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吴波
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
杭州市肿瘤医院
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发文基金:
浙江省自然科学基金
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相关领域:
生物学
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合作作者
宋涛
杭州市肿瘤医院
李伟莉
浙江省医学科学院
吴式琇
杭州市肿瘤医院
王闻哲
浙江省医学科学院
王孝举
浙江省医学科学院
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2013
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Wnt-1信号通路靶蛋白WISP-1的原核表达与纯化
被引量:1
2013年
目的获得纯度较高的WISP-1蛋白结构域,为进一步开发靶向WISP-1蛋白的药物奠定基础。方法将编码WISP-1蛋白4个结构域的基因克隆到pFN19A蛋白表达载体中,4个重组质粒分别在大肠埃希菌中诱导表达对应的WISP-1蛋白结构域。用Halo树脂共价层析法纯化目的蛋白。结果获得了4个重组质粒pFNl9AHalo-IGFBP/VWFC/TSP/CTCK。并在KRX敏感菌株中诱导表达目的蛋白,通过优化诱导条件获得4个高表达结构域蛋白。SDS-PAGE和Western印迹特异性条带鉴定纯化蛋白的质量大小与预期一致。经BCA蛋白浓度监测,E2中重组蛋白浓度可达到500—1500mg/L。结论通过Halo树脂共价层析法,获得了纯度较高的WISP-14个结构域蛋白,为研究WISP-1蛋白在肝癌等肿瘤发生发展过程中的关键功能结构域打下基础。
王闻哲
吴波
丁明建
李伟莉
宋涛
吴式琇
王孝举
关键词:
重组蛋白质类
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