徐远飞
- 作品数：17 被引量：28H指数：3
- 供职机构：深圳市慢性病防治中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- 纳米二氧化硅对HaCaT细胞中p53基因表达及其启动子甲基化的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究纳米二氧化硅(nm-SiO2)对人皮肤表皮细胞(HaCaT)中p53基因的表达及基因启动子区甲基化的影响。方法分别以2.5、5、10μg/ml的nm-SiO2溶液和10μg/ml的微米级SiO2(micro-SiO2)处理HaCaT24h;以3μmol/LDNA甲基化转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷(DAC)处理48h的10μg/mlnm-SiO2组为阳性对照,并设立溶剂对照组。应用荧光定量PCR检测p53基因mRNA水平的表达,Western-blot法检测其蛋白水平的变化,应用甲基化特异性PCR(MSP)检测p53基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果nm-SiO2作用24h后,HaCaT细胞中p53基因表达呈上调趋势并且p53启动子区未检测出甲基化状态。结论nm-SiO2暴露可以上调HaCaT细胞中p53基因的表达,尚未发现这种上调与p53基因启动子区CpG岛的甲基化水平改变有关。
- 龚春梅杨淋清周继昌朱玉梅莫俊銮徐远飞刘小立庄志雄
- 关键词：纳米二氧化硅P53HACAT细胞DNA甲基化
- 外泌体分离与鉴定方法的研究进展被引量：14
- 2018年
- 外泌体是一种由细胞分泌的膜性囊泡小体,存在于多种体液、分泌物和排泄物中,形成一种特殊的细胞间信息传递系统或病理表征,其携带的m RNA、mi RNA和蛋白质等生物分子可作为疾病诊断的新型标志物。建立稳定而成熟的外泌体分离与鉴定方法是进行外泌体及其生物医学意义研究的前提。目前的外泌体分离技术包括离心、沉淀、超滤、免疫亲和及微流控等技术。鉴定技术主要基于电子显微形态学、颗粒大小及浓度的纳米示踪、蛋白质免疫印迹、流式细胞术等。现对这些技术进展进行综述,这将有助于研究者结合自身条件选择合适的方法获取外泌体,以开展相关研究。
- 龚春梅徐远飞周继昌
- 关键词：外泌体
- 不同饲料硒水平饲养大鼠的多组织内参基因筛选被引量：3
- 2019年
- 目的筛选不同饲料硒(selenium,Se)水平饲喂大鼠时,不同组织中稳定表达的内参基因(reference genes,RGs)。方法 24只断乳雄性SD大鼠在缺Se饲养5周后,随机均分为4组,分别以Se含量<0.01、0.25、3、5 mg/kg饲料饲喂4周后处死,取肝、睾丸、骨骼肌、脂肪组织等样品待检。以荧光定量PCR检测Actb、Atp5f1、B2m、Gapdh、Gusb、Hprt、Pgk1、Ppia、Rplp2、Rps18、Tbp、Ywhaz等12个候选内参基因的mRNA水平,以geNorm、NormFinder、BestKeeper、Delta CT和RefFinder等方法对其表达稳定性进行评价。结果各组织中稳定性排名前4的内参基因是:肝中Ppia>Atp5f1>Rplp2>Hprt;睾丸中Ywhaz>Atp5f1>Rplp2>Ppia;骨骼肌中Tbp>Ppia>B2m>Rps18;脂肪组织中Hprt>Tbp>Atp5f1>Pgk1;综合4种组织,则Rps18>Hprt>Rplp2>Atp5f1。结论分析不同饲料Se水平饲养大鼠的目标基因表达水平时,应根据组织类型选择适宜的内参基因。
- 梁雄顺莫俊銮龚春梅徐远飞刘小立杨晓光周继昌
- 关键词：内参基因定量PCR
- 一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒
- 本申请涉及生物医学检测技术领域，提供了一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒。本申请甲基化CpG位点作为生物标志物在诊断和/或预后评估糖尿病视网膜病变中的应用，甲基化CpG位点选自以下甲基化CpG位点中任何一种或两种以上的...
- 龚春梅洪文旭杨慧徐远飞胡黎明李雅琪彭爱宇
- 一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒
- 本申请涉及生物医学检测技术领域，提供了一种甲基化CpG位点的应用以及试剂盒。本申请甲基化CpG位点作为生物标志物在诊断和/或预后评估糖尿病视网膜病变中的应用，甲基化CpG位点选自以下甲基化CpG位点中任何一种或两种以上的...
- 龚春梅洪文旭杨慧徐远飞胡黎明李雅琪彭爱宇
- 分子信标探针及引物对、VDR基因SNPs位点检测方法
- 本发明公开一组分子信标探针及引物对、VDR基因SNPs位点检测方法。该分子信标探针包括第一探针和第二探针；第一探针包含第一核心序列5’‑TGGGC[A/C]CCTCACTGCTCA‑3’，第二探针包含第二核心序列5’‑G...
- 周继昌刘小立朱玉梅杨应周梁雄顺徐远飞周小英车晓玲
- 文献传递
- 过量硒加重二硝基氯苯诱导的小鼠特应性皮炎样表现被引量：2
- 2018年
- 目的 观察硒对小鼠特应性皮炎样表现的影响。方法 40只BALB/c小鼠随机等分为缺硒组（0.01 mg/kg）、正常硒组（0.25 mg/kg）、过量硒组（3.00 mg/kg）和对照组（0.25 mg/kg），4组小鼠先用缺硒饲料饲养4周后，再分别以缺硒、正常硒、过量硒和正常硒饲料喂养4周。此后，3个致敏组（缺硒组、正常硒组、过量硒组）采用二硝基氯苯（DNCB）诱导特应性皮炎样表现。激发期间监测小鼠皮炎表现严重程度。激发3周后检测小鼠血浆总IgE、全血炎症细胞计数，并剪取小鼠背部皮肤组织进行组织病理检查，分析组织中硒含量。单因素方差分析方法评估多组间IgE、硒水平和细胞计数等检测结果差异, Pearson相关性分析和线性回归分析评估IgE等检测指标与硒水平的相关性。结果 致敏6 d后，致敏组小鼠皮肤表现评分明显高于对照组（致敏第6、8、11、13、15、18天时各组间比较，F值分别为44.897、76.622、114.866、33.352、28.605、11.271，均P 〈 0.01），第11天过量硒组皮肤表现评分明显高于缺硒组和正常硒组（均P 〈 0.05）。与对照组相比，致敏小鼠均发生明显的皮炎病理改变，但3个致敏组之间皮损中炎症细胞计数差异无统计学意义（均P 〉 0.05）。致敏小鼠全血炎症细胞和血浆总IgE水平均随膳食硒水平的增加而升高；其中过量硒组血浆总IgE水平升高最明显，与缺硒组、正常硒组和对照组比较，差异均有统计学意义［（167.17 ± 8.49） μg/L比（124.78 ± 5.32） μg/L、（132.61 ± 4.71） μg/L、（109.13 ± 0.79） μg/L，t值分别为3.919、3.222、6.485，均P 〈 0.05］。致敏组小鼠皮肤组织硒含量与小鼠血浆总IgE水平（r = 0.579，P 〈 0.001）、全血白细胞（r = 0.414，P 〈 0.05）、中性粒细胞（r = 0.439，P 〈 0.05）、淋巴细胞（r = 0.417，P 〈 0.05）和嗜酸性粒细胞（r = 0.505，P 〈 0.01）均呈线性正相关。结�
- 莫俊銮张丽君周继昌龚春梅徐远飞杨慧
- 关键词：硒免疫球蛋白E
- 精原干细胞分离、鉴定、培养及其应用进展被引量：2
- 2017年
- 雄性哺乳动物睾丸内持续的精子发生是维持其生殖能力的必备条件。精原干细胞(SSCs)是精子发生的基础,是永久分化成精子的克隆源,它既可以自我更新维持体内干细胞的数量,又可以增殖分化形成各阶段的生精细胞直至成熟精子。现对SSCs分离、鉴定与培养等技术及其应用的进展进行综述,发现两步酶消化、差异贴壁、磁珠分选等方法是体外分离与纯化SSCs的常用方法。特异性标志物的研究一直在推进SSCs的纯化与鉴定,并仍将是SSCs技术的研究重点之一。培养基、血清、生长因子和饲养层在SSCs体外培养中至关重要,但长期培养中血清可引起SSCs分化的问题有待解决。在基础与临床方面的应用中,SSCs体外培养系统为研究精子发生过程、遗传学、雄性辅助生殖和细胞再生治疗等开辟了新的道路。
- 徐远飞侯彬周继昌
- 关键词：精原干细胞
- 深圳市成人25-(OH)VD水平及其与血糖的相关性研究被引量：1
- 2018年
- 目的了解深圳市企事业单位职工25-(OH)维生素D[25-(OH)VD]的营养状况,并分析其与血糖及糖化血红蛋白的相关性。方法选取2013年7~12月在深圳市某体检中心体检的深圳市机关和企事业单位员工作为研究对象,采集空腹外周静脉血,采用酶联免疫法对血浆25-(OH)VD的含量进行检测,并对血糖及糖化血红蛋白进行检测。分析检测指标的异常情况。结果深圳企事业单位人群中25-(OH)VD的平均水平为(60.98±15.92)nmol/L,25-(OH)VD缺乏或不足率为83.37%,且性别之间25-(OH)VD的营养水平及不足与缺乏率差异有统计学意义;血糖及糖化血红蛋白的平均水平分别为(5.45±0.88)mmol/L及(5.69±0.59)%;扣除年龄、性别及BMI的影响,血清25-(OH)VD水平与血糖呈负相关(r=-0.062,P<0.01),与糖化血红蛋白有一定的相关性(r=-0.051,P<0.01)。结论正常人群中25-(OH)VD水平与血糖及糖化血红蛋白有一定的相关性,维持人体正常25-(OH)VD水平可能对预防糖尿病的发生、降低糖尿病的患病率起到一定作用。
- 龚春梅周继昌黄昌华朱玉梅周小英莫俊銮梁雄顺徐远飞刘小立
- 关键词：血糖糖化血红蛋白成人
- 深圳市509例2型糖尿病患者常见口服降糖药物基因多态性分析被引量：1
- 2023年
- 目的:探索深圳市糖尿病患者口服降糖药物相关单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNPs)的分布特征,为糖尿病患者个体化用药指导提供参考。方法:采用外周血DNA抽提/焦磷酸测序检测509例糖尿病患者四大类降糖药物4个药物相关基因位点SNPs。采用SPSS 25.0软件统计相关基因位点的等位基因和基因型的频率分布差异。参照国内外不同人群的基因型频率数据,回顾性分析深圳市2020—2021年社区糖尿病患者的降糖药物相关SNPs的分布特征。结果:PPARG、SLCO1B1的SNPs与国外人群存在较大差异,与国内报道基本相符。CYP2C9*3的SNPs与欧洲人群存在差异,但与中国人群和美洲人群相关报道基本相符。然而有机阳离子转运体OCT2的SNPs与中国南方人群存在一定的差异,但与中国北京、欧洲、美洲相关报道的情况基本相符。结论:深圳市糖尿病患者降糖药物相关SNPs分布有自身特点,临床药师及医生应根据药物相关SNPs提供个体化用药指导建议。药物基因组学的个体化用药在参考PharmGKB等数据库的同时应结合国人的特点,不能完全参考国外人群数据库。
- 徐远飞龚春梅杨慧梁雄顺莫俊銮吴肖冰洪文旭
- 关键词：药物基因组学单核苷酸多态性个体化用药糖尿病
