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一种改良的静脉内衬支架大鼠原位肝移植模型建立方法: 本发明公开了一种改良的静脉内衬支架大鼠原位肝移植模型建立方法，通过本发明改良的静脉内衬(veno‑lined)支架对(上下腔静脉)SHVC进行吻合，相较于现有的SHVC缝合技术和SHVC袖套吻合技术可以降低手术难度，缩短...; 何宇涛冉江华王铎张熙冰周焘李望苏秋铭武睿超郑克谱董云李晓凯; 文献传递

肝切除术后肝脏再生调控机制的研究进展被引量：1: 2020年; 肝脏疾病患者在接受肝切除术后肝细胞数量明显减少,在各种生物信号的刺激下,患者机体会进行各种反馈调节,其主要目的是促进患者肝细胞快速增殖和分化,使患者肝脏功能快速恢复至正常状态,这个过程被称为生理性肝脏再生[1]。而肝脏切除术是目前临床应用较为广泛的一种手术方案,方案具有操作简单和可重复性较好的特点,对临床上该多种肝脏疾病的治疗来具有积极意义[2]。随着近年来对肝切除术后患者的肝脏再生调控机制的研究进展,在临床上取得了一定的成果。本文针对肝切除术后肝脏再生调控机制研究进行分析,综述如下。; 周焘刘钧汉李望何宇涛冉江华; 关键词：肝切除术后肝脏再生

操控型免疫耐受在肝移植术后的临床意义及研究进展: 2014年; 随着移植器官在全球范围内的开展与研究,对于免疫耐受的研究也在逐步深入,并提出操控性免疫耐受概念.操控性免疫耐受（Operational tolerance）指器官移植患者在停止使用免疫移植药物治疗的条件下,患者移植器官能保持正常功能,而不出现移植器官损害的临床和试验证据,并且移植受体能保持对感染及肿瘤正常的免疫应答反应[1].诱导操控性免疫耐受的入选标准及撤药方案肝移植撤药方案受试者必须满足：移植术后持续较长一段时间内移植肝功能良好,撤药前患者未出现排斥反应的临床及试验证据,必须是儿童肝移植患者,肝移植患者本身不存在自身免疫疾病,撤药前对肝组织活检无炎性反应及纤维变性的证据,供体与受体间HLA和ABO配型良好,撤药前能够明确检测与耐受有关的基因信号表达[2].对于满足入选条件者,肝移植术后,必须满足3年内移植受体保持稳定良好的肝功能,或发生排斥反应控制后1年内开始执行.在研究开始阶段、停药阶段和研究末期都应对肝脏进行活检[3].如患者在整个研究过程中,移植器官功能良好,活检未发现移植排斥反应及移植物损伤,则视为操控性免疫耐受.; 李望冉江华; 关键词：肝移植

恒河猴肝移植模型移植后急性排斥反应时肿瘤坏死因子α的变化: 2014年; 背景:肿瘤坏死因子α是一种炎性细胞因子,参与移植免疫反应并增加移植物抗原表达,并在其中发挥着重要作用。目的:分析恒河猴肝移植后肝组织中肿瘤坏死因子α的变化与急性排斥反应的关系。方法:采用改良血管袖套+胆道支撑管+动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗)。分别在移植后6,12,24和72 h 4个时间点分别收集血清及肝脏组织,检测肝功指标变化,通过苏木精-伊红染色Banff评分评定其移植排斥反应情况,并最终应用免疫组织化学技术、蛋白印迹分析分别检测肿瘤坏死因子α的表达水平。结果与结论:实验组和对照组肿瘤坏死因子α的表达在移植后6 h即开始增高,至12 h时达到高峰,24-72 h降低,并且实验组变化最明显。移植后6,12,24和72 h 4个时间点组实验组肿瘤坏死因子α蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),此变化早于肝组织病理学及肝功能的改变。提示肝移植后肝组织肿瘤坏死因子α的表达水平变化,对肝移植后急性排斥反应的早期诊断具有重要意义。; 张熙冰冉江华刘静张升宁李来邦陈奕明高杨李望李立; 关键词：肝移植急性排斥反应恒河猴肿瘤坏死因子Α

恒河猴肝移植模型急性排斥反应中白细胞介素6的表达被引量：1: 2014年; 背景:白细胞介素6是免疫炎症反应中一种重要的细胞因子,它与移植排斥反应具有密切的关系,在移植排斥反应诊断和抗排斥疗效评价中发挥着重要作用。目的:检测白细胞介素6在恒河猴肝移植后急性排斥反应中的表达水平,以评价其作为肝移植后急性排斥反应早期诊断指标的价值。方法:以16只恒河猴为研究对象,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗),然后建立恒河猴同种异体原位肝移植模型;分别在移植后6,12,24,72 h时间点收集血清及肝脏组织,通过检测肝功指标和移植肝组织苏木精-伊红染色Banff评分反映其移植排斥反应情况,并应用酶联免疫吸附法、免疫组织化学技术分别检测白细胞介素6的表达水平。结果与结论:肝移植后12,24,72 h实验组均有急性排斥反应发生,其中实验组丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、总胆红素在24 h和72 h表达水平明显高于对照组(P<0.05);实验组72 h组织学表现重于对照组,Banff评分高于对照组(P<0.05);实验组中血清、肝组织的白细胞介素6水平在肝移植后12,24,72 h明显高于对照组(P<0.05),并以72 h最为明显。结果表明白细胞介素6可能参与肝移植后排斥反应的发生,其表达可能在恒河猴原位肝移植后急性排斥反应的早期诊断中有一定意义。; 冉江华张熙冰刘静张升宁李来邦高杨陈奕明李望李立; 关键词：实验动物肝移植急性排斥反应白细胞介素6 恒河猴

大鼠肝移植中veno-lined支架技术的改良研究被引量：1: 2020年; 目的对veno-lined支架技术进行改良,探究一种更加快速简便且并发症少的大鼠原位肝移植(OLT)方法。方法利用改良的veno-lined支架技术对30对Wistar大鼠进行OLT。将制作好的veno-lined支架预先从供肝胸段的肝上下腔静脉(SHVC)切口处插入,到达膈肌下的SHVC后打结固定;在受体手术的无肝期,将带有供肝的veno-lined支架从受体肝脏左外侧叶根部切口处插入,到达膈肌以下后进行SHVC的吻合固定。记录各阶段的手术时长、手术成功率、7 d存活率和探讨术后SHVC有关的并发症。结果 SHVC吻合时长:(3.9±0.7)min;无肝期时长:(7.0±0.8)min;受体手术时长:(44.2±2.8)min;手术成功率:100%;7 d存活率:90%。SHVC出血、扭折、以及支架脱落等并发症并未出现;在veno-lined支架制作时和SHVC吻合固定时,通过规范打结线的固定位置,能够避免SHVC血栓形成。结论改良后的veno-lined支架技术,能将无肝期时长控制在7 min以内,是一种快速简便且并发症少的大鼠OLT方法。; 何宇涛周焘李晓凯董云李望武睿超张熙冰郑克谱冯世明朱宏伟李荻菲冉江华; 关键词：肝移植

钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ表达调控对大鼠肝细胞BRL-3A凋亡的影响被引量：1: 2017年; 目的探讨钙调素依赖蛋白激酶家族Ⅱ（Calmodulin-dependent kinases casades,CaMK Ⅱ）表达调控对大鼠肝细胞BRL-3A凋亡的影响.方法通过培养稳定传代的大鼠肝细胞BRL-3A细胞,并建立构建CaMK Ⅱγ蛋白（LV-CaMK Ⅱγ组）和CaMK ⅡγshRNA（shRNA组）的慢病毒表达体系,同时予以灌注相应的空白载体（LV-NC组、shRNA-NC组）及空白对照（CON组）形成对照,通过Western blot法检测各组CaMK Ⅱ、细胞色素C（Cytochrome C,Cyt C）、凋亡诱导因子（Apoptosis inducing factor,AIF）蛋白的表达,并通过Tunel法检测大鼠肝细胞BRL-3A凋亡率.结果 LV-CaMK Ⅱγ组的CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF的蛋白表达量较CON组显著增多（均P＜0.05）;shRNA组的CaMK Ⅱ、Cyt C、AIF的蛋白表达量较CON组显著降低（均P＜0.05）;而CON组、LV-NC组、shR-NA-NC组组间比较无显著差异（P＞0.05）.同一时点LV-CaMKⅡγ组肝细胞凋亡比CON组多,差异有统计学意义（P＜0.05）;同一时点shRNA组肝细胞凋亡比CON组少、差异有统计学意义（P＜0.05）;shRNA-NC组、LV-NC组和CON组有差异但无统计学意义（P＞0.05）.结论特异性阻断CaMK Ⅱ信号通路可抑制肝细胞BRL-3A凋亡;而增强的CaMKⅡ信号通路则促进肝细胞BRL-3A凋亡.; 冉江华郑克谱李望张熙冰刘驳强; 关键词：大鼠肝细胞慢病毒细胞凋亡

恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中转化生长因子-β1的表达: 2014年; 目的检测转化生长因子(TGF)-β1在恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中的表达水平,以评价其作为肝移植术后急性排斥反应早期诊断指标的价值。方法采用改良血管袖套+胆道支撑管+动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗)。继而分别在肝移植术后6 h、12 h、24 h和72 h四个时间点分别收集血清及肝组织,通过肝功能指标检测及移植肝组织苏木精-伊红染色Banff评分评价其移植排斥反应情况,并应用免疫组织化学、Western blot法分别检测TGF-β1蛋白表达情况。结果 1 2组恒河猴肝移植术后12 h、24 h和72 h均有急性排斥反应发生,尤其肝移植后72 h时实验组肝组织急性排斥反应重于对照组,Banff分级水平高于对照组(P<0.05)。2 2组术后ALT、AST和TBIL水平均随着时间的延长呈上升趋势(P<0.05),在移植术后6 h和12 h时2组ALT、AST和TBIL水平比较差异无统计学意义(P>0.05);在移植术后24 h和72 h时实验组ALT、AST和TBIL水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3免疫组织化学检测TGF-β1蛋白表达结果:实验组肝移植术后12 h后肝组织中TGF-β1免疫组织化学染色阳性面积百分率随着时间延长不断升高,且均明显高于对照组相应时相(P<0.05)。4 Western blot检测TGF-β1蛋白表达的半定量结果:实验组和对照组均在6 h即开始随着时间的延长呈现上调趋势,而实验组上调的幅度较对照组大,在6 h、12 h、24 h和72 h时实验组均分别明显高于对照组相应时相,差异有统计学意义(P值分别是0.003、0.001、0.001、0.001)。结论肝移植术后肝组织中TGF-β1水平升高提示机体细胞免疫功能增强,对肝移植术后急性排斥反应的早期诊断可能有一定意义。; 冉江华张熙冰刘静张升宁李来邦陈奕明高杨李望李立; 关键词：恒河猴急性排斥反应转化生长因子-Β1 免疫组织化学法 BLOT法

CaMK Ⅱ诱导肝移植术后热缺血再灌注迟发性损伤机制研究: [目的]热缺血再灌注损伤是肝移植术后并发症增加以及移植失败的原因之一,尤其是近年来心跳死亡供体(DCD,donation after cardiac death)器官开展应用,将热缺血再灌注损伤的研究提升到新的高度。大量...; 李望; 关键词：热缺血再灌注损伤线粒体凋亡凋亡相关因子; 文献传递

大鼠DCD供肝热缺血时间对移植肝的影响被引量：1: 2018年; 目的评价大鼠心脏死亡器官捐献(DCD)供肝热缺血时间对移植肝的影响。方法建立大鼠DCD供肝原位肝移植模型。根据供肝获取前经历心脏停搏时间的不同,将54只受体大鼠分为3组:对照组(W0组,未经历热缺血)、热缺血10 min组(W10组)、热缺血20 min组(W20组),每组18只。各组大鼠分别于术后1、3、7 d检测血清肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)],电子显微镜观察肝细胞及其细胞器,用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝组织细胞色素C(Cyt C)和凋亡诱导因子(AIF)的蛋白表达水平。结果随着热缺血时间的延长,肝移植术后1 d,各组大鼠ALT和AST水平急剧上升,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平均明显升高(均为P<0.05)。术后3 d,各组大鼠ALT和AST水平均稍稍下降,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平仍明显较高(均为P<0.05)。术后7 d,各组大鼠ALT和AST水平均再次上升,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平升高更显著(均为P<0.05)。电子显微镜观察发现,随着热缺血时间的延长,肝细胞水肿程度逐渐加重,内质网扩张逐渐加重,线粒体损伤程度加重,W20组尤为严重。术后1 d,3组大鼠肝组织中的AIF和Cyt C蛋白表达水平的比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。术后3、7 d,与W0组比较,W10组和W20组的AIF与Cyt C蛋白表达水平均较高,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且W20组的AIF与Cyt C蛋白表达水平均高于W10组(均为P<0.05)。结论 DCD供肝热缺血主要损伤肝细胞,随着热缺血时间的延长,移植肝肝细胞内线粒体和其他细胞器形态、及线粒体凋亡相关蛋白水平均出现明显变化。; 黄兆宇武睿超冉江华刘钧汉张黎施俊丽周焘郑克谱李望张熙冰李玉志; 关键词：心脏死亡器官捐献热缺血时间缺血-再灌注损伤

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李望

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