夏杰 作品数:30 被引量:125 H指数:7 供职机构: 华东理工大学生物工程学院 更多>> 发文基金: 上海-SK研究与发展基金 国家重点基础研究发展计划 上海市“科技创新行动计划” 更多>> 相关领域: 生物学 化学工程 医药卫生 轻工技术与工程 更多>>
环隙气升式发酵罐的开发研究 章学钦 夏杰 屠天强关键词:发酵罐 发酵 流体力学 力学性质 氧 传质率 巴氏毕赤酵母SMD1168表达人溶菌酶的发酵条件 被引量:11 2003年 研究用毕赤酵母SMD1168菌株(MutS,HIS4+)表达人溶菌酶(HLZ)的发酵条件。此菌株具有对胞外分泌的外源蛋白不降解、对反应器氧传递效率的限制不敏感的特性,有利于在常规反应器条件下的过程放大。在培养基中添加复合维生素,在流加甲醇溶液中添加山梨醇或甘露醇可维持细胞正常的生长和代谢,并表达高活性的HLZ。采用恒溶解氧的方式流加甘油溶液以提高细胞密度,在一段时间内使细胞处于碳源半饥饿状态后,使用恒速流加甲醇溶液诱导HLZ表达。HLZ的体积生成速率达到9.6mg/(L·h)左右,上清液中HLZ的含量约为1.6g/L,发酵周期为110h。 夏杰 徐殿胜 陆兵 安米 张华关键词:巴氏毕赤酵母 人溶菌酶 流加 发酵 结核病核酸疫苗纯化过程的初步研究 被引量:1 2006年 对结核病核酸疫苗的质粒DNA的制备性纯化过程进行了初步研究。此工艺主要包括以简化的碱裂解法处理大肠杆菌、超滤与离心法除大部分杂质并浓缩样品、Q-Sepharose阴离子交换层析、DNA B ioSepharTMFF亲和层析等步骤,以去除细胞RNA和蛋白等杂质,并对不同分子结构的质粒DNA作分离。结果表明:以碱裂液中质粒DNA为计算基准的得率为56.61%、超螺旋质粒DNA的电泳纯度100%。 毛记军 徐殿胜 夏杰 陆兵关键词:结核病 核酸疫苗 质粒 纯化 层析 治疗性DNA疫苗生产工艺及质量检测的研究 被引量:1 2009年 研究了治疗性DNA疫苗的大规模生产工艺。利用硫酸铵沉淀法和超滤技术对发酵菌体的碱裂解液进行预处理,除去发酵液中大量的RNA;然后依次用凝胶过滤层析、亲和层析和离子交换层析对DNA疫苗进行纯化;并对最终质粒DNA溶液进行全面的质量检测。结果表明,DNA疫苗总产率可达62%,各项质量指标均符合药用DNA疫苗质量标准。该纯化工艺操作简便、成本低,适用于大规模工业化生产。 王浪 陆兵 夏杰 徐殿胜关键词:DNA疫苗 生产工艺 纯化 层析 一种医用丝素蛋白材料的表面处理方法 本发明公开了一种医用丝素蛋白材料的表面处理方法,首先通过一定条件下的深层次清洗,消除材料上的痕量污染,恢复丝素蛋白固有的本色,然后通过在材料表面耦合促进细胞生长的细胞生长因子,使材料表面含有细胞生长因子,从而大大提高和改... 徐殿胜 陆兵 夏杰 谢菁文献传递 培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响 被引量:1 2009年 研究了培养基组分对hCG核酸疫苗质粒拷贝数的影响。结果表明,复合培养基比合成培养基更利于hCG核酸疫苗质粒DNA的生产。通过均匀设计实验确定,当培养基中含有胰蛋白胨10g·L-1、酵母浸出粉8g·L-1、NaCl10g·L-1、甘油10g·L-1、KH2PO40.37g·L-1、K2HPO42.01g·L-1时,单位菌体质粒含量可达6.68mg·g-1;在此基础上添加乙酸2.0g·L-1、谷氨酰胺1.2g·L-1、甘氨酸1.0g·L-1、天门冬氨酸0.4g·L-1,可使质粒拷贝数进一步扩增,单位菌体质粒含量可达9.32mg·g-1,为LB培养基的5.12倍。 王剑 夏杰 陆兵 徐殿胜关键词:DNA疫苗 质粒 拷贝数 培养基 大肠杆菌hCG核酸疫苗质粒扩增营养条件研究 2010年 采用摇瓶实验考察了营养条件对大肠杆菌hCG核酸疫苗质粒含量的影响。结果表明,甘油是质粒DNA生产的最佳碳源;C/N比对质粒DNA含量影响明显。向改良的PDM培养基中添加3 g.L-1的柠檬酸钠,可以降低糖酵解途径的代谢通量,使质粒含量达到11.73 mg.L-1,提高了20%。氟化钠是糖酵解途径的抑制剂,在菌体生长8 h后,向改良的PDM培养基中添加浓度为120 mg.L-1的氟化钠,培养后质粒DNA含量为12.09 mg.L-1,提高了29%。进一步研究发现乙醇对质粒DNA含量影响显著,在改良的PDM培养基中添加2 g.L-1的乙醇,可使质粒DNA含量达到12.94 mg.L-1,提高了32%。 赵雪梅 夏杰 陆兵 徐殿胜关键词:营养 质粒DNA 柠檬酸钠 氟化钠 DM·MC共聚物对α-酮基-L-古龙酸发酵液的除蛋白性能 1996年 在研究由二步发酵法制维生素C的α-酮基-L-古龙酸发酵液除蛋白工艺过程中,重,人考察甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(DM·MQ与丙烯腈共聚物的除蛋白效率。证明此结构的凝聚剂对于微生物发酵液中的蛋白质具有优良的凝聚能力,去除可溶性蛋白质达94%~95%,超过一般有机高分子阳离子凝聚剂,并确定了此共聚物结构中阳离子度70%~80%的共聚物具有最佳效果。 夏杰 单建国 郭无昕 章学钦关键词:凝聚剂 酮基 古龙酸 共聚物 双水相萃取与疏水层析分离基因工程人溶菌酶 被引量:4 2008年 采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶。通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响。结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠、氯化钠、PEG4000的质量浓度为0.13、0.06和0.08时,人溶菌酶上相回收率达98.8%,纯化因子18.0,浓缩因子3.6。双水相萃取后选用高效疏水层析色谱纯化人溶菌酶,经苯基高取代基介质疏水层析后得到纯化因子为22.7,收率为88.4%的人溶菌酶纯化产品,电泳纯度检测为100%。 张亚杰 夏杰 陆兵 徐殿胜关键词:双水相萃取 疏水层析 毕赤酵母 重组人内皮抑素层析复性的相关研究 被引量:3 2008年 研究了由大肠杆菌表达的重组人内皮抑素(Recombinant human endostatin,rhES)的复性、纯化过程。比较先层析复性后纯化(工艺1)和先纯化后层析复性(工艺2)两种工艺的结果表明:工艺1所得rhES的收率和活性回收率分别为64.44%和213.19%,与工艺2相比分别提高8.70%和33.04%。工艺1中,研究了3种凝胶过滤柱复性及复性pH和上样蛋白浓度对复性的影响,并优化相关工艺。结果表明:在pH9.0,rhES浓度3.91 mg/mL的条件下,采用双梯度凝胶过滤Sephacryl S-100 HR进行层析复性,Sephadex G-25脱盐后,用SP Sepharose FF阳离子交换吸附纯化,获得活性回收率为213.19%,HPLC纯度为97.07%的rhES,其IC50为1.58μg/mL。 乔路 夏杰 陆兵 徐殿胜关键词:重组人内皮抑素 包涵体 层析 纯化