陈俊峰
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- L-鸟氨酸脱羧酶抑制剂筛选模型的建立
- 2014年
- 目的基于酶促反应法,利用HPLC测定腐胺含量,评价待筛选药物对PC-3M细胞中L-鸟氨酸脱羧酶(L-ODC)活性的影响,建立鸟氨酸脱羧酶抑制剂的筛选模型。方法将与药物反应后的细胞处理样本,以TSKge lODS-80TM凝胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)为分析柱,在甲醇-水(8∶2)保持3 min,从4 min到14 min,甲醇比率由80%梯度增至100%梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,激发波长为340 nm,发射波长为515 nm,柱温为50℃,进样量10μl。按内标法定量。结果 ODC特异性抑制剂二氟甲基鸟氨酸(DFMO)对ODC活性的抑制率为(59.3±5.4)%,雷帕霉素对ODC活性的抑制率为(29.8±6.4)%,姜黄素对ODC活性的抑制率为(26.1±6.6)%。结论本模型通过测定药物对ODC细胞内鸟氨酸脱羧酶的作用,利用HPLC分离法测定在药物抑制影响下的鸟氨酸脱羧酶的活性,这一模型有望成为筛选ODC抑制剂的快速方便准确的检测方法。
- 郝秀菊刘志辉栾文姬王锋苏丽娜陈俊峰
- L-鸟氨酸脱羧酶抑制剂的筛选模型的建立
- 郝秀菊王锋栾文姬刘志辉苏丽娜陈俊峰
- 课题研究通过对Moeller氏脱羧酶试验培养基的改良，初筛和复筛的筛选方法对从土壤和活性污泥样品中分离得到的236株细菌进行有效初筛及复筛试验后,筛选得到4株高酶活的菌株。筛选出的菌株pH差值大小与其产酶能力成线性相关性...
- 关键词：
- 关键词：反应动力学抗肿瘤药物
