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林放: 作品数：13 被引量：34H指数：5; 供职机构：广州军区广州总医院更多>>; 发文基金：广州市科技计划项目国家科技重大专项广东省科技计划工业攻关项目更多>>; 相关领域：医药卫生更多>>

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冻干血小板保护液优化的实验研究被引量：5: 2018年; 目的优化冻干血小板保护液,减少冻干过程对血小板的损害,有效保护其功能。方法采用3因素3水平的正交设计法,对血小板膜保护剂、血小板激活抑制剂、蛋白质类保护剂的3类成分组成的保护液进行优选。检测血小板最大聚集率、血小板活化标志PAC-1、CD62P的阳性表达率和血小板回收率,通过比较其差异,筛选出本实验的最优冻干血小板保护液。以优化保护液对血小板处理后进行冻干,并以此为实验组,与新鲜血小板和原保护液处理后冻干血小板进行比较验证,验证指标与优选指标相同,比较3者4项指标之间的差异。结果正交设计试验结果显示：血小板最大聚集率组间最高（74.33±24.01）%,血小板活化标志PAC-1和CD62P低于9组平均水平,血小板回收率高于9组平均水平。以主要体现血小板功能的血小板最大聚集率为优先指标,结合其余3项检测指标进行综合分析,在原保护液的基础上,筛选出添加了2%DMSO、第2信使调节剂、2 mmol/L维生素B6,75%的PPP保护液组为最优组合。验证实验结果显示,优化保护液组血小板最大聚集率（76.12±6.02）%,与原保护液组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）,与新鲜血小板组相比,差异没有统计学意义（P〉0.05）。最优保护液组血小板激活标志PAC-1和CD62P阳性表达率分别为（3.23±0.49）%和（36.83±8.21）%,2者与原保护液组、新鲜血小板组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）;最优保护液组冻干血小板复水化后血小板回收率为（85.90±2.24）%,与原保护液组相比,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论本实验优化的血小板保护液优于原保护液,明显提高了冻干血小板复水化后最大聚集率,能更好地保护血小板的功能,但对血小板冻干过程的保存损害问题没有得到更好的改善,有待下一步深入研究。; 魏淑贞施琳颖周谋林放吴红宜李蕾李荣娟单桂秋; 关键词：正交设计法血小板最大聚集率

一种负载生长因子的明胶缓释微球及其制备方法: 本发明一种负载生长因子的明胶缓释微球及其制备方法，其以血小板复合生长因子为包裹对象，以明胶微球为载体，浸润膨胀后冷冻干燥制备所得。本发明制备的负载生长因子的明胶缓释微球能有效的应用复合生长因子，能在局部达到缓慢释放且作用...; 单桂秋林放施琳颖周谋王玲; 文献传递

输血科开展富血小板血浆治疗的可行性探讨——附176例PRP应用的疗效分析被引量：12: 2018年; 目的探讨输血科在当前输血医学的发展新形势下开展富血小板血浆（PRP）治疗的可行性。方法总结分析2014年1月—2017年1月本科独立完成或与临床科室配合完成的来自门诊或住院的176名接受PRP治疗患者的情况,以证明PRP治疗的有效性和安全性,结合实践重点阐释输血科开展PRP治疗的可行性、必要性和紧迫性。176例自愿接受PRP治疗的病案资料包括糖尿病慢性难愈合皮肤溃疡创面67例、整形美容配合治疗100例、膝关节损伤16例。血液采集、PRP、血小板凝胶（PG）或PG上清液的制备和质量控制均由输血科完成,糖尿病慢性难愈合皮肤溃疡创面和膝关节损伤的PRP治疗由输血科医师独立完成,整形美容配点阵激光/水光针联合PRP/PG上清治疗由输血科医师配合整形美容科医师完成。结果糖尿病慢性难愈合皮肤溃疡患者接受异体PRP治疗12周后的痊愈率36%（24/60）、显效率18%（12/60）、好转率26.67%（16/60）、无效率13.33%（8/60）;美容整形科接受自体点阵激光/水光针联合PRP/PG上清液治疗后,总痊愈率99%（99/100）中痊愈60例、显效30例、有效9例、无效1例;运动损伤患者在接受自体PRP治疗后,痊愈率0、显效率25%（4/16）、有效率75%（12/16）、无效率0,总有效率100%。结论输血科有能力独立完成或配合临床科室开展PRP治疗。; 周谋林放施琳颖李艳辉单桂秋; 关键词：血小板凝胶整形美容

冻干血小板在促SD大鼠急性创面愈合中的实验研究被引量：5: 2018年; 目的建立SD大鼠急性创伤模型,探讨冻干人血小板（Freezing-dried Platelets,FDP）对SD大鼠急性创伤的促愈合作用。方法 SD大鼠60只,在每只大鼠背部脊柱两侧各剪下2个直径为1.2 cm的圆形全层皮肤。将每只大鼠背部4个创面分配到4个组：FDP组、新鲜血小板（platelet rich plasma,PRP）组、重组型人表皮生长因子（Recombinant human epidermal growth factor,rh EGF）组和空白对照组（blank control,BC）。分别于造模后即刻给予FDP（0.85 m L/cm2）、PRP（0.85 m L/cm2）、rh EGF（0.5 m L/cm2）和凡士林纱布进行治疗,每间隔两天清洗伤口后更换敷料。于d5、d7、d10、d14肉眼观察、拍照,并记录创面愈合情况,计算创面愈合率,取各时间点创缘新生皮肤组织进行HE染色、Masson三色染色和CD34免疫组化三项病理学实验,并进行相关统计分析。结果肉眼观察各组大鼠创面均随治疗时间延长而趋于缩小,4个重点观测点得出的综合创面愈合率排序为PRP〉FDP〉rh EGF〉BC组。治疗d5的创伤愈合率相近,没有显著差异;d7,PRP组、FDP和rh EGF组的愈合率均高于BC组,差异有统计学意义（P〈0.05）,前三组组间差异没有统计学意义（P〉0.05）;d10时,前3组的愈合率均高于BC组,差异有统计学意义（P〈0.05）;组间比较,PRP组创面愈合率高于FDP和rh EGF组（P〈0.05）。d14,组间的创面愈合率没有明显差异。3种组织细胞学观察炎性细胞浸润、胶原纤维生成、血管生成增生和再上皮化等病理结果显示：FDP与PRP同样能缩短创伤愈合炎症期、促进胶原纤维的生成、加快血管生成、促进肉芽组织生长,从而促进急性创伤组织的修复作用。结论 FDP具有与新鲜血小板相近的促进SD大鼠急性创面愈合的作用,并具有优于单一生长因子（rh EGF）的促愈合效果。; 唐艳姣周谋施琳颖魏淑贞林放李文丹丁慧慧许育兵单桂秋; 关键词：新鲜血小板 SD大鼠创伤愈合

血小板冻干过程对其生长因子释放量和促HUVECs增殖作用影响的实验研究被引量：3: 2018年; 目的探讨血小板冻干过程对其释放PDGF-BB、TGF-β1、VEGF、EGF、IGF-I和FGF-b 6种生长因子及其促HUVECs增殖作用的影响。方法采用ELISA法检测冻干前新鲜PRP激活上清液和FDP激活上清液中6种生长因子的含量。用含不同浓度的FDP激活上清液、新鲜PRP激活上清液和FBS的培养基分别培养HUVECs,CCK8法检测HUVECs增殖的状态。结果 FDP上清液中TGF-β1、VEGF、EGF、IGF-I和FGF-b含量均高于新鲜PRP激活上清液,差异均有统计学意义（P〈0.05）;而PDGF-BB含量略低于新鲜PRP激活上清液,差异无统计学意义（P〉0.05）。FDP激活上清液、PRP激活上清液和FBS均可促进HUVECs的增殖;随着FDP和PRP激活上清液浓度的增高,细胞增殖作用反而降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;在5%的浓度条件下,培养48 h,FDP激活上清液促进HUVECs增殖作用高于PRP激活上清液和FBS,差异有统计学意义（P〈0.05）;培养24 h和72 h,FDP激活上清液、PRP激活上清液和FBS促进HUVECs增殖作用无统计学差异（P〉0.05）。结论 FDP具有优于新鲜PRP释放生长因子的能力;FDP激活上清液促HUVECs增殖作用优于PRP激活上清液,与FBS具有可比性。; 周谋唐艳姣施琳颖魏淑贞林放李文丹单桂秋; 关键词：PRP 细胞增殖

一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法: 本发明公开了一种富含生长因子的壳聚糖可溶性纱布的制备方法，包括如下步骤：S1、按照重量比例称取辅料配置血小板预处理液；S2、制备血小板冻干缓冲液；S3、制备预处理的富血小板血浆；S4、配置羧甲基壳聚糖溶液；S5、制备富含...; 单桂秋林放施琳颖周谋; 文献传递

血小板拓展应用研究的认识与思考被引量：7: 2016年; 传统上血小板制品的临床应用是通过静脉输注治疗血小板减少或血小板功能障碍,参与生理性止血、促进凝血并维持毛细血管的完整性等。20世纪70年代,国外学者开创性地将富血小板血浆（platelet rich plasma,PRP）用于创伤修复治疗,随之PRP拓展应用的基础研究、动物实验和临床尝试相继展开,学者和商家竞相开发研制的相应专用设备也逐步应用于整形外科、心脏外科、颌面外科、骨外科、烧伤、眼科和急慢性创面组织的修复重建等领域。; 单桂秋林放张爽唐艳姣; 关键词：血小板富血小板血浆冻干

冻干血小板用于动物创面治疗的初步安全性评价被引量：3: 2016年; 目的对冻干血小板FDP用于动物创面愈合的治疗做初步安全性评价。方法 FDP单次皮肤刺激试验选择10只SD大鼠,采用自身对照,背部左侧皮肤为实验组:用棉签涂抹0.6 m L复水化FDP;右侧为空白对照组:涂抹0.6 m L生理盐水;于涂抹后1、24、48及72 h观察2组大鼠涂敷区皮肤是否出现红斑、水肿等刺激反应。重复给药毒性试验选择32只新西兰白兔建立皮损模型,随机均分为实验组与空白对照组,前者每天涂抹复水化FDP 0.6 m L/次,后者每天涂抹生理盐水0.6 m L/次,连续涂抹28 d,观察1次/d,测体重1次/周,于涂敷前及涂敷d7、d14、d21、d28分别采集动物血样检测血常规和相关生化指标,并取涂敷区皮肤组织行组织病理学检查。结果单次皮肤刺激试验:2组大鼠皮肤均未出现水肿、红斑等刺激反应。重复给药毒性试验:试验周期中2组动物均未出现体重减轻、一般行为异常及死亡,体重、血常规及生化指标检测结果相近(P>0.05),FDP组动物在实验d7 d14、d21及d28的WBC(×109/L)分别为12.20±1.28 vs 8.63±1.71 vs 6.90±1.21 vs 7.60±1.36(P<0.05);2组动物组内不同时间点的Cr波动明显(P<0.01)。组织病理学检查:2组受试动物涂敷区局部皮肤未见明显组织病理学改变。结论FDP对实验动物没有明显的刺激反应,对动物局部损伤皮肤连续涂敷28 d未见明显毒性反应,其作为外敷生物制剂的初步安全性评价合格。; 唐艳姣单桂秋马静吕品周谋林放张爽; 关键词：创面治疗安全性评价动物实验皮肤刺激毒性试验

一种血小板病毒灭活装置: 本实用新型公开了一种血小板病毒灭活装置，包括可防止血袋的支撑网和分别位于支撑网上方和下方的上灭活紫外灯和下灭活紫外灯，上灭活紫外灯和下灭活紫外灯与支撑网的间距可调，上灭活紫外灯和下灭活紫外灯均包括灯盒、装在灯盒内的若干紫...; 单桂秋丘金浪林放马静吕品; 文献传递

短波紫外线灭活血小板中病毒的实验研究被引量：2: 2016年; 目的建立短波紫外线(UVC)对血小板悬液中伪狂犬病毒和辛德毕斯病毒灭活的实验方法,探讨UVC法对血小板计数的影响。方法以伪狂犬病毒和辛德毕斯病毒为试验病毒,Vero细胞为培养细胞,用病毒感染细胞,制备病毒增殖液;用SSP+盐溶液替代血浆重悬血小板;含不同浓度核黄素的血小板SSP+悬液分别以不同辐照剂量的UVC照射,通过细胞感染试验评价灭活效果,筛选最佳灭活条件。用血液细胞分析仪测定UVC处理前后血小板的计数。结果短波紫外线对血小板病毒灭活作用显著,单面辐照强度为4.32 mw/cm2,照射30 s能使血小板SSP+悬液中伪狂犬病毒和辛德毕斯病毒滴度均下降超过4个对数级;照射1 min,伪狂犬病毒全部灭活(下降5.38个对数级),辛德毕斯病毒全部灭活(下降4.59个对数级),UVC处理后血小板计数明显下降,P<0.05;UVC联合核黄素,在相同的照射时间下,添加核黄素组与单独使用UVC组对病毒滴度降低不明显,差异无统计学意义。在辐照剂量相同的条件下,添加核黄素组血小板计数降低较无核黄素组降低缓慢,两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 UVC法可有效灭活血小板中伪狂犬病毒和辛德毕斯病毒;SSP+盐溶液替代血浆重悬血小板进行UVC照射,能大大缩短病毒灭活时间,提升灭活效果;UVC联合添加核黄素对病毒灭活没有明显的协同作用,但提示对血小板有一定的保护作用。; 张爽单桂秋马静吕品周谋林放; 关键词：病毒灭活血小板短波紫外线伪狂犬病毒辛德毕斯病毒

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