顾翔
- 作品数：8 被引量：9H指数：2
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- 衔接蛋白AP-2在不同发育时期小鼠耳蜗毛细胞中的表达被引量：1
- 2015年
- 目的通过检测不同发育阶段小鼠耳蜗毛细胞衔接蛋白AP-2蛋白的表达,初步探讨其在听觉发生、形成中的作用。方法选用出生后7日(P7)、15日(P15)、35日(P35)及16月龄小鼠各20只,分别代表新生小鼠、听觉发育阶段小鼠、听觉发育成熟小鼠及老年小鼠,对其进行ABR检测,用免疫荧光标记技术结合激光共聚焦显微镜观察各发育阶段小鼠耳蜗AP-2蛋白的定位与表达,用qRT-PCR技术检测小鼠耳蜗AP-2基因mRNA的表达。结果 P15、P35及16月龄小鼠ABR反应阈分别为18.67±1.21、13.83±1.47、37.83±7.68dB nHL,P7组小鼠未引出反应波形。在小鼠内耳发育不同阶段均有不同程度的AP-2蛋白表达,主要定位于耳蜗内毛细胞胞浆,集中表达于内毛细胞基底部与带状突触靠近传入神经元区域,P7、P15、P35及16月龄组小鼠耳蜗AP-2蛋白荧光染色密度值分别为190.91±17.27、494.06±27.63、838.41±38.23和682.65±72.22;AP-2mRNA相对表达量分别为0.53±0.09、1.03±0.02、1.00±0.09和1.03±0.06;与新生小鼠相比较,随小鼠听觉的产生和形成,耳蜗AP-2蛋白表达水平逐渐升高(P<0.01),免疫荧光染色提示老年性聋小鼠AP-2蛋白在内毛细胞的表达量较P35小鼠减少(P<0.05),但qRT-PCR分析AP-2基因mRNA的表达水平与成熟小鼠(P15)差异无统计学意义(P>0.05)。结论在小鼠听觉发育成熟阶段,随小鼠日龄增加耳蜗AP-2蛋白表达逐渐增强,提示AP-2蛋白的表达水平可能与听觉的发生、形成和维持密切相关。
- 顾翔陈知己蔡婷宋锐周小清袁伟
- 关键词：内毛细胞年龄相关性听力损失小鼠
- Dynamin在不同年龄段小鼠耳蜗中的表达被引量：3
- 2015年
- 目的 观察不同年龄段小鼠耳蜗中发动蛋白（Dynamin）各亚型的表达情况,初步探讨Dynamin与年龄相关性听力损失的关系.方法 分别取3周龄（幼年组）、10周龄（成年组）和16月龄（老年组）昆明小鼠每组各10只作为研究对象,检测其听性脑干反应（ABR）阈值;通过免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜观察耳蜗内毛细胞中Dynamin各亚型的定位表达情况;采用实时荧光定量多聚酶链反应（quantificational real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR）检测各组小鼠耳蜗中Dynamin各亚型mRNA的转录水平.采用SPSS 18.0统计学软件进行数据分析.结果 成年组与幼年组小鼠ABR反应阈差异无统计学意义（t=-5.273,P=0.076）,而老年组ABR反应阈明显升高,与幼年组和成年组相比差异具有统计学意义（t=-8.365,P=0.000;t=-6.191,P=0.000）.Dynamin各亚型在各年龄段小鼠耳蜗内毛细胞中均有表达,幼年组与成年组小鼠Dynamin-1、Dynamin-2均匀分布于细胞质中;老年组Dynamin-1在细胞核下方区域有部分缺失,Dynamin-2只表达于细胞核周围;各年龄组Dynamin-3均散在分布于细胞核下方基底部靠近螺旋神经节细胞树突的区域.qRT-PCR结果显示：Dynamin-1的表达量随年龄增长逐渐减少,差异具有统计学意义（F=10.410,P=0.011）;Dynamin-2在成年组小鼠耳蜗中表达最高（F=24.575,P=0.000）;未能检测出Dynamin-3的表达.结论 Dynamin各亚型在小鼠耳蜗内毛细胞中均有不同程度的表达;Dynamin-1、2随着年龄的增加表达发生改变,可能通过调节内毛细胞突触内吞作用影响听力;Dynamin-3由于表达量较少,与听觉的关系尚不明确.
- 蔡婷陈知己顾翔张学渊袁伟
- 关键词：耳蜗年龄组小鼠
- 衔接蛋白AP-2蛋白在小鼠耳蜗中的表达及意义被引量：3
- 2015年
- 目的:研究衔接蛋白AP-2在小鼠耳蜗中的定位与表达,探讨AP-2蛋白与内毛细胞胞吞的相关性。方法:选择健康成年C57BL/6J小鼠,应用免疫荧光标记技术结合激光共聚焦显微镜观察AP-2蛋白在其耳蜗毛细胞的定位与表达。结果:AP-2蛋白主要定位于小鼠耳蜗内毛细胞细胞质,集中表达于内毛细胞基底部与带状突触靠近传入神经元区域。结论:AP-2蛋白在成年小鼠耳蜗中主要表达于内毛细胞突触活化部位,可能与内毛细胞突触囊泡的内吞作用相关,为深入研究AP-2蛋白在内耳听觉生理和病理机制中的作用奠定了基础。
- 顾翔宋锐陈知己袁伟
- 关键词：内吞内毛细胞
- 内吞相关蛋白Myosin Ⅵ/Disabled-2在小鼠耳蜗毛细胞的表达及年龄相关性变化的研究被引量：1
- 2015年
- 目的:研究不同年龄小鼠耳蜗毛细胞内吞相关蛋白MyosinⅥ和Disabled-2(Dab2)的表达及分布特点。方法:分别选取出生后2周、5周、9周及16月龄的昆明小鼠各10只,采用免疫荧光标记联合激光共聚焦显微镜扫描耳蜗基底膜铺片,观察MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达定位,通过荧光定量逆转录PCR测定并比较不同年龄组小鼠耳蜗2种蛋白mRNA的表达水平。结果:MyosinⅥ及Dab2蛋白在内外毛细胞均有表达,支持细胞未见表达,且内毛细胞2种蛋白均存在局部高表达的亚细胞区域。比较不同年龄组MyosinⅥ荧光染色图像后发现,2周龄和16月龄小鼠荧光强度均低于5周龄和9周龄小鼠。比较不同年龄组小鼠2种蛋白mRNA表达后发现,2周龄小鼠mRNA相对表达水平均低于9周龄小鼠,差异有统计学意义(P<0.01),5周龄及16月龄组小鼠分别与9周龄小鼠相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:调控网格蛋白介导内吞过程的MyosinⅥ及Dab2蛋白表达于内外毛细胞,内毛细胞顶区表皮板及附近胞质可能是这一过程的主要部位。随着年龄的增长,MyosinⅥ及Dab2蛋白的表达可能会发生改变,网格蛋白介导内吞过程效率可能因此相继发生变化,内毛细胞功能损伤可能与此有关。
- 陈知己顾翔蔡婷宋锐周小清袁伟
- 关键词：内毛细胞
- AP-2蛋白调控网格蛋白介导突触囊泡胞吞的研究进展被引量：1
- 2015年
- 神经元间的信息传递依赖于神经递质的释放,这一过程离不开正常有效的囊泡循环机制,突触囊泡循环是调控突触囊泡水平和维持神经递质释放的基础。囊泡回收则是循环过程中保证囊泡从突触前膜回收至胞内,参与新一轮囊泡形成和再生的重要保障。网格蛋白介导的内吞是突触囊泡回收的主要途径,衔接蛋白AP-2(adaptin-2)是参与这一内吞过程不同时期的关键蛋白,其通过绑定不同蛋白分子分别从结构和动力的层面参与了囊泡回收过程,AP-2对网格蛋白介导的突触囊泡胞吞过程具有重要意义。本文结合国内外最新研究报道,简要综述了AP-2的结构特点、分子基础、AP-2蛋白调控网格蛋白介导突触囊泡的胞吞及其与听力的关系。
- 顾翔袁伟
- 关键词：胞吞突触囊泡内毛细胞
- 鼻咽纤维血管瘤20例疗效及预后相关性分析
- 目的 探讨不同临床分期鼻咽纤维血管瘤手术方式的选择以及手术治疗前后影响患者综合获益的重要因素.方法 收集我院近十年来20例鼻咽纤维血管瘤患者的手术资料,分析患者术前分期、手术方式、术中出血量、术后并发症、预后、复发及随访...
- 顾翔陈知己袁伟
- 突触囊泡融合蛋白Munc18-1在小鼠耳蜗内毛细胞的定位表达
- 2015年
- 目的研究突触囊泡融合蛋白Munc18-1在小鼠耳蜗内毛细胞的表达及定位。方法应用激光共聚焦成像技术,通过免疫荧光单标法检测Munc18-1蛋白在小鼠耳蜗内毛细胞中的表达,免疫荧光双标法检测其与带状突触蛋白Ct BP2的定位关系。结果通过激光共聚焦成像技术检测发现,免疫荧光单标染色显示内毛细胞胞质中有高浓度的Munc18-1蛋白表达,免疫荧光双标染色结果显示Munc18-1蛋白聚集在Ct BP2蛋白附近。结论 Munc18-1蛋白在耳蜗内毛细胞中有表达,聚集在突触蛋白Ct BP2周围,可能与维持突触囊泡融合、胞吐功能紧密相关。
- 宋锐顾翔陈知己袁伟
- 关键词：CT突触囊泡内毛细胞
- 肿瘤抑制因子p96蛋白在小鼠内耳毛细胞的表达
- 2015年
- 目的研究肿瘤抑制因子p96蛋白在昆明小鼠内耳毛细胞的定位表达特点。方法采用间接免疫荧光法标记耳蜗基底膜并铺片,激光共聚焦显微镜分层扫描观察p96蛋白的表达定位。结果内、外毛细胞中均可观察到p96蛋白荧光标记,且该蛋白在毛细胞胞质中的表达并不均匀。在内毛细胞胞质中,细胞顶部表皮板及附近胞质区有类圆形的P96蛋白高表达区。结论肿瘤抑制因子p96蛋白表达于内、外毛细胞,在内毛细胞顶区有着显著的局部高表达特征。结合该蛋白的生理功能,推测内毛细胞顶区可能是囊泡内吞、物质交换的一个重要亚细胞部位。
- 陈知己蔡婷宋锐顾翔周小清袁伟
- 关键词：抑癌基因毛细胞听力
