陈祁青 作品数:5 被引量:105 H指数:3 供职机构: 浙江中医药大学附属第一医院 更多>> 发文基金: 浙江省重点科技创新团队项目 国家自然科学基金 浙江省科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
膝骨性关节炎早期诊断的研究进展 被引量:40 2016年 膝骨性关节炎是常见的关节病之一,临床上典型患者的临床分期属于中晚期,因此提高对早期膝骨性关节炎的诊断尤为重要。目前临床上最常应用于诊断膝骨性关节炎的方法为磁共振检查,且随着磁共振不同序列的发展,针对关节软骨早期病变的序列正应用于临床。在膝骨性关节炎的早期诊断中,超声检查等简单实用的方法正成为一种趋势,而特异性生物标志物将成为一项热门研究。 王亮 陈祁青 童培建 肖鲁伟 金红婷右归饮含药血清对骨髓间充质干细胞成软骨分化的促进作用及其microRNA表达谱分析 被引量:9 2015年 目的:观察右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成软骨分化的效应,分析此过程中的micro RNA表达谱变化,探讨右归饮含药血清促进BMSCs成软骨分化的分子机制。方法:体外培养大鼠BMSCs,经TGF-β1基因慢病毒转染后48h给开始右归饮含药血清干预,培养7d,采用Ⅱ型胶原免疫组化染色、甲苯胺蓝染色、Real time PCR方法检测Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖的表达。采用micro RNA芯片技术和生物信息学方法,分析差异micro RNA表达谱变化,预测关键micro RNA、信号通路及靶基因。结果:TGF-β1基因成功转染BMSCs并能稳定表达。转染组和右归饮组的甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色均呈阳性,空载组染色均为阴性;与空载组比较,转染组和右归饮组Ⅱ型胶原m RNA、聚集蛋白聚糖m RNA的表达上调(P<0.01);与转染组比较,右归饮组Ⅱ型胶原m RNA、聚集蛋白聚糖m RNA的表达上调(P<0.01)。右归饮组与转染组相比,17个micro RNA个显著上调,2个micro RNA显著下调(P<0.05,|fold change︱≥0.585)。mi R-24-3p、MAPK信号通路及MAPK13、MAPK14、TRAF6、MAP3K7基因被预测为关键micro RNA、信号通路及靶基因。结论:右归饮含药血清能较好地促进BMSCs成软骨分化,右归饮通过上调mi R-24-3p阻断MAPK信号通路可能发挥了重要作用。 陈祁青 金红婷 应俊 王萍儿 吴承亮 童培建 肖鲁伟关键词:右归饮 骨髓间充质干细胞 成软骨分化 MICRORNA 慢病毒介导TGF-β1基因诱导大鼠骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化 被引量:3 2015年 [目的]探讨慢病毒介导转化生长因子β1(tansforming growth factor bata 1,TGF-β1)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)诱导成软骨细胞分化的作用。[方法]密度梯度离心法分离培养BMSCs,探索病毒感染最佳条件,取第3代细胞,分为实验组和对照组,通过慢病毒载体将外源性TGF-β1基因转染入细胞,观察绿色荧光表达情况,Real-time PCR法和western blot法检测TGF-β1基因的mRNA和蛋白表达情况,7、14 d时行Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色和Real-time PCR检测Ⅱ型胶原及聚集蛋白聚糖的表达。[结果]TGF-β1基因转染BMSCs后能够稳定表达。转染7、14 d时,实验组免疫细胞化学染色、甲苯胺蓝染色均为阳性。转染7、14 d时,实验组II型胶原mRNA均显著高于对照组(P<0.01)。转染7 d时,实验组聚集蛋白聚糖mRNA变化不明显,而14 d时显著高于对照组(P<0.01)。[结论]慢病毒介导的TGF-β1基因可成功转染大鼠BMSCs,并诱导其向软骨细胞分化。在此过程中软骨特异性标志Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的mRNA表达具有时间差异性。 陈祁青 金红婷 应俊 吴承亮 王萍儿 肖鲁伟 童培建关键词:骨髓间充质干细胞 成软骨分化 慢病毒载体 膝关节骨性关节炎早期诊断的临床特征分析 被引量:52 2015年 目的通过对膝关节骨性关节炎(KOA)患者起病时和起病2年内的临床资料进行分析,旨在发现KOA早期诊断的方法及提高诊断正确率。方法对300例KOA患者的临床资料进行回顾性分析,观察患者起病时及起病2年内的主要临床症状及体征,并分析其中37例行膝关节镜手术的资料。术前均行膝关节1.5 T MRI常规扫描及3.0 T MRI UTE成像检查,按分级标准分别对KOA进行分级,以关节镜下诊断为标准,对比分析2种MRI检查的诊断符合率。结果 300例KOA中,245例首发症状为膝关节冷痛,阳性率81.7%;231例关节弹响,阳性率77.0%;82例晨僵,阳性率27.3%。在膝关节体格检查中,挺髌试验阳性者143例,阳性率47.7%;髌股研磨试验阳性者125例,阳性率41.7%;膝内翻者74例,阳性率24.7%。行膝关节手术的37例关节镜分级:0级5例,Ⅰ级20例,Ⅱ级12例。以关节镜下诊断为标准,3.0 T MRI UTE成像检查与关节镜的Ⅰ级(χ2=4.497,P=0.034)、Ⅱ级(χ2=5.196,P=0.014)诊断符合率均高于1.5 T MRI常规扫描,差异有统计学意义(P<0.05)。结论早期KOA多数以膝关节冷痛为首发症状,关节弹响及晨僵也是确诊KOA的重要线索;体格检查中主要以挺髌试验及髌股研磨试验为主,同时应检查膝内翻情况;辅助检查主要依靠膝关节MRI,且运用3.0 T MRI UTE序列关节软骨成像可提高对KOA的早期确诊率。 王亮 陈祁青 童培建 肖鲁伟 金红婷关键词:膝关节骨性关节炎 关节镜 磁共振 右归饮含药血清对TGF-β1诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的影响 被引量:3 2015年 [目的]观察不同浓度右归饮含药血清对转化生长因子β1(tansforming growth factor,TGF-β1)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)向软骨细胞分化的影响。[方法]密度梯度离心法分离培养大鼠BMSCs,取第3代,分为正常对照组、诱导对照组、右归饮高剂量组、右归饮中剂量组、右归饮低剂量组。正常对照组加入大鼠空白血清,诱导对照组加入诱导液(10 g·L-1 TGF-β1、10-7mol·L-1地塞米松、50mg·L-1维生素C)及大鼠空白血清,右归饮各组加入诱导液及相应的含药血清。14d后,进行甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色,采用Real time PCR检测Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖m RNA的表达。[结果]甲苯胺蓝染色及免疫细胞化学染色显示,正常对照组未见阳性细胞,诱导对照组及右归饮各组细胞均呈阳性。与诱导对照组比较,右归饮各组平均累积光密度值均增高(P<0.01),右归饮低剂量组高于高、中剂量组(P<0.01)。Real time PCR检测结果显示,与正常对照组相比,诱导对照组及右归饮各组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖m RNA的表达均增高(P<0.01);与诱导对照组比较,右归饮各组Ⅱ型胶原、聚集蛋白聚糖m RNA的表达均增高(P<0.01),其中右归饮低剂量组显著高于高、中剂量组(P<0.01)。[结论]右归饮含药血清能在一定程度上促进TGF-β1诱导的BMSCs成软骨细胞分化,低剂量组效果较显著。 陈祁青 金红婷 吴承亮 王萍儿 应俊 肖鲁伟 童培建关键词:骨髓间充质干细胞 软骨细胞 诱导分化 右归饮