王爱兵
- 作品数：16 被引量：81H指数：5
- 供职机构：湖南农业大学动物医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金湖南省教育厅重点项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生理学电子电信更多>>
- 基于ITS基因分析黑斑蛙裂头蚴种系发育关系被引量：6
- 2017年
- 为了研究黑斑蛙裂头蚴种系发育关系,本研究利用聚合酶链式反应(PCR)对黑斑蛙裂头蚴湖南株核糖体DNA内转录间隔区(ITS)进行扩增与测序,应用ClustalX 2.0程序对序列进行比对,再利用Mega4.0程序进行NJ法绘制种系发育树,研究黑斑蛙裂头蚴与其他带科绦虫的种群遗传关系。结果显示,湖南省不同地区10个黑斑蛙裂头蚴分离株ITS序列基本一致,为1 362~1 382bp,各分离株之间ITS-1和ITS-2序列的同源性均高于95.4%和94.6%;与基因库中其他带科绦虫ITS-1和ITS-2序列的同源性均低于59.5%和56.9%。通过建立NJ系统发育树,湖南省黑斑蛙裂头蚴分离株与欧猬迭宫绦虫位于同一大分支,得到了很好的鉴定。黑斑蛙ITS序列在种内相对保守,而种间差异较大,因此ITS序列可以作为分子标记研究黑斑蛙裂头蚴种系遗传变异,从而为黑斑蛙裂头蚴的分子流行病学和群体遗传研究奠定基础。
- 谭磊王爱兵周湘刘雪松孔小鲜刘伟
- 关键词：核糖体DNAITS基因
- 猪流行性腹泻病毒检测方法的研究进展被引量：15
- 2019年
- 猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性传染病。该疫病的爆发流行,给养猪业造成巨大的经济损失。因此,灵敏、快速检测诊断PEDV感染是实施病毒防控措施的关键环节。本文对于近年来检测PEDV的实验室方法进行了总结,包括病毒分离培养鉴定、病毒电镜形态检查、血清中和试验(SNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学(IHC)、间接免疫荧光试验(IFA)、免疫层析法(IC)、核酸原位杂交技术(ISH)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)、逆转录-环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)、纳米颗粒辅助聚合酶链式反应(nanoPCR)等,并分别介绍了不同检测方法在应用中的优缺点,为有效诊断及防治猪流行性腹泻病毒感染提供技术指导。
- 李亚兰袁晓民湛洋杨凌宸杨凌宸谭磊胡意郭时印谭磊
- 关键词：病原学检测免疫学检测分子生物学技术
- 犬乳头瘤病毒研究概况被引量：2
- 2021年
- 犬病毒性乳头瘤(Canine viral papillomatosis)是由犬乳头瘤病毒(Canine papillomavirus,CPV)引起的一种犬传染病,主要感染犬皮肤和黏膜的鳞状上皮(如口腔、唇周、生殖器及皮肤),表现为疣或“花椰菜样”的乳头状瘤,恶化时可转化为鳞状细胞癌。目前国内外对于该病毒的基础、预防及临床研究甚少,对该病毒及所致疾病的认识不足,因此,对CPV的基本生物学特性、现有报道的流行情况、临床症状、检测方法以及目前预防性疫苗研发状况进行综述,为未来深入研究CPV理论基础、临床检测和疫苗研发提供参考。
- 李亚兰冯园杨雅娣胡意谭磊谭磊杨凌宸邓治邦
- 关键词：生物学特性临床症状预防性疫苗
- 稳定干扰IFITM1表达的细胞系建立及对PRV、PCV2、TGEV在细胞内复制的影响被引量：1
- 2020年
- 为构建稳定干扰(IFITM1)基因表达的猪空肠上皮细胞系J2-KD(knockdown,KD),并研究干扰IFITM1表达后对伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的影响。应用基因克隆技术,构建pLKO.1-EGFP-Puro-IFITM1重组载体,与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,产生绿色荧光蛋白标记的表达IFITMshRNA的慢病毒,48 h后收集病毒上清。用收获的慢病毒感染猪小肠上皮细胞(J2细胞)后,经过嘌呤霉素筛选及细胞有限稀释法,通过RT-PCR鉴定后,获得稳定干扰IFITM1基因的细胞系,并由MTT法验证干扰IFITM1表达对J2细胞生长无影响,将成功构建的干扰IFITM1表达的J2稳定细胞系命名为J2-KD。分别用PCV2、PRV和TGEV感染J2-KD细胞,用实时荧光定量PCR方法检测病毒的复制情况。结果显示,成功建立了稳定干扰IFITM1表达的J2细胞系(J2-KD);在J2-KD细胞中PCV2和TGEV病毒复制拷贝数出现升高,而PRV出现降低的现象。表明,干扰IFITM1基因明显抑制PRV病毒复制,而促进TGEV和PCV2的复制,这为进一步研究猪源IFITM1蛋白功能及阐明其抗病毒分子机制奠定了基础。
- 贺佳怡王爱兵杨凌宸颜可欣谭磊王教顺袁晓民
- 关键词：稳定细胞系伪狂犬病病毒猪传染性胃肠炎病毒
- 豪猪血蜱的形态学和分子生物学鉴定被引量：2
- 2022年
- 为豪猪血蜱的鉴定提供准确依据,从湖南省怀化地区猪獾体表采集蜱,运用体视显微镜超景深系统观察其形态学特征;提取蜱体壁总DNA,经PCR扩增测序获得其COX1、ITS2和16S rDNA基因序列,与GenBank数据库中序列比对,并构建系统发育树,进行同源性分析。结果显示,该蜱种雌蜱呈南瓜子形,前窄后宽;假头基为矩形,基突后缘短薄,末端刺宽圆;孔区圆形;须肢圆短,第3节背面有1对刺;盾板两侧缘呈深弧状弯曲,刻点散布均匀;颈沟短而深;缘垛较宽但不明显;无外距,内距粗短呈锥状;生殖孔为圆形,前端与基节Ⅱ中部平行,后端止于基节Ⅲ前缘;气门板呈逗点形;肛门圆形,肛沟位于肛后呈酒杯状。雄蜱除体型较小、体色较浅、盾板覆盖全背、颈沟短而浅、缘垛明显形状狭长、生殖孔与基节Ⅱ平行饱满呈唇形、肛门平行于第1缘垛呈圆形突出状、肛沟呈马蹄状等特征外,其他结构与雌蜱的相似。该蜱种COX1、ITS2和16SrDNA基因序列大小分别为749、1 656和440 bp。经测序比对,该蜱种COX1、16SrDNA基因序列与GenBank中已有豪猪血蜱COX1、16S rDNA基因序列的相似度分别可达99.21%、99.32%以上;该蜱种ITS2基因序列在GenBank中尚未有记录,其仅与长角血蜱ITS2基因序列(KX450306)的相似度较高为91.32%。通过COX1、ITS2和16S rDNA基因系统发育树分析,该蜱种与其他血蜱种聚于同一属分支下。结果表明,从猪獾体表采集的蜱种为豪猪血蜱,结合形态结构及分子标记特征较易鉴定该蜱种。
- 刘雨珂王爱兵刘国华刘磊程天印段德勇
- 关键词：形态学系统发育树
- 新型猪圆环病毒疫苗的研究进展被引量：9
- 2016年
- 从20世纪90年代开始流行到现在,全球范围内暴发的猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)给世界各国的养猪业造成了巨大的经济损失。我国是世界的养猪大国和猪肉制品消费大国,PCVAD对我国的养猪业的发展产生了很大的影响。疫苗是预防PCVAD最直接有效的方法,文中对近年来国内外猪圆环病毒疫苗的研究进展进行综述。
- 蔡杰呼高伟王乃东邓治邦王爱兵杨毅
- 关键词：猪圆环病毒疫苗
- 猪圆环病毒2型病毒样颗粒的研究及应用被引量：3
- 2015年
- 自20世纪90年代中期起,猪圆环病毒2型（PCV2）引起的猪圆环病毒病在全球范围内大规模爆发,给世界各国造成了巨大的经济损失和环境灾难。2013年,英国皇家兽医学院Alarcon,P等对PCV2给英国养猪业所造成的经济损失进行了科学的统计,研究结果表明,2008年PCV2造成5.23千万英镑的损失,而在PCV2流行期所造成的直接经济损失可达8.8千万英镑[1]。我国生猪出栏量居世界第一,占据世界约50%的产量。
- 余婉婷湛洋雷昕诺张颜谢小红王乃东邓治邦王爱兵杨毅
- 关键词：猪圆环病毒病毒样颗粒环境灾难出栏量病毒基因组核衣壳
- 猪圆环病毒2型衣壳蛋白Loops结构及病毒样颗粒制备的研究进展被引量：11
- 2018年
- 病毒样颗粒（virus—like particles，VLPs）是某种病毒的1种或几种结构蛋白在体外组装而成，由于VLPs不包含病毒基因组，在宿主细胞q-不能自我复制，因此VLPs在亚单位疫苗应用中具有较高的生物安全性。自猪圆环病毒2型（poreine circovirus type2，PCV2）在世界范围内流行以来，已经给全球养猪业带来巨大经济损失，因此PCV2的致病机理和疫苗研究具有重要现实意义。PCV2Cap蛋白（capsid protein）是病毒唯一的衣壳蛋白，也是主要的免疫原性蛋白，60个Cap蛋白亚基在体外能自行组装成PCV2VLPs，该VLPs因与天然病毒粒子形态相似并保留了病毒完整的构象表位，已经在PCV2组装和侵染机理研究、亚单位疫苗的研发及其相关性系统疾病（PCV2-systemic disease，PCV2-SD）的预防研究中得到广泛应用。本文主要对PCV2Cap蛋白的Loops结构及其VLPs的制备研究进展进行阐述，为PCV2侵染机理与亚单位疫苗的研发等提供参考。
- 王东亮湛洋胡意雷昕诺庞培张素娇王爱兵杨毅王乃东
- 关键词：猪圆环病毒2型病毒样颗粒亚单位疫苗
- 湖南省不同种类蛇源裂头蚴线粒体pnad1基因序列多态性研究被引量：2
- 2019年
- 目的对湖南省不同种类蛇源裂头呦进行形态学与分子生物学鉴定,并分析其线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶第1亚基基因部分序列(pnad1)多态性。方法对从湖南永州、郴州、岳阳等地区6种常见的野生蛇体内获得的11条裂头勉(来自大王蛇3条、乌梢蛇2条、眼镜蛇1条、灰鼠蛇2条、滑鼠蛇2条和银环蛇1条)进行形态学鉴定,PCR扩增其线粒体pnad1,并测序,分析其核苷酸序列种内差异,并与已报道的迭宫属绦虫和其他属绦虫的相应序列进行同源性比较;以土耳其斯坦东毕吸虫为外群,用软件MEGA7.0采用邻接法构建系统进化树。结果从不同蛇类分离的11条虫体经形态学鉴定为裂头蚴。PCR扩增出11条裂头蚴分离株的nad1序列,片段大小为648bp,种内遗传差异分别为0~1.4%。与GenBank中收录的欧猬迭宫绦虫分离株序列相似性为97.8%-99.3%,与其它绦虫的序列相似性均低于74.3%。系统进化树结果显示,本研究分离的不同蛇源裂头蚴分离株与已知欧猬迭宫绦虫聚为一支,与微小膜壳绦虫和阔节裂头绦虫亲缘关系较近,与其它绦虫分支相隔较远。结论湖南省不同蛇源裂头蚴分离株均为欧猬迭宫绦虫,但存在一定的遗传变异,且线粒体pnad1基因适合作为分子标记对蛇源裂头蚴进行遗传变异研究。
- 谭磊王爱兵孔小鲜梁轩贺峻琳李洁胡丹刘伟
- 关键词：线粒体系统发育研究
- 新型猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗研究进展
- 2015年
- 猪繁殖与呼吸障碍综合征（Porcine reproductiveand respiratory syndrome,PRRSV）是由病毒性抗原PRRSV（Porcine reproductive and respiratory syndromevirus）引起的,临床上以猪的呼吸和繁殖障碍为主要特征,如猪妊娠后期流产、死胎、木乃伊胎,哺乳仔猪死亡率升高,肥育猪生长缓慢以及各年龄段猪的呼吸道疾病。
- 呼高伟蔡杰余婉婷冯朝兴王乃东邓治邦王爱兵杨毅
- 关键词：猪繁殖疫苗繁殖障碍妊娠后期哺乳仔猪
