01),Caveolin-1表达升高(P<0.01)。N2a/APPswe细胞转染miR-124-3p模拟物后,Caveolin-1表达降低(P<0.01),Tau-Ser404/Tau降低(P<0.01)。N2a/APPswe细胞转染Caveolin-1过表达载体后,Tau-Ser404/Tau升高(P<0.01)。转染干扰RNA后TauSer404/Tau降低(P<0.01)。结论 miR-124-3p可能通过调节其靶基因Caveolin-1的表达而降低Tau蛋白磷酸化水平,在AD中发挥神经保护作用。
- 向月张雄杨军戴颂阳李昱
- 关键词：CAVEOLIN-1TAU蛋白磷酸化
