刘正美
- 作品数：7 被引量：25H指数：4
- 供职机构：贵州医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去甲斑蝥素对环磷酰胺诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血功能的影响被引量：10
- 2015年
- 目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血的影响及机制。方法:采用CTX腹腔注射法复制白细胞减少症模型,以NCTD干预模型大鼠,全自动血细胞分析仪检测外周血白细胞(WBC)数量,骨髓组织作切片HE染色观察病理改变,流式细胞术检测骨髓细胞增殖周期、凋亡率,免疫组织化学法检测骨髓组织中凋亡相关蛋白BCL-2、BAX的表达。结果:NCTD干预白细胞减少症模型后,外周血WBC显著升高;模型大鼠骨髓骨髓组织结构破坏,造血细胞明显减少,NCTD干预后促进骨髓组织细胞结构显著恢复;NCTD可促使白细胞减少症模型大鼠骨髓细胞增殖及周期的转化,显著抑制CTX所诱导的骨髓细胞凋亡与坏死,上调抑凋亡蛋白BCL-2表达,下调促凋亡蛋白BAX的表达。结论:NCTD可刺激CTX诱导的白细胞减少症模型大鼠骨髓造血,促进外周血白细胞水平的恢复,其机制可能与NCTD调控骨髓细胞周期、抑制细胞凋亡等有关。
- 郑丹沙启明王剑青刘正美万秀方王国川张亚莉杨国珍
- 关键词：去甲斑蝥素环磷酰胺白细胞减少症造血
- 幽门螺杆菌临床株cagA基因克隆及序列分析被引量：4
- 2015年
- 目的分离鉴定临床分离株幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp），分析其CagA蛋白的磷酸化基序EPIYA，探讨东亚株HpCagA序列的结构特点。方法选取胃相关疾病患者的胃黏膜组织，剪碎后接种于哥伦比亚血琼脂平板，微需氧培养，菌落生长后通过尿素酶试验、革兰染色及显微镜检查对Hp进行初步鉴定。提取菌落基因组，PCR扩增HP16SrRNA基因并进行测序鉴定；扩增cagA基因全长序列，连接入pMD18-T载体。将重组质粒转入感受态E．coliDH5a，测序鉴定重组质粒，利用DNAStar和MEGA6软件对cagA序列进行比对及聚类分析。结果成功分离Hp共26株。构建pMD18-T／cagA克隆载体后对26株Hp的cagA基因全长测序，序列比对分析显示有6株为西方型，20株为东亚型。东亚型CagA第815～834位点存在13个氨基酸的缺失、部分缺失或变异，西方型中有3株丢失磷酸化位点EPIYA-C；聚类分析显示Hp分离株分别聚类为东亚群、西方型东亚群以及西方群3群。结论Hp分离株以东亚株为主，但也存在西方株感染；东、西方型CagA在EPIYA基序及侧翼序列显著差异，菌株之间存在聚类关系。
- 熊林陈峥宏刘正美龙妮娅谢渊赵艳官志忠周建奖
- 关键词：幽门螺杆菌CAGA蛋白聚类分析
- 幽门螺杆菌对NLRP3炎症小体的活化作用被引量：1
- 2016年
- 目的研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染对NLRP3炎症小体相关蛋白的活化作用,探讨NLRP3炎症小体在H.pylori感染中的作用。方法培养H.pylori国际标准株NCTC11639,感染胃黏膜上皮细胞株GES-1和胃癌细胞株MKN-45,细菌数∶细胞数(感染复数)为100∶1和200∶1,于6 h和12 h收集细胞,提取总蛋白。Western blotting检测炎症小体中NLRP3及Caspase-1蛋白的表达水平,ELISA法检测细胞中IL-1β的含量。结果 H.pylori感染GES-1细胞后,NLRP3、Caspase-1以及IL-1β的表达随着感染复数的增加而增加,差异均具有统计学意义(P<0.05);感染MKN-45细胞后,NLRP3的蛋白表达随着感染复数的增加而增加,而Caspase-1及IL-1β的表达随着感染复数的增加而降低,差异均有统计学意义(P<0.05);相同感染复数的H.pylori感染GES-1细胞和MKN-45细胞,6 h和12 h之间NLRP3、Caspase-1以及IL-1β的表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 H.pylori感染在体外能活化GES-1细胞中NLRP3炎症小体相关蛋白NLRP3和Caspase-1,活化MKN-45细胞中NLRP3蛋白的表达,抑制Caspase-1蛋白的表达;促进上皮细胞GES-1中IL-1β炎症因子的表达,抑制肿瘤细胞MKN-45中IL-1β炎症因子的表达。
- 刘正美姜琼周建奖官志忠赵艳熊林谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌NLRP3CASPASE-1IL-1Β
- 幽门螺杆菌对NLRP3炎症小体活化的作用
- 目的：研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, H.pylori）对NLRP3炎症小体信号通路的活化作用，并初步探讨H.pylori活化NLRP3炎症小体的机制，阐明NLRP3炎症小体是否参与了H.pyl...
- 刘正美
- 关键词：幽门螺杆菌信号通路炎症反应活化作用胃黏膜上皮细胞
- 幽门螺杆菌临床菌株的分离培养和鉴定被引量：4
- 2016年
- 目的：建立一种幽门螺杆菌（H.pylori）临床菌株的分离培养的方法。方法：取临床胃黏膜组织标本88株,接种于10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上,37℃、5%O2、10%CO2、85%N2培养3-5 d后,挑取血平板上透明细小可疑菌落进行革兰氏染色和尿素酶试验,对阳性菌落进行扩大纯培养,提取细菌DNA,PCR扩增H.pylori 16sRNA、Cag A基因,电泳并进行测序鉴定。结果：成功从临床胃黏膜组织中分离培养出H.pylori,88例胃黏膜组织标本中分离培养并鉴定出H.pylori 19株,阳性率为22%;对16sRNA及Cag A基因进行扩增,电泳可见目的条带,并对16sRNA扩增产物测序,与H.pylori国际标准菌株26695比对,同源性为95%-99%。结论：37℃、5%O2、10%CO2、85%N2条件下10%绵羊全血的哥伦比亚选择性培养基上能成功分离培养出H.pylori临床株。
- 刘正美周建奖赵艳熊林龙妮娅谢渊
- 关键词：幽门螺杆菌临床菌株革兰染色CAGA基因
- 胃泌素及胃泌素受体基因在胃癌和癌前病变组织中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的:观察胃泌素(GAS)及胃泌素受体(CCK-BR)基因在胃癌和癌前病变组织中的表达,探讨GAS及CCK-BR与胃癌发生发展的关系。方法:收集行胃镜检查病人胃组织,根据病理学诊断分为慢性萎缩性胃炎组、肠上皮化生组、非典型性增生组及胃癌组,提取并纯化各组胃组织的总RNA,采用Taqman实时荧光定量PCR技术测定胃组织GAS及CCK-BR的表达,比较各类胃疾病胃组织中GAS和CCK-BR表达水平的差异。结果:GAS及其受体CCK-BR在所有患者胃组织中均有表达,在慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、非典型性增生患者胃组织中GAS和CCK-BR的表达均高于胃癌患者(P<0.05),GAS为胃癌组患者的2.37、1.67及1.9倍,CCK-BR为胃癌组患者的1.62、3.66、1.33倍。结论:GAS和CCK-BR在胃癌组织中的表达低于癌前组织。
- 谢渊赵艳刘正美官志忠周建奖
- 关键词：胃泌素胃泌素受体
- 去甲斑蝥素对低白细胞模型大鼠骨髓GM-CSF表达的影响被引量：4
- 2015年
- 目的:探讨去甲斑蝥素(NCTD)对环磷酰胺(CTX)诱导的低白细胞模型大鼠骨髓粒-单集落刺激因子(GM-CSF)表达的影响。方法:将90只SD大鼠随机分为模型对照组、空白对照组、NCTD高剂量组、NCTD低剂量组和升白药物对照组;采用腹腔注射CTX(30mg/㎏)方法复制低白细胞大鼠模型后,各药物对照组及空白对照组分别以一定浓度药物、双蒸水灌胃,并于灌胃后第3、6、9天采集外周血及骨髓组织样本进行以下指标检测:(1)全自动血细胞分析仪检测外周血WBC数量;(2)酶联免疫双抗夹心法(ELISA)检测外周血GM-CSF含量;(3)采用免疫组化(IHC)方法检测骨髓组织细胞中GM-CSF的表达。结果:(1)与空白对照组比较,CTX处理后各实验组大鼠白细胞数量显著降低(P<0.05);(2)在CTX诱导的低白细胞模型大鼠中,NCTD高、低剂量组和升白药物对照组外周血WBC显著升高(P<0.05),且GM-CSF在骨髓组织细胞中的表达显著增高(P<0.05),其在外周血中的含量也有增加趋势。结论:NCTD可以显著升高CTX处理后SD大鼠外周血白细胞数量,其机制可能与NCTD上调GM-CSF的表达有关。
- 王国川沙启明王剑青刘正美万秀芳郑丹张亚莉
- 关键词：去甲斑蝥素白细胞减少症
