吕长荣 作品数:63 被引量:102 H指数:5 供职机构: 西北农林科技大学动物科技学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 国际科技合作与交流专项项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 医药卫生 文化科学 更多>>
脂肪间质干细胞修复犬关节软骨损伤的研究 2024年 以手术方法建立2对共4处犬关节软骨组织损伤;使用无血清细胞培养液为对照,以标记有绿色荧光蛋白的犬脂肪间充质干细胞进行移植治疗试验。病理模型犬进行常规饲养15周后,对病理模型进行取样并系统检测。结果显示,试验组较对照组有更大面积和体积的新生关节软骨组织。新生软骨样组织呈绿色荧光蛋白(GFP)阳性。试验组与对照组的新生组织HE染色显示,试验组的细胞外基质染色较对照组更加均一,基质切面更加平整光滑。透明软骨的标志性基因COL2a1的免疫荧光染色显示,试验组可见较强的COL2a1阳性染色,而对照组仅有少量微弱的阳性染色。实时荧光定量PCR检测结果显示,试验组的COL2a1含量显著高于对照组(P<0.05)。试验结果表明,直接移植原代犬脂肪间充质干细胞到关节腔可有效修复犬软骨组织缺损,为干细胞治疗临床软骨组织损伤提供了科学依据。 滕鑫 艾力·艾尔肯 吕长荣 张欣珂 赵献军 华进联关键词:间充质干细胞 干细胞移植治疗 利用转录因子转染牛体细胞成为诱导性多能干细胞的方法 本发明公开了一种利用转录因子转染牛体细胞产生诱导多能干细胞(iPSCs)的方法,具体包括下列步骤:1)牛皮肤成纤维细胞的分离与培养;2)牛维持多能性转录因子基因的克隆及其逆转录病毒载体的构建;3)逆转录病毒的包装与准备;... 吕长荣 陈冬梅 辛晓玲 窦忠英小鼠Nanog基因原核表达载体的构建及表达 被引量:12 2007年 【目的】构建小鼠Nanog基因原核表达载体并进行表达,以期得到大量GST融合蛋白。【方法】根据Gene Bank中的Nanog序列及pGEX-KG中的多克隆位点设计引物,以含有Nanog基因片段的pNA992重组质粒为模板,经PCR扩增出918 bp的DNA片段。将所得片段与pGEX-KG载体连接,转化TGⅠ大肠杆菌,筛选阳性克隆,其扩增片段测序结果与原序列一致,表明原核表达载体pGEX-KG-Nanog已构建成功。提取pGEX-KG-Nanog质粒转化到BL21(DE3)表达菌株中,经IPTG诱导后收集菌体进行SDS-PAGE电泳鉴定,并优化其表达条件。【结果】在大肠杆菌中获得Nanog基因融合表达,主要以包涵体形式存在;融合蛋白的分子量为63 kD;以IPTG终浓度为0.8 mmol.L-1,诱导5 h后融合蛋白产量最高。【结论】小鼠Nanog基因在大肠杆菌中获得了高效表达,为今后Nanog蛋白的多克隆抗体制备奠定基础。 李军 吕长荣 窦琳 窦忠英关键词:NANOG基因 原核表达 GST融合蛋白 小鼠 西安地区宠物犬肿瘤疾病的流行病学分析 被引量:7 2013年 通过对西北农林科技大学西安宠物医院2009年1月至2011年10月期间宠物犬病例统计,了解西安地区宠物犬肿瘤的发生情况及其影响因素。结果显示,首诊病例共计4 034例,其中肿瘤病例共计57例,占总病例1.4%。对临床诊断为肿瘤病例犬的品种、年龄、性别、肿瘤种类、环境与季节等主要因素进行分析显示,发病犬品种包括京巴犬、金毛犬、德牧犬、藏獒犬和罗威那犬等18个品种,发生率最高的品种为京巴犬,有13例,占肿瘤病例的23%,其后依次为金毛犬、德牧犬和藏獒犬;年龄是影响犬肿瘤发生的主要因素,1岁以下的幼龄犬和9~13岁老龄犬发病率较高,9、10和13岁是肿瘤发病率最为集中的年龄点;在性别方面,结果揭示患肿瘤犬的雌雄比例为1.5∶1,母犬乳腺肿瘤最多,有10例,占肿瘤病例的18%,占总病例数的0.24%。 刘清华 乔海莲 赵献军 张翊华 吕长荣关键词:宠物犬 肿瘤 流行病学 从包涵体中纯化重组小鼠Nanog转录因子 2009年 利用BL21/pET-32a-Nanog表达菌株诱导表达Nanog融合蛋白,经破碎、高速离心、洗涤,获得Nanog蛋白粗制品,用8 moL/L尿素变性溶解Nanog融合蛋白,离心取上清,进行Histrap HP亲和层析纯化,复性,经SDS-PAGE和Western Blot鉴定得到了纯度为97%以上的重组小鼠Nanog蛋白。建立了一种可行的从包涵体中纯化重组小鼠Nanog蛋白的方法,为Nanog蛋白的活性检测及其基因表达调控机理的功能研究奠定基础。 李军 李军 李勇 窦忠英关键词:小鼠 NANOG 包涵体 纯化 奶牛皱胃变位不同诊断方法的比较 通过对奶牛皱胃变位5种不同诊疗方法的详细比较,总结了不同诊断方法的优缺点,并对与皱胃变位容易混淆的疾病进行了鉴别;结合临床实践分析了皱胃变位的发病原因,制定出具体治疗方案和一系列有效的预防措施。 吕长荣 杨必顺 乔海莲关键词:奶牛 皱胃变位 诊疗方法 文献传递 动物有机磷中毒的诊疗体会 被引量:1 2006年 吕长荣 乔海莲 杨增岐 杨必顺关键词:有机磷中毒 诊疗 体内外寄生虫 有机磷化合物 驱虫药 犬细小病毒的病例分析 被引量:3 2011年 为了解西安地区犬细小病毒感染的流行病学和临床诊疗情况,给该病的防制提供科学依据,对一年期间前来西北农林科技大学西安宠物医院就诊的70例犬细小病毒感染病例进行了临床调查研究,并对部分病例诊疗过程中的血液白细胞变化进行了监测。西安地区犬细小病毒感染一年四季均可发生,以深秋和冬春季多发;感染犬以7周龄~6月龄的断奶犬最多;感染犬品种以贵宾犬、藏獒、德国牧羊犬、罗威那犬、萨摩犬、金毛犬、博美犬、哈士奇等较为多见;CPV感染犬的临床表现以肠炎型为主,占91.4%,心肌炎型占8.6%;对70例CPV感染犬采取综合治疗措施,治愈率为81.42%;犬感染CPV后的血液白细胞数多呈明显下降趋势,白细胞越低,疾病感染越严重,预后越差。 权中会 魏莉 赵献军 张国士 吕长荣 马新武 武浩关键词:犬细小病毒 流行病学 牛sox2基因的克隆及重组反转录病毒载体的构建 被引量:1 2009年 为了构建包含牛sox2基因编码序列的重组反转录病毒载体,获得有感染性的病毒颗粒,本研究以胎牛原始生殖嵴为材料,用RT-PCR方法克隆出牛sox2基因的开放阅读框序列,将其亚克隆至pMD18-T载体并测序。结果表明获得的基因片段与发表的牛sox2基因序列(Gen Bank Accession No.NM-001105463)高度同源;将测序正确的重组T载体用EcoRI和BglII酶切,基因片段插入反转录病毒载体pMSCVneo的相同酶切位点,成功构建了重组反转录病毒载体pMSCV-sox2。采用脂质体法用pMSCV-sox2转染包装细胞PT67,同时用pMIG(含绿色荧光蛋白)作为阳性对照,经流式细胞仪测定,该载体转染效率达到68.3%;转染后PT67细胞经G418筛选得到稳定的产毒细胞株,其病毒滴度达8.16×107CFU/mL,为下一步特定因子诱导牛体细胞转变为牛iPS细胞的研究奠定了基础。 辛晓玲 吕长荣 陈冬梅 窦忠英关键词:IPS细胞 反转录病毒载体 83例犬吉氏巴贝斯虫病的流行病学特点与治疗效果分析 被引量:10 2017年 对西北农林科技大学西安宠物医院2015年1—12月共83例犬吉氏巴贝斯虫病的临床症状、流行特点、实验室检查及治疗效果等进行了调查分析。结果表明:该病在西安地区的高发月份在9—10月,该期间病例占全年的60.2%;高发年龄在15岁,该年龄段病例占全部病例的67%;治疗以应用三氮脒杀虫为主,贫血严重的犬需及时进行输血;临床治愈率为91%,复发率为25%,复发时间多集中在第一次临床治愈后1至2个月。 陈冰洁 李勤凡 权中会 马新武 吕长荣 武浩关键词:吉氏巴贝斯虫