冯勤
- 作品数：8 被引量：30H指数：2
- 供职机构：北京大学肿瘤医院更多>>
- 发文基金：北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生机械工程更多>>
- 结直肠癌KRAS基因突变检测及临床意义
- 目的：探讨结直肠癌患者KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系.
方法：选取北京肿瘤医院病理科2015年1月至2017年3月期间经甲醛固定、石蜡包埋并经由病理学检查确诊的结直肠癌组织213例,采用优化寡核苷酸探...
- 王萍王跃冯勤李忠武林冬梅
- 关键词：结直肠癌KRAS基因基因突变
- 免疫组化检测63例原发甲状腺癌中BRAF^V600E突变及其价值研究被引量：10
- 2018年
- 甲状腺乳头状癌是最为常见的甲状腺恶性肿瘤。BRAF^V600E突变是甲状腺乳头状癌中最为常见的基因突变之一。据报道,45%的甲状腺乳头状癌病例会出现BRAF^V600E基因突变。BRAF^V600E的突变对于甲状腺乳头状癌的确诊以及预测不良预后非常重要。目前可用于BRAF^V600E突变的检测方法有Sanger测序法、焦磷酸测序高分辨率熔解曲线分析及等位基因特异扩增(PCR)等方法。
- 冯勤李忠武刘卉周立新池海谊刘毅
- 关键词：甲状腺乳头状癌
- Tumorigenic potential of circulating tumor cells in pulmonary venous blood from Non-Small Cell Lung patients in xenograft model
- Objective: To explore the clinical value and biological characteristics of circulating tumor cells (CTCs) in p...
- 吕超赵兵甜王力民陈晋峰吴楠冯勤马媛媛张理意李少雷杨跃
- 应用噬菌体肽库技术获得与猪鼻支原体蛋白P37结合的多肽序列
- 2011年
- 本研究以猪鼻支原体P37蛋白作为筛选分子,对噬菌体展示随机肽库进行亲和淘选。利用ELISA法鉴定亲和力高的阳性噬菌体克隆,对其进行DNA测序和分析,据此推导随机多肽的氨基酸序列,然后构建、表达GST-多肽重组蛋白,经GST-pull down进一步鉴定该多肽与P37的结合力。经过4轮筛选和单克隆检测,获得18个有较强特异反应的阳性克隆,18个克隆包括了5种不同的小肽序列,它们分别为ACAPKPPWLC(12/18)、RPLSIDP-WSPHL(3/18)、RPLSNDPWSPHL(1/18)、QNMMSPIEGVRI(1/18)和WAPEKDYMQLMK(1/18)。用ACAPK-PPWLC、RPLSIDPWSPHL与GST重组的融合蛋白进行GST-pull down实验表明,RPLSIDPWSPHL多肽能与P37相互作用。本研究为进一步筛选与P37相互作用的蛋白提供了实验依据和结构基础。
- 杨华冯勤徐慧玉寿成超
- 关键词：噬菌体随机肽库
- ALK阳性非小细胞肺癌的诊断被引量：2
- 2015年
- 间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)融合基因是非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的驱动基因,存在此基因表达的ALK阳性NSCLC已被认为是NSCLC的一种分子亚型,具有较独特的临床病理特征和预后,更为重要的是,ALK抑制剂对于此类晚期患者具有明显的疗效。因此,如何诊断此类患者便成为了病理诊断工作中相当重要的部分。目前ALK阳性NSCLC的诊断方法较为多样且各有优缺点,如何挑选最佳方法用于肺癌样本的常规诊断成为临床病理所关注的重点。国内外已有较多权威指南或共识推荐了诊断方法及其流程或相关标准。基于此,本文对ALK阳性NSCLC的诊断方法及特殊检测样本类型做一综述。
- 冯勤杨欣林冬梅
- 关键词：肺肿瘤间变性淋巴瘤激酶荧光原位杂交免疫组织化学聚合酶链反应
- 非小细胞肺癌表皮生长因子受体基因突变检测及其与临床病理特征的相关性被引量：16
- 2011年
- 目的探讨中国非小细胞肺癌（NSCLC）患者表皮生长因子受体（EGFR）基因突变特点及与临床病理特征的相关性。方法采用优化寡核苷酸探针聚合酶链反应（PCR）法检测309例甲醛固定、石蜡包埋NSCLC组织中EGFR基因第18 ～21号外显子突变情况，分析EGFR突变与临床病理特征的关系。结果受检309例NSCLC样本中，EGFR基因第18、19和21号外显子总突变率为34％（105/309）。男性与女性患者的突变率分别为30.4％ （56/128）和39.2％ （49/125）。年龄≤60岁、无吸烟史、腺癌患者的突变率较高（P＜0.05），分别为40.5％ （87/215）、40.2％ （51/127）、38.8％ （78/201）。而在鳞癌和大细胞未分化癌中，EGFR基因突变检出率分别为22.2％（ 16/72）和3/14。检出的突变类型包括第18号外显子点突变（5.7％，6/105）、第19号外显子缺失突变（39.0％，41/105）和第21号外显子点突变（55.2％，58/105）。其中第18号外显子整体突变率低，但在鳞癌和腺鳞癌所占突变比例较高。结论在中国人群NSCLC中，EGFR基因突变多见于女性、年龄≤60岁、无吸烟史和腺癌患者。优化寡核苷酸探针PCR法敏感、便捷，可用于EGFR基因突变检测。
- 冯勤李向红陈钊何京生王春旭周立新薛卫成
- 关键词：受体表皮生长因子聚合酶链反应
- 沉默PES1基因表达对结肠癌细胞恶性表型的抑制作用被引量：2
- 2015年
- 目的 :探讨核仁蛋白PES1(pescadillo homolog 1)对结肠癌细胞恶性表型的影响。方法 :构建针对PES1基因的sh RNA干扰质粒,将其转染结肠癌HCT116细胞,经G418筛选耐药细胞克隆,蛋白质印迹法验证靶基因的沉默效果。采用MTT法、平板克隆形成实验、裸鼠成瘤实验、Transwell迁移及侵袭实验和FCM法分别检测沉默PES1表达对HCT116细胞增殖、克隆形成、体内成瘤、体外迁移和侵袭以及凋亡的影响,并采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测细胞增殖和凋亡相关蛋白的表达水平。结果 :成功获得PES1稳定低表达的结肠癌HCT116细胞。沉默PES1表达后,HCT116细胞的增殖、克隆形成和裸鼠体内成瘤能力均明显降低(P值均<0.01),细胞迁移和侵袭能力明显减弱(P值均<0.01),细胞凋亡水平明显提高(P<0.05)。PES1表达被抑制后,HCT116细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P值均<0.01),而Bcl-2相互作用杀伤蛋白(Bcl-2 interacting killer,BIK)、prune同源蛋白2(prune homolog 2,PRUNE2)和基质金属蛋白酶组织抑制因子3(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase 3,TIMP3)的m RNA表达水平明显升高(P值均<0.01)。结论 :PES1可能对结肠癌细胞的多种恶性表型起促进作用。
- 谢玮苏亚辉冯勤曲立科寿成超
- 关键词：结肠肿瘤RNA干扰
- 表皮生长因子受体基因突变性抗体在肺腺癌中的表达
- 2016年
- 目的：评估表皮生长因子受体（ EGFR）基因突变性抗体在浸润性肺腺癌中表达的敏感性、特异性及其与组织类型的关系。方法应用EGFR第19号外显子（ E746-A750）和第21号外显子（ L858R）突变性抗体，在组织芯片中采用免疫组织化学检测884例肺腺癌的表达情况，探讨免疫组织化学表达与组织类型的关系，并通过与扩增阻滞突变系统（ARMS）-PCR法基因检测结果（177例）相比较，分析EGFR突变性抗体免疫组织化学表达的敏感性和特异性。结果884例浸润性肺腺癌病例中，EGFR第19号外显子E746-A750缺失检测显示，3＋病例7例（0.79％），2＋病例38例（4.30％），1＋和0病例分别为129例（14.59％）和710例（80.32％）；第21号外显子L858R点突变检测显示，3＋病例82例（9.28％），2＋病例93例（10.52％），1＋和0病例分别为82例（9.28％）和627例（70.93％）。两种抗体的阳性表达（≥1＋为阳性）均多见于附壁为主型、腺泡为主型和乳头为主型，而少见于实性为主型和浸润性黏液腺癌，二者在不同组织类型中的表达差异有统计学意义（P值分别为0.014和0.016）。与177例分子病理结果对比，当定义1＋至3＋均为阳性时，第19和21号外显子的特异性分别可达98.59％、92.98％，但敏感性相对较低，为62.86％和88.89％。当定义2＋、3＋为阳性时，两种抗体的特异性分别为99.30％和97.37％，而敏感性分别为25.71％和74.60％。当定义3＋为阳性而0-2＋均为阴性时，两种抗体的特异性均达100.0％，但敏感性很低（8.57％、34.92％）。第19号外显子E746-A750缺失的18例病例中，免疫组织化学（≥1＋为阳性）敏感性高达88.89％，而非15 bp的缺失或非E746-A750缺失的8例中除2例1＋外全部为0。结论 EGFR突变性抗体的表达多见于附壁为主型、腺泡为主型和乳头为主型而少见于实性为主型和浸润性黏液腺癌。与基因
- 赖玉梅冯勤孙宇王萍时云飞赵敏吴琪李向红
- 关键词：肺肿瘤腺癌DNA突变分析免疫组织化学
