刘存霞
- 作品数：46 被引量：64H指数：5
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- 一种沉默DF‑1细胞系中IFNAR1基因的方法
- 本发明公开了一种沉默DF‑1细胞系中IFNAR1基因的方法。它首先根据IFNAR1基因，设计RNA干扰靶点序列的多个siRNA，进一步筛选出mRNA水平上敲低IFNAR1基因表达的siRNA；再构建含有IFNAR1 RN...
- 李玉峰亓丽红马秀丽刘存霞刘爱玲黄兵刘华雷宋敏训朱建华王绛辉
- 文献传递
- 鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株的选育被引量：5
- 2016年
- 【目的】将鸭坦布苏病毒BZ_2010株在SPF鸡胚上进行连续传代致弱;旨在选育安全性高、免疫原性好的活疫苗候选毒株。【方法】以SPF鸡胚为增殖宿主,将BZ_2010株连续传代,直至第120代;以1日龄雏鸭和30周龄的产蛋种鸭为试验对象,对第120代次毒株(命名为VC2)的安全性进行评价;以1d雏鸭为试验对象,对VC2株的返强情况进行评价;以18周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的中和抗体进行监测;以25周龄的种鸭为试验对象,对VC2株免疫后的保护效果进行评价;利用RT-PCR方法分别扩增BZ_2010株和VC2株的E基因和N54A基因,进行测序分析。【结果】传代病毒对鸡胚的平均死亡时间逐渐缩短,而病毒毒价有逐)渐提高的趋势,ELD_(50)由第20代的10^(-5.3)/0.1 mL提高到第120代的10^(-5.8)/0.1mL,而且第80代之前提高较快,后期基本稳定。将VC2株通过颈部皮下接种1d雏鸭和肌肉接种30周龄产蛋种鸭,接种后试验鸭无异常临床表现,肝脏也无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的安全性。将VC2在1d雏鸭进行连续5次传代,未发现试验鸭有任何异常症状,将第5代组织悬液接种1d雏鸭,采集肝脏进行病理切片观察,发现无明显病理变化,这说明VC2株具有良好的稳定性。基因测序分析结果显示,VC2株E蛋白的第86、157、189、301和312位氨基酸发生改变,而NS4A蛋白只有一个氨基酸发生突变,即第54位氨基酸由F变为L。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,第4周即可达到高峰,并且维持较长时间;VC2免疫后于第2周和第50周利用强毒株进行攻毒试验,结果VC2免疫组在攻毒后未出现异常症状,粪便正常,产蛋率保持正常,这说明VC2株免疫可对强毒株的攻击产生完全保护。【结论】通过鸡胚连续传代成功获得了一株安全性高、免疫原性好的鸭坦布苏病毒鸡胚弱化毒株。VC2免疫种鸭后抗体水平上升很快,可维持较长时间。攻毒试验结果表明,VC2株
- 于可响马秀丽袁小远刘存霞胡峰凌红丽李玉峰黄兵
- 关键词：鸡胚弱化活疫苗
- 鸭3型腺病毒与鸭新型呼肠孤病毒鉴别诊断试剂盒
- 本发明公开了一种用于鉴别鸭3型腺病毒与鸭新型呼肠孤病毒的特异性引物，包括用于检测鸭3型腺病毒的检测引物DAdV3‑1/DAdV3‑2，和用于检测鸭新型呼肠孤病毒的检测引物NDRV‑7/NDRV‑8，如SEQ ID NO....
- 于可响李玉峰姜亦飞路晓刘存霞马秀丽黄兵宋敏训
- 文献传递
- 一种通用型鸭甲型肝炎病毒抗体ELISA检测试剂盒
- 本发明公开了一种通用型鸭甲型肝炎病毒抗体ELISA检测试剂盒。该试剂盒含有以鸭甲肝病毒DHAV‑1VP3‑3VP1重组蛋白包被的ELISA板。该重组蛋白是以下述方法获得：以DHAV‑1和DHAV‑3作为材料，分别对DHA...
- 马秀丽黄兵李玉峰于可响刘存霞宋敏训刘玉山史玉颖
- 文献传递
- 表达1型和3型鸭甲型肝炎病毒VP1基因重组新城疫病毒的构建及其免疫原性被引量：6
- 2017年
- 为进一步研发安全有效的鸭甲型肝炎病毒(DHAV)多价疫苗,本研究以新城疫病毒(NDV)LaSota弱毒疫苗株为载体,构建出共表达DHAV-1和-3型VP1基因的重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1,并对其毒力、生物学特性进行鉴定。通过间接免疫荧光试验(IFA)验证DHAV-1和-3型VP1蛋白在细胞内能够有效表达。利用Western blot进一步验证重组病毒产生的中和抗体能和DHAV-1和DHAV-3VP1表达蛋白发生较强的反应。重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1保持了原重组疫苗株rLS-RFP对鸡胚的高滴度生长适应和低致病的特性。将重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1免疫种鸭1次,通过中和试验检测该重组病毒能够在鸭体内产生针对DHAV-1和DHAV-3的中和抗体,平均效价分别为1∶18.17和1∶16.60。本研究结果表明重组病毒rLS-1VP1-2A-3VP1具有作为鸭肝炎重组病毒活载体疫苗用于种鸭的潜力。
- 郑文卿宋敏训李建亮黄兵李玉峰于可响刘存霞马秀丽崔言顺
- 关键词：反向遗传操作重组新城疫病毒
- 鸽呼吸道疾病的诊断与防治被引量：1
- 2021年
- 鸽子呼吸道感染性疾病,通常是一种多病原微生物诱发的混合感染,是鸽舍中常见的疾病。1发病原因细菌、病毒、支原体、衣原体、寄生虫等多种病原引起,其中以鸽毛滴虫、支原体、衣原体感染最为普遍,平时他们潜伏在健康鸽体内,呈菌群平衡状态,但遇到紧迫、疲劳、气候恶劣、抵抗力减弱、大量微生物入侵时,便会单一或混合发病。
- 田野刘丽萍路晓赵巧雅盛媛高月花郭效珍胡峰刘存霞
- 关键词：呼吸道疾病病原微生物衣原体感染菌群平衡鸽毛滴虫支原体
- 一株鹌鹑源鸡毒支原体的分离鉴定
- 2021年
- 本研究从发病鹌鹑体内分离出1株支原体,通过菌落形态、pvpA基因的PCR扩增与测序分析,鉴定为鸡毒支原体。采用6种抗菌药物测其最小抑菌浓度(MIC),发现该分离株对泰妙菌素最敏感,MIC达0.00625μg/mL;其次为酒石酸泰乐菌素、盐酸强力霉素,对大观霉素、庆大霉素、卡那霉素的敏感性较差。
- 刘丽萍李玉杰路晓赵巧雅盛媛高月花郭效珍胡峰田野刘存霞于可响
- 关键词：鸡毒支原体鹌鹑最小抑菌浓度
- 一种沉默DF‑1细胞系中IFNAR2基因的方法
- 本发明公开了一种沉默DF‑1细胞系中IFNAR2基因的方法。它首先根据IFNAR2基因，设计RNA干扰靶点序列的多个siRNA，进一步筛选出mRNA水平上敲低IFNAR2基因表达的siRNA；再构建含有IFNAR2 RN...
- 黄兵刘存霞马秀丽艾武刘爱玲李玉峰刘华雷宋敏训王月明刘洪对
- 文献传递
- 北京鸭关节炎病例的细菌分离与鉴定被引量：2
- 2018年
- 从表现为关节炎症状的北京鸭体内分离到23株细菌,通过16S rDNA测序鉴定,确定分离株分别属于葡萄球菌、棒状杆菌和大肠杆菌,另有一株球菌尚不明分类地位。药物敏感试验结果显示,阿莫西林、阿米卡星等对分离菌具有较好的抑菌作用,而氟苯尼考、阿奇霉素等抑菌效果较差。选取12个代表菌株进行动物试验,结果表明分离菌单独对肉鸭没有明显致病作用,说明这些细菌可能仅作为条件性致病菌存在于鸭场环境中。
- 田雪孙晓军刘存霞黄兵李玉峰宋敏训
- 关键词：北京鸭关节炎细菌药物敏感试验RDNA
- 鸭甲型肝炎病毒的遗传和抗原稳定性分析被引量：4
- 2018年
- 本研究测定了实验室保存的25株(2000年～2017年)鸭甲型肝炎病毒1型(DHAV-1)和32株(2008年～2017年)鸭甲型肝炎病毒3型(DHAV-3)的VP1基因序列,利用生物信息学软件对其以及Genbank中下载的DHAV的VP1基因进行遗传进化关系分析,并选取代表毒株进行血清中和试验,分析DHAV-1或DHAV-3的遗传和抗原稳定性。结果表明,DHAV-1进化为2个遗传分支,2016年～2017年的分离毒株分布在同一分支上;DHAV-3进化为2个不同的分支,2008年～2017年分离毒株集中在相同分支上,又进一步进化为不同的亚分支;DHAV-1或DHAV-3毒株之间无明显的地理分布差异。血清交叉中和试验结果表明,DHAV-1或DHAV-3同一血清型之间具有较好的交叉保护,表明同一血清型的DHAV未发生抗原变异。本研究揭示了DHAV-1或DHAV-3的遗传进化特点和相同血清型之间的抗原稳定性。
- 马秀丽黄兵李玉峰于可响刘存霞胡峰亓丽红宋敏训艾武
- 关键词：血清中和试验血清型
