王震
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：中国科学院天津工业生物技术研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金天津市高等学校科技发展基金计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 兽疫链球菌ATCC39920可控诱导表达系统的构建及其应用
- 2016年
- 旨在构建一种在兽疫链球菌(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus)中可用的基因诱导表达系统,并探究其在两步发酵中的应用。分别构建蔗糖、乳糖、木糖和乳酸链球菌素(nisin)诱导表达载体,以编码透明质酸合成酶的has A基因作为报告基因,以has A基因功能缺失导致荚膜缺陷的?has A作为宿主菌,观察诱导后荚膜生成情况验证系统的可行性。结果显示,木糖和nisin系统不能诱导has A表达,乳糖系统诱导表达效率低,蔗糖系统可严谨且高效诱导基因表达。以?has A/p LH201菌株实施两步发酵,葡萄糖为唯一糖源时仅用于菌体生长,添加蔗糖诱导产生透明质酸,终产量达到3.4 g/L。成功构建了一种以蔗糖为诱导物的可控-诱导基因表达系统,可用于兽疫链球菌两步发酵。
- 郑小娥王震刘浩
- 关键词：兽疫链球菌透明质酸
- 酿酒酵母及其育种方式及工业化发酵生产乙醇的应用
- 本发明提供酵母菌TIB ScY02或由其传代而产生的酵母菌，其保藏编号为CGMCC NO.14248。相较于普通产乙醇工业酵母发酵生产乙醇，其乙醇产量均明显提高，能够耐受高温、高浓醪和抑制物等多重胁迫，解决高温浓醪发酵淀...
- 王钦宏蔺玉萍齐显尼郭玉凤甘雨满王震彭彦峰
- 文献传递
- 基因组编辑对酿酒酵母DNA的损伤作用及修复响应被引量：1
- 2020年
- 【目的】为了研究基因组编辑工具CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1所产生的DNA双链断裂(DNA doublestrandbreak,DSB)对酿酒酵母DNA的损伤作用及修复响应情况,对比化学物质甲基磺酸甲酯(methyl methanesulfonate,MMS)对酿酒酵母基因组DNA的损伤和修复,阐明编辑细胞在细胞水平和转录水平上的变化。【方法】起始细胞分为两种情况,包括未进行细胞周期同步化和被α-因子同步化细胞周期至G0/G1期。检测CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1处理后编辑细胞的生长情况。利用流式细胞术检测编辑细胞的细胞周期延滞的情况。利用荧光定量PCR检测编辑细胞和MMS处理细胞后DNA损伤响应关键基因转录表达水平的变化情况。【结果】起始细胞无论是未同步化还是同步化,其生长均受到基因组编辑抑制,细胞存活率降低,细胞周期被滞留在G2/M期,而MMS处理导致细胞周期S期的滞留。此外,随编辑时间的延长,突变率增加,细胞存活率降低。CRISPR/Cpf1编辑细胞的突变率和存活率均低于CRISPR/Cas9,由此可见,CRISPR/Cpf1对细胞的损伤强度高于CRISPR/Cas9。两种编辑均诱导酵母DNA损伤响应关键基因RNR3及HUG1转录水平显著上调,并且CRISPR/Cpf1介导的上调幅度大于CRISPR/Cas9,但两者均低于MMS的处理。【结论】本研究解析了CRISPR/Cas9和CRISPR/Cpf1介导的基因组编辑在细胞水平和转录水平上对DNA损伤作用及修复响应,初步揭示了酿酒酵母应对不同类型的DSB损伤时响应程度的差异,为提高基因组编辑工具的编辑能力和评估基因编辑安全性提供了重要依据。
- 张首王震蔺玉萍戎倩倩王丽贤齐显尼刘浩王钦宏
- 关键词：酿酒酵母细胞周期
- 酿酒酵母及其育种方式及工业化发酵生产乙醇的应用
- 本发明提供酵母菌TIB ScY02或由其传代而产生的酵母菌，其保藏编号为CGMCC NO.14248。相较于普通产乙醇工业酵母发酵生产乙醇，其乙醇产量均明显提高，能够耐受高温、高浓醪和抑制物等多重胁迫，解决高温浓醪发酵淀...
- 王钦宏蔺玉萍齐显尼郭玉凤甘雨满王震彭彦峰
