朱卫文
- 作品数：6 被引量：17H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家临床重点专科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 颗粒蛋白前体促进去卵巢小鼠的骨质疏松被引量：1
- 2019年
- 目的探讨颗粒蛋白前体(PGRN)对去卵巢小鼠骨质疏松的影响。方法建立野生型和PGRN敲除(PGRN-/-)小鼠卵巢切除骨质疏松模型,采用微型计算机断层扫描(Micro-CT)和三维重建获得小鼠骨组织微观结构并进行骨小梁数据分析,HE染色观察骨组织形态,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色观察骨组织中破骨细胞数量,免疫组织化学染色法检测骨组织核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、P65表达,荧光定量PCR检测骨组织TRAP mRNA水平,Western blot法检测骨组织基质金属蛋白酶9(MMP9)、MMP14、P65蛋白水平。结果与野生型小鼠相比,PGRN-/-组小鼠骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数目(Tb.N)及骨小梁厚度(Tb.Th)均显著增加,骨小梁空间距(Tb.S)显著降低;在PGRN-/-小鼠中观察到骨质疏松程度更轻,破骨细胞数量更少,骨组织RANKL、TNF-α、P65蛋白,TRAP mRNA,MMP9、MMP14表达均低于野生型小鼠。结论PGRN促进卵巢切除小鼠骨质疏松。
- 赵安平朱卫文郭民康杨武张健
- 关键词：卵巢切除绝经后骨质疏松破骨细胞雌激素
- 多层面验证共培养微环境诱导法诱导骨髓间充质干细胞心肌样分化被引量：3
- 2016年
- 为了多层面探讨共培养微环境诱导法定向诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)心肌样分化的可行性,取第3代MSCs与原代心肌细胞(CMs)进行共培养。在显微镜下观察诱导1周后的MSCs形态学变化,用免疫荧光和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)分别检测诱导的MSCs中心肌肌钙蛋白I(cTnI)、α-肌动蛋白(α-actin)、Nkx-2.5和GATA-4的基因表达变化情况。采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)分别检测诱导组和对照组的代谢产物。诱导1周后的MSCs形态呈心肌样改变,cTnI、α-actin、Nkx-2.5和GATA-4的基因表达均明显升高,正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)模型显示诱导的MSCs代谢物向CMs转变趋势明显。通过多元和单元统计分析筛选差异变量,根据一级质谱和二级质谱比对结果,最终确定12种差异代谢物。与未经诱导的MSCs相比,经诱导的MSCs与CMs中变化趋势相同的差异代谢物有7种,变化趋势不同的差异代谢物有5种。实验结果表明,无论从形态、基因、蛋白质还是代谢层面看,MSCs通过与CMs间接接触共培养后均发生了心肌样改变,但是与CMs仍存在差异。
- 何林静邓伏雪胡云凤朱卫文伍家燕常静
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌细胞
- 瘦素通过抑制PPARγ的表达抑制RAW264.7巨噬细胞向破骨细胞分化被引量：1
- 2015年
- 目的探讨瘦素对可溶性核因子κB配体的受体活化因子(sRANKL)诱导RAW264.7巨噬细胞向破骨细胞分化的影响及其机制。方法抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测瘦素对sRANKL诱导RAW264.7向破骨细胞分化的形态学影响;实时荧光定量PCR检测TRAP及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达;Western blot法检测TRAP及PPARγ的蛋白表达。结果瘦素和sRANKL联合处理组与单独sRANKL组相比,TRAP染色破骨细胞数目明显减少;TRAP的mRNA和蛋白表达量明显降低;PPARγ的mRNA和蛋白表达量明显降低,且与瘦素浓度呈梯度相关。结论瘦素可能通过抑制PPARγ的表达来抑制RAW264.7细胞向破骨细胞分化。
- 王正宇朱云杨小中杨刚朱卫文马涛张健
- 关键词：瘦素抗酒石酸酸性磷酸酶过氧化物酶体增殖物激活受体-ΓRAW264.7细胞破骨细胞分化
- 基于超高效液相色谱-串联质谱的组织代谢组学分析在股骨头坏死中的应用被引量：3
- 2016年
- 目的应用代谢组学分析方法探索股骨头坏死的组织代谢特征并寻找其潜在的生物标志物。方法分别收集23例（25髋）股骨头坏死和18例股骨颈骨折患者的股骨头组织标本，行病理学检查明确诊断。萃取骨组织标本代谢物，采用超高效液相色谱一质谱／质谱串联仪检测，对检测结果进行预处理，建立主成分分析（principalcomponentanalysis，PCA）、偏最小二乘法判别分析（partialleast．squaresdiscriminantanalysis，PLS．DA）及正交偏最小二乘法判别分析（orthogo．halpartialleastsquaresdiscriminantanalysis，OPLS．DA）模型。根据PLS．DA模型和多个独立样本的Kruskal．Wallis日检验筛选差异变量，依据一级和二级质谱推定其对应的代谢物。筛选两组峰强度变化最明显的代谢物作为潜在的生物标志物，通过二元Logistic回归进行受试者工作曲线receiveroperatingcharacteristicCHIVe，ROC）分析，评价其诊断意义。结果股骨头坏死和股骨颈骨折患者的股骨头骨组织代谢物表达模式在PCA、PLS—DA、OPLS．DA模型中均能明显区分。股骨头坏死组表达高于股骨颈骨折组的代谢物有D．精氨酸、L-脯氨酸、L一谷氨酰胺、肌苷、尿嘧啶、尿苷、LysoPC（20：4（5Z，8Z，11Z，14Z））、LysoPC（16：0）、PC（20：1（11z）／18：3（6z，9Z，12Z））、PE（P．16：0e／0：0）；低于股骨颈骨折组的有柑橘叶黄素、B--隐黄质。根据峰强度改变倍数、变量权重型投影值筛选出改变最为明显的三种物质是D-精氨酸、L-脯氨酸、L．谷氨酰胺，ROC曲线下面积分别是0．873、0．712、0．862，三种代谢物联合ROC曲线下面积为0．946。结论通过股骨头坏死和股骨颈骨折的骨组织代谢物PCA、PLS—DA、OPLS．DA模型可筛选出12种代谢物，其中D-精氨酸、L-脯氨酸、L．谷氨酰胺为潜在的股骨头坏死生物标志，其联合诊断的价值较高。
- 朱卫文杨刚徐开民徐忠玮张健
- 关键词：股骨头坏死质谱分析法代谢组学生物学标记
- 股骨头坏死患者基因表达的转录组学高通量分析被引量：3
- 2019年
- 目的:通过转录组方法,探索股骨头缺血性坏死发生发展过程中骨小梁改变的分子机制及预测股骨头坏死的诊断性生物标志物。方法:取4例股骨头坏死患者骨小梁组织(实验组)和4例股骨颈骨折患者骨小梁(对照组),通过转录组测序筛选差异基因;将筛选出的差异基因通过生物信息学软件分析,预测其可能参与的生物过程及信号通路。结果:高通量测序发现1527个差异基因(696个基因上调,831个基因下调),其中脂质运载蛋白2(lipocalin 2,LCN2)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptorγ,PPARγ)在坏死患者骨小梁组织的表达明显降低。差异表达基因在基因本体论(gene ontology,GO)分析中主要富集于细胞外基质组织、细胞外结构组织等。差异基因在京都基因与基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析主要富集于细胞外基质受体相互作用(extracellular matrix-receptor-interaction,ECM-receptor-interaction)、过氧化物酶体增殖物激活受体(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARs)信号通路。结论:本研究发现脂质运载蛋白2通过调节脂质代谢和成骨分化影响股骨头坏死的产生。对探索股骨头缺血性坏死的分子机制及诊断性生物标志物提供了线索。
- 白浩波朱卫文路倩张健
- 关键词：转录组测序骨小梁股骨头缺血性坏死脂代谢
- miR-100-5p通过抑制大鼠骨髓间充质干细胞的迁移和成骨分化参与非创伤性股骨头坏死被引量：6
- 2022年
- 目的探讨miR-100-5p在非创伤性股骨头坏死(NONFH)发病机制中的作用。方法实时定量PCR检测NONFH患者的miRNA表达,确定NONFH患者股骨头组织miR-100-5p高表达。而后培养大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSC)分为空白对照组,地塞米松处理组(地塞米松处理3 d),微小RNA阴性对照组(转染miR-NC),agomiR-100-5p组(miR-100-5p过表达),antagomiR-100-5p组(转染miR-100-5p拮抗剂)。使用实时定量PCR检测股骨头骨组织miR-100-5p、碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和Ⅰ型胶原蛋白(Col1)的mRNA表达。采用Western blot法检测股骨头骨组织ALP、RUNX2、Col1和骨形态发生蛋白受体2(BMPR2)蛋白的表达。采用划痕愈合实验评估miR-100-5p对rBMSC迁移能力的影响。通过茜素红染色观察miR-100-5p对rBMSC成骨分化能力的影响。结果与正常的股骨头骨组织相比,NONFH患者股骨头骨组织中miR-100-5p显著上调;与正常rBMSC相比,20μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中miR-100-5p表达上调;rBMSC中miR-100-5p的上调降低ALP、RUNX2、Col1和BMPR2的表达,抑制rBMSC的成骨分化能力和迁移能力。结论miR-100-5p在NONFH患者的骨组织和20μmol/L地塞米松处理后的rBMSC中表达升高。上调的miR-100-5p可能通过抑制rBMSC的迁移和成骨分化参与NONFH的发病机制。
- 杨武杨韵霏郭民康朱卫文赵安平白浩波张健
- 关键词：细胞迁移成骨分化
