王冠
- 作品数：3 被引量：10H指数：2
- 供职机构：第三军医大学大坪医院野战外科研究所更多>>
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- 甲酰基肽受体1对BV-2细胞迁移的影响及机制的体外研究被引量：6
- 2016年
- 目的探讨甲酰基肽受体1(formyl peptide receptor 1,FPR1)对BV-2细胞迁移的影响及潜在机制。方法免疫荧光染色检测BV-2细胞FPR1的表达,Transwell小室实验分别检测浓度为1、10、50、100、500 nmol/L的FPR1特异性激动剂(formylmethionyl-leucyl-phenylalanine,f MLP)对细胞迁移的影响,划痕实验及Transwell小室实验验证f MLP促进细胞迁移的作用可以被FPR1特异性阻断剂BocMLF所抑制。Western blot检测激动剂组、阻断剂组和阻断剂+激动剂组BV-2细胞经干预后其FPR1蛋白和磷酸化细胞外信号调节激酶(phospho-extracellular regulate kinase,p-ERK)蛋白表达量的变化。结果经免疫荧光染色结果显示,BV-2细胞表达FPR1,主要位于细胞膜表面。随着f MLP浓度的升高,Transwell迁移实验结果显示BV-2细胞的迁移能力明显增加(P<0.05),呈现出明显的剂量依赖性。100 nmol/L及500 nmol/L激动剂组效果最明显,f MLP促进BV-2细胞迁移的最适浓度为100 nmol/L。划痕及Transwell小室实验结果显示5μmol/L的Boc-MLF可显著阻断上述现象(P<0.05)。f MLP可以上调BV-2细胞中FPR1的表达(P<0.05),并且显著活化胞内ERK信号通路,上调p-ERK蛋白的表达水平(P<0.05),Boc-MLF又可显著抑制上述改变(P<0.05)。结论 BV-2细胞表达FPR1,且FPR1在促进BV-2细胞迁移中具有重要作用。
- 薛鑫陈星星王冠郭乔楠刘明永赵建华
- 关键词：MLP细胞迁移
- Ⅱ型胶原体外促进大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化被引量：3
- 2015年
- 目的探讨Ⅱ型胶原(collagenⅡ)在体外促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向软骨细胞的定向分化作用。方法体外培养BMSCs,分不同collagenⅡ接种浓度组(25、50、100、200μg/m L)和空白对照组,分别作用于BMSCs 7、14、21 d,采用CCK-8法检测各不同浓度组对BMSCs活性的影响;q PCR法和免疫荧光法检测不同浓度组处理BMSCs后,各浓度组与空白对照组相比,collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA及蛋白表达量的差异。结果 1CCK-8检测结果显示各浓度组在7、14、21 d D(450)值差异无统计学意义(P>0.05);2q PCR检测结果显示21 d后,不同浓度组与空白对照组比较,collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA表达量均升高(P<0.05),以100μg/m L组最高(P<0.01);14 d时,各浓度组collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA以100μg/m L组上调最明显(P<0.05),而在7 d时,各组之间三者mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05);3各浓度组21 d时免疫荧光结果显示:在100μg/m LⅡ组collagenⅡ、SOX9及aggrecan mRNA蛋白的表达量较其他各组均明显上调(P<0.05)。结论 collagenⅡ可在体外促进大鼠BMSCs向软骨细胞分化,其中以100μg/m L组促进作用最为明显。
- 王冠陈星星薛鑫郭乔楠刘鹏范伟力刘明永赵建华
- 关键词：骨髓间充质干细胞软骨细胞
- Sox2在NT-3促进大鼠神经干细胞分化中的作用被引量：1
- 2015年
- 目的探讨Sox2在神经营养因子3（neurotrophin-3,NT-3）促进原代大鼠神经干细胞（neural stem cells,NSCs）分化中的作用及其机制。方法选取孕14-15 d SD胎鼠,培养原代脑源性NSCs。观察NT-3对NSCs中Sox2表达及NSCs分化的影响：采用不同浓度NT-3（25、50、100 ng/m L）刺激NSCs24 h后,检测Sox2、DCX、Olig2、GFAP蛋白的表达量。探索NT-3对Sox2产生影响的机制：使用PI3K/AKT通路阻断剂（10μmol/L LY294002）选择性阻断NT-3的作用后,检测AKT、p-AKT和Sox2在蛋白水平表达量的变化。结果随着NT-3浓度的升高,NSCs中Sox2蛋白水平的表达明显上调（P〈0.05）,各NT-3处理组的NSCs向神经元前体细胞分化的比例明显增加（P〈0.05）,100 ng/m L NT-3组效果最强,呈现出明显的剂量依赖性;与对照组相比,100 ng/m L NT-3组的p-AKT及Sox2蛋白水平显著上调（P〈0.05）,且LY294002可阻断此作用（P〈0.05）。结论 NT-3能够上调NSCs中Sox2的表达,后者进而诱导NSCs向神经元方向分化,其可能是通过激活PI3K/AKT信号通路起作用。
- 陈星星王冠刘明永薛鑫郭乔楠赵建华
- 关键词：NT-3SOX2神经干细胞分化PI3K/AKT信号通路
