陈波
- 作品数：5 被引量：12H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 乙型肝炎病毒preS1与肿瘤坏死因子融合肽基因的克隆和表达
- 1999年
- 为提高hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽融合蛋白在大肠杆菌中的表达率,以及研究hTNFα和preS1(1～65)肽之间的联接肽段对hTNFα的影响,并引进蛋白酶切位点以利于融合蛋白中酶切制备preS1(1～65)肽,本文构建了5种含有两类不同基因接头和preS15′端经改造的hTNFα和HBVpreS1(1～65)肽的融合基因。然后分别将其插入表达载体pSB92中,并获得表达。SDSPAGE显示,不同结构的融合基因的表达水平不同,表达水平最高的pTPS5表达量达菌体总蛋白的60%。该表达产物经Westernblot验证,能分别特异地与抗hTNFα抗体与抗preS1抗体结合。稀释复性后,该融合蛋白还具有hTNFα的生理功能(对L929细胞的细胞毒活性),为一具有双功能活性的新的融合蛋白。经DNA序列测定表明,preS1(165)肽基因正确地融合在hTNFα基因之后。
- 陈波卢芳药立波苏成芝陈常庆
- 关键词：乙型肝炎病毒PRES1肿瘤坏死因子
- 乙肝病毒反义DNA的合成被引量：1
- 1995年
- 为了深入研究反义ＤＮＡ对乙肝病毒的抑制作用，设计合成了针对乙肝病毒基因不同功能区域的反义片段２０个，无关序列４个，长度为１５聚到１８聚，分为无修饰反义ＤＮＡ、反义ＤＮＡ－多聚赖氨酸共价连接物、部分硫代和全硫代反义ＤＮＡ四种。合成反应是在ＡＢＩ３８１型ＤＮＡ合成仪上以１μｍｏｌ或１０μｍｏｌ的规模进行的，但在计算机程序上作了一些修改以适应于部分硫代和全硫代ＤＮＡ合成。抑制实验的结果说明，所有合成的反义ＤＮＡ均对乙肝病毒有不同程度的抑制作用，互补于乙肝病毒ＰｒｅＳ＿２翻译起始区的反义１５聚－多聚赖氨酸表现出很强的抑制活性。针对核心蛋白翻译起始区的反义ＤＮＡ和针对聚合酶翻译起始区下游的反义ＤＮＡ也均表现出好的抑制活性。
- 陈常庆陈波徐金旺吴祥甫何丽芳袁正宏闻玉梅
- 关键词：反义DNA乙肝病毒DNA
- HBsAg PreS1肽段的基因工程表达与分离纯化
- 2000年
- 目的 用基因工程的方法表达和纯化ＨＢｓＡｇ－ＰｒｅＳ１（１～６５）太。方法 以ＨＢＶ全基因为模板，ＰＣＲ扩增ＰｒｅＳ１（１～６５）基因，导入谷胱甘肽巯基转移酶融合表达载体ｐＧＥＸ ４Ｔ－１，构建ｔａｃ启动子控制下的ＧＳＴ－ＰｒｅＳ１（１～６５）融合蛋白表达质粒，转化大肠杆菌ＢＬ２１宿主。结果 工程菌ＢＬ２１ ＰｒｅＳ１（１～６５）产物为可溶性蛋白，表达量约为菌体总蛋白的２０％。
- 陈波药立波
- 关键词：HBSAG纯化基因工程
- PCR－ELISA在检测血清中丙型肝炎病毒上的应用被引量：1
- 1996年
- 建立了一个替代目前使用的套式ＰＣＲ的血清中丙型肝炎病毒ＲＮＡ检测的新方法。该方法只需经过一次ＰＣＲ扩增，即可通过对掺入标记物的ＰＣＲ产物的ＥＬＩＳＡ检测得到与套式ＰＣＲ相同的结果。与套式ＰＣＲ相比，该方法具有耗时少、易操作、较少产生假阳性等特点。
- 朱剑锋陈波杨蓓蕾陈常庆
- 关键词：丙型肝炎病毒聚合酶链反应ELISA
- 乙肝病毒表面抗原preS1与人肿瘤坏死因子α融合基因的表达被引量：10
- 1998年
- 用ＰＣＲ法获得了ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（１－６５）肽段基因，将该基因融合在肿瘤坏死因子（ｈＴＮＦα）之后，插入表达载体ＰＳＢ－９２中，使融合基因的５′端直接置于大肠肝菌ＰＬ启动子下游，采用３０℃培养，４２℃诱导，获得了ＴＮＦ与ｐｒｅＳ１（１－６５）融合蛋白的表达产物。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示表达产物为２５ｋＤ，约占细菌总蛋白的３５％。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证，能分别特异地与ｈＴＮＦα抗体与ｐｒｅＳ１抗体结合，稀释复性后，该融合蛋白还具有ＴＮＦ的生理功能（对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性）。经ＤＮＡ序列测定，ｐｒｅＳ１（１－６５）肽基因正确地融合在ｈＴＮＦα基因之后。该结果提供了一种制备ｐｒｅＳ１的新方法，为进一步开展治疗肝癌和乙肝的导向药物打下基础。
- 陈波刘惠任红玉苏成芝陈常庆
- 关键词：乙肝病毒表面抗原人肿瘤坏死因子
