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CCK-8法检测重组人白细胞介素-2的活性被引量：2: 2011年; 目的:建立快速、简便、稳定的检测白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)活性的方法。方法:利用CCK-8(cell counting kit-8)试剂盒,检测3个生产厂家的IL-2对CTLL-2细胞株增殖的影响。结果:IL-2浓度在2～2 000 U/ml范围内,IL-2浓度与细胞增殖成正比,3个厂家的IL-2活性存在差异。结论:CCK-8法简便易行,结果可靠,重复性好,可用于IL-2活性的检测。; 马静路琛左丽胡平生赵星; 关键词：白细胞介素2 CCK-8 生物技术

细胞培养基底刚度对人原代脐静脉内皮细胞增殖率及经登革病毒感染后释放 NO、ET-1的影响被引量：3: 2015年; 目的：探讨细胞培养基底刚度在登革病毒（ Dengue virus，DENV）感染人原代脐静脉内皮细胞（ HUVEC）中的影响。方法利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺制备模拟正常人血管内皮细胞基底刚度的水凝胶[（0±4）kPa]，MTS法检测细胞的增殖，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡，常规方法鉴定增殖登革病毒2型（DENV-2），DENV-2（MOI＝10）感染人原代脐静脉内皮细胞，MTS法比较种植在传统塑料基底与水凝胶上的HUVEC被DENV-2感染后对细胞增殖率的影响，并通过硝酸还原酶法检测两组细胞释放一氧化氮（NO）的水平以及双抗体夹心ELISA法检测内皮素-1（ET-1）的表达。结果自重弯曲法测得2％双丙烯酰胺和40％丙烯酰胺配比水凝胶的弹性模量为（3030±0．44） Pa；血管内皮细胞经登革病毒感染后其细胞增殖率与培养基底刚度呈正相关；两组不同刚度基底培养的细胞生长周期和细胞凋亡率无明显差异，但可引起NO和ET-1水平的变化。结论实验结果证实基底刚度可影响人原代HUVEC的增殖效率及释放的NO与ET-1浓度的变化，血管内皮受损后，其分泌合成的血管活性物质减少，参与了登革热的致病发生。同时水凝胶模型的建立为研究DENV感染的体外模型提供一定的新思路。; 余芳芳崔丽丽裴华马静左丽; 关键词：登革病毒

水凝胶上培养的原代人脐静脉内皮细胞感染登革病毒Ⅱ型对细胞产生IL-29的表达影响被引量：2: 2015年; 目的：利用水凝胶（hydrogel）模拟人血管内皮细胞基底膜弹性硬度，以登革病毒2型（DENV-2）NGC株感染接种于水凝胶为基底的原代人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells，HUVECs），观察HUVECs在不同弹性硬度材质上培养产生IL-29的情况。方法分离培养原代HUVECs，将细胞接种于水凝胶，以MOI（multiplicity of infection）＝10的DENV-2感染原代HUVECs，流式细胞术检测48 h细胞凋亡率及病毒感染率，并送检mRNA基因表达谱芯片，通过实时荧光定量PCR及双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达情况。结果 DENV-2感染原代HUVECs 48h，培养于水凝胶上的细胞的病毒感染率较低，细胞凋亡率与未感染组比较，差异无统计学意义（P＞0．05），基因芯片检测发现IL-29的产生与普通塑料培养瓶接种的脐静脉内皮细胞受到DENV-2感染后存在差异，实时荧光定量PCR和双抗体夹心ELISA法检测IL-29的表达，差异均存在统计学意义（P＜0．05）。结论水凝胶模拟人血管内皮细胞基底膜硬度，用DENV-2感染接种于水凝胶上脐静脉内皮细胞，基因芯片检测发现IL-29的产生，与体外正常培养条件下受到DENV-2感染后存在差异，水凝胶的建立可能为DENV发病机制的研究提供一个新的模型。; 崔丽丽余芳芳马静裴华左丽; 关键词：登革病毒 IL-29 水凝胶

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马静

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