张超
- 作品数：21 被引量：9H指数：2
- 供职机构：河南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省教师教育课程改革研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 一种连续化生产c-di-AMP的方法
- 本发明属于基因工程和酶工程技术领域，具体涉及一种采用固定化DisA蛋白连续生产c-di-AMP的方法。该方法步骤：1、DisA基因改造，通过基因工程手段，将DisA基因与cbm基因融合构建重组质粒载体；2、重组质粒转化，...
- 杨国宇张改平杨森孔江南张超韩莹倩郭豫杰
- 畜牧兽医类本科《分子生物学》理论及实践的改革探索
- 2016年
- 分子生物学技术与畜牧兽医相结合是21世纪畜牧业发展的热点,给畜牧兽医业带来了广阔的发展前景。为了培养符合现代畜牧兽医需要的复合型人才,需重视《分子生物学》的理论及实践教学。本文针对《分子生物学》课程的教材内容、教学方法以及实验操作等方面提出探索性改革意见,以期提高学生的综合素质及竞争力。
- 王江褚贝贝鲁维飞张超郑悦亭杨国宇
- 关键词：分子生物学教学
- 一种猪akirin2基因启动子及其应用
- 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用，其核苷酸序列如SEQ：ID：1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明...
- 郭豫杰杨国宇高会贞王月影钟凯鲁维飞韩立强张超
- 文献传递
- 促伪狂犬病毒gD蛋白可溶性表达标签的筛选及融合蛋白生物学活性的检测
- 2024年
- 为筛选有助于伪狂犬病病毒(PRV)gD蛋白可溶性表达的标签,并检测其融合蛋白的生物学活性,本研究通过PCR扩增PRV gD基因后,分别连接携带MBP、SUMO、NusA和GST 4个不同促溶标签的原核表达载体,构建重组质粒pET21b-MBP-gD、pET21b-SUMO-gD、pET21b-NusA-gD和pET21b-GST-gD。经双酶切和基因测序鉴定正确后分别转化大肠杆菌BL21(DE3),采用IPTG诱导后经SDS-PAGE检测各重组蛋白的表达,筛选可溶性表达效果最好的标签。结果显示,各重组质粒经酶切鉴定均获得852 bp的目的条带与各自的载体条带,均与预期相符,进一步测序结果显示插入基因序列与密码子优化后的PRV gD基因序列一致。SDS-PAGE检测结果显示,MBP标签融合gD蛋白的可溶性表达量最大,GST标签次之,SUMO标签和NusA标签融合的gD蛋白则均以包涵体形式表达。因此,选用重组MBP-gD蛋白(rMBP-gD)做后续鉴定。将rMBP-gD经Ni-NTA柱纯化后采用western blot和间接ELISA检测其反应原性;采用间接免疫荧光试验(IFA)检测该重组蛋白与PK15细胞的结合;将该重组蛋白与PRV-GFP共孵育PK15细胞后,经流式细胞术检测其竞争结合PK15细胞,从而抑制PRV的感染情况。结果显示,rMBP-gD具有反应原性,且可以结合PK15细胞,rMBP-gD蛋白可竞争结合PK15细胞抑制PRV的感染。上述结果首次证实,可溶性原核表达的rMBP-gD表达效果好,且具有生物学活性,本研究为PRV基因工程亚单位疫苗的后续研究奠定了基础。
- 王智豪张冬萱乔岩赵肖肖范松杰张超
- 关键词：伪狂犬病毒生物学活性
- 不同脱冷温度对巴氏奶保存性能的影响
- 2023年
- [目的]探讨不同脱冷温度对巴氏奶保存性能的影响,为巴氏奶的生产经营者及消费者提供更具实际意义参考。[方法]设置25℃、30℃和35℃三个不同的脱冷温度,每隔1 h检测样品酸度、pH值、口感和组织状态,直到变质为止,作为比较评估样品保存性能的客观指标。[结果]35℃条件下存放8 h,30℃下存放10 h,25℃条件下存放22 h的巴氏奶口感及其组织状态可接受。[结论]鉴于巴氏奶的特性,综合考量建议25℃条件下贮藏也不应超过6 h,并且食用前要彻底加热。
- 詹妍李萍萍皇甫明明韩立强张超郭豫杰姜波
- 关键词：巴氏奶保存性能
- 非洲猪瘟病毒p54蛋白单克隆抗体制备及其抗原表位鉴定被引量：5
- 2023年
- 旨在制备非洲猪瘟病毒(ASFV)p54蛋白的特异性单克隆抗体。本研究利用大肠杆菌表达系统表达p54蛋白,免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞进行细胞融合。利用纯化的p54蛋白作为包被抗原,采用间接ELISA方法筛选获得阳性杂交瘤细胞。经4次亚克隆后,取杂交瘤细胞上清进行单克隆抗体亚型鉴定,利用体内诱生法制备单克隆抗体并进行纯化。间接ELISA方法检测单克隆抗体的效价,利用交叉反应性试验、间接免疫荧光试验和蛋白印迹对所获单克隆抗体的特异性进行鉴定。根据预测的p54蛋白二级结构,采用逐步截短法分析鉴定单克隆抗体识别的抗原表位区域,并在p54的三级结构中进行标注。结果显示:成功筛选了6株分泌p54单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为28G12-1、31G7-1、31G7-2、35F10-1、35F10-2、38D3-1。其中28G12-1、31G7-1、31G7-2重链为IgG2a型,35F10-1、35F10-2、38D3-1重链为IgG1型;轻链均为κ链。单克隆抗体的最低效价为1∶25 600,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、猪急性腹泻综合征冠状病毒、猪圆环病毒2型不发生交叉反应,特异性强,所获抗体均识别p54蛋白C端127—146 aa肽段。本研究成功获得了ASFV p54蛋白和p54单克隆抗体,并鉴定了6株单克隆抗体的抗原表位,为p54蛋白功能研究和ASFV新型表位疫苗研究奠定了基础。
- 齐艳丽刘桃雪于海深张超鲁维飞王江褚贝贝张改平
- 关键词：非洲猪瘟病毒原核表达单克隆抗体间接ELISA抗原表位
- 猪伪狂犬病病毒变异株HN1201 gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定
- 2023年
- 旨在获得用于伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)实验室检测和临床诊断所需的PRV gE单克隆抗体,用灭活的PRV变异株PRV HN1201免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术将免疫小鼠脾细胞与SP2/0细胞融合,经免疫过氧化物酶单层细胞试验(immune peroxidase monolayer assay,IPMA)和免疫印迹试验(Western blot)筛选,获得2株分泌PRV gE抗体的杂交瘤细胞(1-F11-3、3-E11-3),抗体亚类分别为IgG2a和IgM,轻链均为Kappa链。间接免疫荧光试验(IFA)检测结果显示单克隆抗体可与不同PRV毒株反应,而不与PRV Bartha K61反应;Western blot、IPMA、IFA试验结果显示2株单克隆抗体均能特异性识别PRV gE蛋白,与其他病毒无交叉反应。Western blot试验鉴定2株抗体的抗原识别序列分别为^(64)GDDRRAGFGSALASLR^(79)和^(156)PPEVPRLRRGPPIVTPERWS^(175)。腹水纯化后的1-F11-3、3-E11-3抗体用于Western blot检测的最高稀释比分别为1∶14000和1∶12000,1-F11-3的IFA效价为2^(-14),3-E11-3不可用于IFA检测。结果表明,本研究制备的PRV gE抗体特异性强、灵敏度高,为建立快速、高效的PRV免疫学检测方法奠定了基础。
- 牛欣蕊付朋飞鲁维飞张超褚贝贝王江曾磊
- 关键词：单克隆抗体IGG2AIGM
- 一种猪akirin2基因启动子及其应用
- 本发明公开了一种猪akirin2基因启动子及其应用，其核苷酸序列如SEQ：ID：1所示。本发明所述的猪akirin2基因启动子在外源基因真核表达、转基因猪中的应用。本发明确定了200bp的最小启动子片段的活性最强。本发明...
- 郭豫杰杨国宇高会贞王月影钟凯鲁维飞韩立强张超
- 文献传递
- 低丘缓坡建设用地选址与开发利用评价研究——以河南省焦作市为例
- 当前河南省处于经济加速发展时期，各行各业对土地资源的需求不断加大，同时又要确保国家粮食安全，保持现有耕地数量不减少，致使经济发展和耕地保护间矛盾日益尖锐。低丘缓坡土地作为重要的用地后备资源，对其合理开发利用是实现保障经济...
- 张超
- 关键词：资源利用
- 文献传递
- 植物磺肽素在抗芜菁花叶病毒中的应用
- 本发明公开了一种植物磺肽素在制备抗芜菁花叶病毒制剂中的应用，涉及农业科学植物保护技术领域。本发明采用10mM的植物磺肽素叶片喷施本氏烟植株，发现与对照组相比，植物磺肽素处理可以显著抑制TuMV侵染及降低病毒积累水平。本发...
- 张超王超楠敬新欣李彭拜向美蓉孙炳剑李洪连
