李帅
- 作品数：13 被引量：32H指数：5
- 供职机构：天津医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生交通运输工程机械工程更多>>
- 额下回后部的汉语语言神经通路-拓扑学机制探讨被引量：1
- 2016年
- 目的探讨额下回后部的汉语语言神经通路-拓扑学机制，为语言功能区手术中个体化保护语言功能提供依据。方法对2015年1—7月来自天津医科大学研究生院的20名健康受试者，应用导航引导的重复经颅磁刺激（nTMS），定位受试者的关键语言功能脑区，进一步应用DTI技术重建额下回后部的皮质下纤维，分析关键语言皮质同皮质下纤维的关系。结果（1）共18名受试者在额下回后部存在能够稳定诱发出言语错误的位点。关键语言位点总数为39个，腹侧中央前回、额叶岛盖部、额叶三角部分别占46％、41％及13％。（2）语言相关纤维的皮质投射情况：弓状纤维长段及前段主要投射于腹侧中央前回，额枕下束及钩束主要投射于额叶三角部。额斜行纤维主要投射于额叶岛盖部。（3）阳性语言位点位于腹侧中央前回时主要同弓状纤维长段相关。阳性语言位点位于额叶岛盖部时主要同额斜行纤维相关。阳性语言位点位于额叶三角部时主要同额枕下束相关。结论额下回后部不同位置的语言皮质由不同的皮质下纤维承载，故在额下回后部手术时，不应仅定位保护关键语言皮质以及经典的弓状纤维，还应该依据额下回后部语言阳性位点的部位以及其相应的皮质下连接个体化的进行保护。
- 林雨张恺李帅李松靳静娜金芳秦文韩伟刘志朋殷涛杨学军
- 导航经颅磁刺激技术在运动功能区定位中的应用
- 目的:在显微外科、神经内镜和导航技术的综合应用之下,现在的手术理念已经突破了肉眼的手术禁区,而促进了'神经功能保护前提下最大限度的肿瘤切除'理念的提出。导航经颅磁刺激技术（navigated transcranial m...
- 张恺林雨李帅程铖杨学军
- 沉默LIMK1的表达抑制体外胶质瘤细胞的侵袭与迁移被引量：2
- 2015年
- 目的 研究LIM激酶1（LIMK1）小干扰RNA （siRNA）敲低后对人胶质瘤细胞系SNB19侵袭迁移能力的影响及机制. 方法 （1）免疫组化染色检测对照脑组织及胶质母细胞瘤组织中LIMK1蛋白的表达.（2）将SNB19分为3组：siRNA-LIMK1组（转染siRNA-LIMK1干扰片段）、siRNA-NC组（转染对照siRNA片段）、空白对照组（未转染）.采用实时定量（RT-PCR）法和Western blotting法检测3组细胞中mRNA和蛋白的表达情况.划痕实验和Transwell侵袭实验评价3组细胞的迁移和侵袭能力.免疫荧光法观察3组细胞的定位以及细胞片状伪足形态变化.Western blotting法检测3组细胞基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9以及丝切蛋白（cofilin）、磷酸化cofilin （p-cofilin）的表达. 结果 （1）免疫组化结果显示蛋白在对照脑组织呈弱阳性表达,而在胶质母细胞瘤中呈强阳性表达.（2）siRNA-LIMK1组细胞mRNA和蛋白较其他2组细胞均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.划痕实验和Transwell侵袭实验显示3组细胞创面愈合率、侵袭细胞数分别为34.33％±1.53％、75.67％±2.08％、78.33％±1.53％及40.33±5.03、136.67±5.13、143.33±2.52,差异均有统计学意义（F=608.59,P=0.000;F=515.52,P=0.000）;其中siRNA-LIMK1组创面愈合率、侵袭细胞数较其他2组明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.免疫荧光结果显示LIMK1表达于细胞质特别富集于细胞前缘的片状伪足处,siRNA-LIMK1组细胞片状伪足较siRNA-NC组和空白对照组明显变小甚至不伸展.Western blotting结果显示,与siRNA-NC组和空白对照组比较,siRNA-LIMK1组MMP-2、MMP-9以及p-cofilin的表达量均明显下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;而cofilin的表达量无明显变化,差异无统计学意义（P＞0.05）. 结论 沉默LIMK1的表达可有效抑制体外胶质瘤细胞系的侵袭和迁移,LIMK1可能成为脑胶质瘤的新的治疗靶点.
- 周华杨学军赵鹏飞张辰陈磊朱蒙于圣平周星辰海龙刘波李帅林雨
- 关键词：神经胶质瘤迁移RNA干扰
- 敲低S100A4表达对胶质瘤细胞系SNB19侵袭和迁移的影响被引量：5
- 2014年
- 目的观察siRNA敲低S100A4的表达后对胶质瘤细胞系SNB19侵袭和迁移能力的影响。方法 S100A4干扰RNA(siRNA)敲低SNB19细胞中S100A4的表达(n=3),同时设control组(空白对照组,n=3)和siRNA-NC组(阴性对照组,n=3),采用RT-PCR和western blot方法分别检测S100A4被有效敲低,划痕实验和Transwell实验分别检测细胞的迁移和侵袭能力的变化,western blot法检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和E-cadherin的表达变化,倒置相差显微镜观察细胞片状伪足变化情况。结果 siRNA技术可显著下调SNB19细胞中S100A4 mRNA和蛋白的表达水平,siRNA-NC组和siRNA-S100A4组的mRNA较control组的表达量分别是0.97±0.07和0.21±0.04(P<0.01),三个组的蛋白相对表达量分别为78.12%±2.63%、77.16%±3.00%和37.95%±2.71%(P<0.01);干扰成功后,siRNA-S100A4组与control组相比,细胞的迁移和侵袭能力分别降低了46%和55%,MMP-9和MMP-2的蛋白表达水平分别下调了62%和68%,E-cadherin的表达水平上调了154%,细胞片状伪足较对照SNB19细胞相比明显变小,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论敲低S100A4表达可降低胶质瘤细胞系SNB19的侵袭和迁移能力,提示S100A4可能成为抗胶质瘤侵袭迁移治疗的有效靶点。
- 赵鹏飞杨学军张辰陈磊周华朱蒙王垒垒赵恺于圣平林雨海龙刘波周星辰李帅
- 关键词：S100A4胶质瘤RNA干扰迁移
- 导航经颅磁刺激定位手运动功能区初步研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨导航经颅磁刺激定位双手运动功能区的准确性和安全性。方法采用导航经颅磁刺激对10例右利手的健康志愿者双手第一骨间背侧肌进行刺激,定位双手运动功能区及其边界,记录阳性位点坐标和运动诱发电位,并计算双手运动功能区面积。结果 10例受试者均成功定位双手运动功能区,主要定位于中央前回"Ω"区及其周围;右手运动功能区面积大于左手[(6.22±0.76)cm2对(4.30±0.40)cm^2;t=7.078,P=0.000];其中4例表现出困倦,无一例出现头痛、癫发作等不良反应。结论导航经颅磁刺激定位手运动功能区准确、安全,可作为术前定位运动功能区和研究运动功能重塑的辅助方法。
- 李帅张恺林雨靳静娜金芳许永杰万佳佳秦文刘志朋殷涛陶华英杨学军
- 关键词：经颅磁刺激神经导航诱发电位
- 磁共振数字化手术单元在指导胶质瘤治疗中的作用被引量：1
- 2016年
- 术中核磁共振成像（intraoperative magneticresonance imaging,i MRI）与外科手术的高度集成能够实时、精确、定量地引导脑胶质瘤的手术切除,减少关键脑区神经组织的手术损伤,即时评价手术结果并发现术后并发症[1]。以高场强i MRI为中心建立的数字化神经外科手术单元,将i MRI从基于解剖结构信息,向整合脑功能以及肿瘤组织形态、
- 林雨张恺李帅杨学军
- 关键词：胶质瘤显微手术
- ADAM12基因表达沉默对CD133阳性胶质瘤细胞自我更新能力的影响被引量：4
- 2016年
- 目的研究解整合素-金属蛋白酶12(a disintegrin and metalloprotease 12,ADAM12)基因表达沉默抑制CD133阳性(CD133+)胶质瘤细胞的自我更新能力。方法采用sh RNA重组慢病毒转染技术沉默胶质瘤U87细胞系ADAM12基因表达分为ADAM12基因表达干扰序列组(sh RNA-ADAM12)、阴性对照组(sh RNA-NC)及空白对照(sh RNA-C)组。通过Western blotting以及Real-time PCR验证各组细胞ADAM12表达情况;采用悬浮培养得到胶质瘤细胞球以富集CD133+的胶质瘤细胞;并通过免疫荧光染色技术检测ADAM12与CD133在细胞球与贴壁细胞的表达情况;通过神经肿瘤球形成实验检测三组细胞的自我更新能力;利用Western blotting分别检测三组细胞成球后未分化或分化相关蛋白CD133、GFAP及TUBB3以及Notch通路靶基因Hes1的蛋白表达情况。结果慢病毒转染技术可显著下调U87胶质瘤细胞ADAM12的m RNA及蛋白的表达量,sh RNA-ADAM12组与sh RNA-NC组较sh RNA-C组m RNA的相对表达量为0.22±0.03与0.98±0.06(F=425.37,P<0.01);三组ADAM12蛋白的相对表达量分别为28.72%±2.36%、69.21%±3.92%及69.04%±3.57%(F=145.42,P<0.01);免疫荧光染色显示细胞球中ADAM12与CD133表达量明显高于普通细胞;神经肿瘤球形成实验结果显示,三组成球数分别为45.5±2.3、104.2±5.8以及109.6±6.2,与sh RNA-NC组及sh RNA-C组相比,sh RNA-ADAM12组的成球能力明显降低,差异具有统计学意义(F=147.03,P<0.01)。sh RNA-ADAM12组与sh RNA-C组相比,GFAP与TUBB3蛋白表达量分别上调约166%与146%,CD133与HES1的蛋白表达量分别下调了54%与50%,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 ADAM12基因表达沉默可能通过抑制Notch通路活性降低CD133+胶质瘤细胞的自我更新能力。
- 刘波杨学军张辰于圣平林雨海龙周星辰李帅李涛王伟程铖杨亦寒
- 关键词：解整合素-金属蛋白酶12自我更新
- 导航经颅磁刺激技术对手运动功能区的定位研究被引量：3
- 2017年
- 目的 探讨导航经颅磁刺激在手运动功能皮质定位中的应用方法,以及该技术在神经外科手术规划中与神经重塑中的应用及可重复性.方法 对10名健康志愿者进行导航经颅磁刺激手运动功能区皮质定位,选取拇短展肌和第一背侧骨间肌为目标肌肉,使用预设靶点矩阵配合重复单刺激模式,以目标肌肉肌电图变化为阳性位点筛选标准.对手功能皮质定位结果提取特征点、线、面的数据,建立数据分析处理方法,完成手运动区描计和可重复性判断.结果 全组受试者均顺利完成功能定位,右手拇短展肌和第一背侧骨间肌所对应的皮质运动区面积为（830.60±225.27）mm2与（811.10±275.03）mm2,两条肌肉最强激活点强度分别为（820.00±711.96）μV和（452.40±278.85）μV,平均运动阈值为（60.40±11.68）%输出强度,这些指标在两次实验中均显示出较好的稳定性.特征位点如中心、重心、运动热点、最强激活点及相应线向量的对比中显示出较好的稳定性,但运动区阳性范围结果尚欠稳定.结论 导航经颅磁刺激技术能够完成手运动皮质功能区的描计,在个体水平上精确描计出手运动功能区,并在组水平上保持稳定的可重复性,有助于无创精准描计手运动功能区,以期指导手术规划、病变切除和神经重塑.
- 张恺林雨李帅程铖靳静娜金芳秦文刘志朋殷涛杨学军
- 关键词：脑图经颅磁刺激神经导航
- Notch1通路活化对胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响被引量：7
- 2016年
- 目的观察Notch1通路活化对胶质瘤干细胞（GSCs）迁移和侵袭能力的影响并探讨其潜在机制。方法将U87胶质瘤细胞置于干细胞培养基中悬浮培养，使用免疫磁珠法分选获得CD133阳性的胶质瘤细胞，免疫荧光染色检测CD133及巢蛋白鉴定GSCs。将携带Notch1抑制物核苷酸序列（shRNA-Notch1）、阴性对照核苷酸序列（shRNA-NC）的重组慢病毒转染至体外培养的U87来源的GSCs中，分别作为shRNA-Notch1组、shRNA-NC组，同时设不做处理的空白对照组，在成球后行通过荧光定量PCR检测3组细胞Nowh1 mRNA的表达；Western blotting检测3组细胞Notch1、Hesl、Akt、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白的表达；Transwell细胞迁移和侵袭实验观察3组细胞迁移和侵袭能力的强弱。结果免疫荧光染色检测显示肿瘤细胞球阳性表达神经干细胞标志物CD133和巢蛋白。与shRNA-NC组和空白对照组相比，shRNA-Notch1组GSCs的Notch1 mRNA和蛋白、pAkt、mTOR、pmTOR蛋白表达降低，差异有统计学意义（P〈0．05），而Akt蛋白水平没有明显变化，差异无统计学意义（P〉0．05）。Transwell迁移及侵袭实验均显示与shRNA-NC组和空白对照组相比．shRNA-Notch1组穿膜的细胞数目降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论抑制Notch1通路活性后可能通过PI3K通路来调节GSCs的迁移和侵袭能力。
- 周星辰海龙张辰刘波李帅林雨王伟李涛杨亦寒程铖于圣平杨学军
- 关键词：胶质瘤干细胞NOTCH1细胞迁移细胞侵袭
- ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭的影响被引量：6
- 2015年
- 目的 研究非受体酪氨酸激酶ABL2基因表达沉默对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及机制. 方法 免疫组化染色检测正常脑组织和经病理证实的胶质母细胞瘤组织标本（分别来自天津医科大学总医院神经外科自2012年9月至2014年8月期间的癫痫、胶质瘤手术患者）中ABL2的表达.将携带ABL2抑制物核苷酸序列（shRNA-ABL2）、阴性对照核苷酸序列（shRNA-NC）的重组慢病毒转染体外培养的SNB19胶质瘤细胞,分别作为shRNA-ABL2组、shRNA-NC组,同时设不做任何处理的空白对照组,转染后48 h实时荧光定量PCR检测3组细胞ABL2 mRNA的表达;Western blotting检测3组细胞ABL2、皮层肌动蛋白、Y-421位点酪氨酸磷酸化的皮层肌动蛋白（pY-421 cortactin）的表达;划痕实验和Transwell实验评价各组细胞的迁移和侵袭能力;免疫荧光染色检测ABL2、皮层肌动蛋白在SNB19细胞中的定位情况. 结果 免疫组化染色显示ABL2在正常脑组织中表达较低,在胶质母细胞瘤中表达则较高.与shRNA-NC组、空白对照组比较,转染后shRNA-ABL2组细胞ABL2 mRNA和蛋白、pY421 cortactin蛋白的表达降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;划痕实验显示shRNA-ABL2组细胞迁移数（72.33 ±7.64）少于shRNA-NC组、空白对照组（187.67±5.03、190.33±7.23）,Transwell实验显示shRNA-ABL2组穿膜细胞数低于shRNA-NC组、空白对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.免疫荧光染色结果显示ABL2与皮层肌动蛋白在细胞前端伪足处共定位. 结论 ABL2在胶质母细胞瘤组织中表达较正常脑组织高.沉默ABL2表达可能通过调节pY-421 cortactin的水平来抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭.
- 陈磊朱蒙于圣平张辰赵鹏飞周华海龙刘波李帅周星辰林雨杨学军
- 关键词：神经胶质瘤皮层肌动蛋白
