李琳
- 作品数：4 被引量：43H指数：4
- 供职机构：中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金沈阳市科技计划项目沈阳市科学技术计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乌索酸增强自噬改善高糖诱导的足细胞损伤被引量：4
- 2015年
- 目的探讨乌索酸是否通过改善高糖状态下的足细胞白噬抑制，发挥其肾脏保护作用。方法体外高糖培养小鼠条件永恒足细胞株，加入P13K抑制剂LY294002及乌索酸进行干预。RT．qPCR法检测细胞内微小RNA一21（miR．21）和磷酸酶基因（PTEN）的mRNA表达。Western印迹法检测磷脂酰肌醇-3激酶（P13K）／蛋白激酶B（Akt）／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路相关蛋白，白噬相关蛋白及足细胞标志蛋白的表达变化。采用荧光显微镜观察足细胞标志蛋白、内源性微管相关蛋白LC3的表达变化。透射电镜下观察足细胞内白噬体的形成。结果与对照组相比，高糖组足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclinl的表达降低，泛素结合蛋白p62（p62／SQSTMl）表达增高；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低；同时伴miR-21表达上调，PTEN的mRNA和蛋白表达均下调，p85-P13K、磷酸化（P）-Akt、p-mTOR表达增加（均P〈0．01）。加入LY294002及乌索酸干预后，p85-P13K、磷酸化（P）-Akt、p-mTOR表达减少；足细胞自噬相关蛋白LC3II、Beclin1的表达增加，p62／SQSTM1表达降低；足细胞标志蛋白synaptopodin、podocin及nephrin表达降低（均P〈0．01），但LY294002对足细胞内miR-21和PTEN的表达无影响。乌索酸可抑制细胞内miR-21的过表达，上调PTEN表达（均P〈0．05）。结论高糖可抑制足细胞自噬，促进足细胞损伤。乌索酸干预可减轻高糖刺激下的足细胞自噬抑制，缓解足细胞损伤，其保护机制可能是通过抑制足细胞内miR-21过表达，上调PTEN表达，抑制P13K／Akt—mTOR信号通路的异常活化实现的。
- 徐莉范秋灵汪旭李琳卢新星岳媛曹旭刘佳赵雪王力宁
- 关键词：高血糖症足细胞自噬乌索酸MIR-21磷酸酶基因
- 熊果酸通过调节Wnt／β-catenin通路抑制高糖诱导的足细胞上皮间充质转分化被引量：4
- 2016年
- 目的观察高糖诱导足细胞Wnt／β-catenin通路活化及足细胞形态改变，探讨熊果酸保护足细胞损伤的可能机制。方法体外培养足细胞并分为4组：正常糖组（葡萄糖5．5mmol／L）、甘露醇组（葡萄糖5．5mmol／L＋甘露醇19．5mmol／L）、高糖组（葡萄糖25mmol／L）和熊果酸组（葡萄糖25mmol／L＋熊果酸5μmol／L）。倒置相差显微镜检测足细胞形态转化；免疫荧光检测足细胞紧密连结蛋白1（ZO-1）、a平滑肌肌动蛋白（a-SMA）的表达；Western印迹法检测足细胞B连环蛋白（B-catenin）、糖原合成酶激酶3p（GSK3β）的表达；实时定量PCR法检测足细胞Wntl、Wnt3a、Wnt5a、Wnt5b和B-cateninmRNA的表达。结果正常糖组足细胞呈不规则的树枝状，高糖培养下足细胞向鹅卵石、细长状态的间充质细胞形态转化。高糖诱导足细胞后ZO．1蛋白表达下调，a-SMA表达增加，Wnt5a mRNA表达下调，B-cateninmRNA及蛋白表达上调，GSK313蛋白表达下调（均P〈0．05）。相对于高糖组，熊果酸组足细胞发生上皮细胞间充质转化的比例减少，ZO-1蛋白表达增加，a-SMA蛋白表达下降，Wnt5amRNA表达上调，B-cateninmRNA及蛋白表达下调，GSK3β蛋白表达上调（均P〈0．05）。结论熊果酸通过调节Wnt／β-catenin信号通路抑制高糖诱导的足细胞上皮间充质转分化，减轻足细胞损伤。
- 李琳徐莉范秋灵汪旭张艳宁王力宁
- 关键词：足细胞熊果酸细胞转分化
- 乌索酸改善高糖诱导系膜细胞损伤的机制被引量：30
- 2015年
- 目的 探讨乌索酸能否通过抑制高糖状态下系膜细胞内miRNA-21的过表达,上调其靶基因PTEN的表达,抑制磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）-Akt-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路的激活,诱导自噬,减少细胞外基质堆积,发挥其肾脏保护作用.方法 高糖培养大鼠肾小球系膜细胞,以PI3K抑制剂LY294002以及不同剂量乌索酸进行干预,应用甲基噻唑基四唑（MTT）法观察细胞增殖能力,总蛋白/总细胞数测定细胞肥大,Western印迹和实时定量PCR检测PTEN-PI3K-Akt-mTOR信号通路活性、Ⅰ型胶原及自噬标志物.透射电镜观察自噬体的形成.结果 与正常对照组相比,高糖培养的系膜细胞出现显著的肥大、增殖,细胞内miRNA-21表达明显上调,PTEN蛋白及mRNA的表达明显下调,p85PI3K、磷酸化（p）-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62/SQSTMI表达明显增加,LC3 II表达明显降低,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）.与高糖组相比,乌索酸干预组及LY294002组细胞肥大、增殖程度均明显降低,p85PI3K、p-Akt、p-mTOR、Ⅰ型胶原、p62/SQSTMI的表达均明显降低,LC3 II表达明显升高,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）;但LY294002组细胞内miRNA-21和PTEN的表达与高糖组差异无统计学意义,而乌索酸干预组细胞内miRNA-21的表达明显下调,PTEN的表达明显上调,差异均有统计学意义（均P＜ 0.01）.结论 乌索酸可能通过抑制高糖培养系膜细胞内miRNA-21的过表达,上调PTEN表达,抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路异常活化,增强自噬从而减少细胞外基质堆积,减轻细胞的肥大、增殖.
- 卢新星范秋灵徐莉李琳徐艳艳张东成王力宁
- 关键词：糖尿病肾病自噬系膜细胞乌索酸MIRNA-21MIRNA-21
- 乌索酸通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路改善高糖诱导的系膜细胞损伤被引量：6
- 2015年
- 目的:探讨乌索酸(ursolic acid,UA)对高糖所致人肾小球系膜细胞(RMC)损伤的保护作用,明确是否通过抑制PI3K/AKT/m TOR信号通路的活化,抑制细胞增殖及活性氧簇等活动。方法:将体外培养人系膜细胞分为正常葡萄糖组(NG)、高糖组(HG)、甘露醇高渗对照组(MA)及HG+不同剂量(0.5、1.0、2.0μmol/L)乌索酸干预组(UA),采用MTT法及DCFH-DA流式细胞仪分别检测系膜细胞增殖及活性氧簇产生;Westen-blot检测系膜细胞PI3K/AKT/m TOR信号通路活性及TGF-β1、FN表达;RT-PCR法检测TGF-β1、FN mRNA表达。结果:高糖刺激人肾小球系膜细胞48 h后,系膜细胞异常增殖,UA呈剂量依赖性抑制高糖诱导的系膜细胞增殖。UA抑制系膜细胞ROS的产生及氧化应激反应,减轻系膜细胞损伤。UA抑制高糖诱导的系膜细胞AKT、m TOR磷酸化水平及系膜细胞TGF-β1、FN蛋白及mRNA的表达(P<0.05 vs.HG)。结论:乌索酸通过抑制高糖介导的PI3K/AKT/m TOR信号通路活化,抑制系膜细胞增殖及ROS的产生,减轻系膜细胞损伤。
- 岳媛岳媛范秋灵都姝妍远方徐莉李琳刘楠姜奕
- 关键词：人肾小球系膜细胞乌索酸
