邓凡
- 作品数：14 被引量：39H指数：3
- 供职机构：中国人民解放军第一军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学更多>>
- EGFR反义RNA的转染对人类鼻咽癌CNE-2细胞EGFR的表达下调及恶性表型的抑制(英文)被引量：1
- 2003年
- 目的利用反义RNA 抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应。方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR 反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN。125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,最后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况。结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低。注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低。结论这些实验结果提示EGFR 反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生。
- 邓凡王瑜曾方银邹志鹏白晓春陆地柯志勇罗深秋
- 关键词：鼻咽癌CNE-2细胞EGFR反义RNA
- 人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体的构建被引量：2
- 2004年
- 目的构建带信号肽和不带信号肽的人血小板衍生生长因子B(PDGF-B)链基因酵母表达载体,探讨该基因在酵母中的表达效率和活性。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人血管内皮细胞总RNA中扩增出PDGF-B的cDNA,克隆入pGEM-T载体,进行序列测定。进而克隆至酵母表达质粒pMETB和pMETαA并进行重组子双酶切鉴定。结果扩增获得了含信号肽(578 bp)和不含信号肽(340 bp)的编码PDGF-B链基因;构建了PDGF-B的酵母表达载体pMETB-PDGFB1,pMETαA-PDGFB2。测序结果显示,重组载体中目的基因序列与GENE BANK公布的序列一致。结论人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体构建成功,为进一步在酵母中的高效表达奠定基础。
- 杨春露陈建庭邓凡唐焕章谭小云罗深秋
- 关键词：酵母
- EGF刺激下PIP_2水解的数学模型
- 2004年
- 为了研究表皮生长因子刺激下细胞膜上磷脂酰肌醇二磷酸水解的动力学特性,我们根据质量作用定律和准稳态近似原则建立数学模型,模拟磷脂酰肌醇二磷酸的代谢;建立了磷脂酰肌醇二磷酸和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程,讨论了各个参数对磷脂酰肌醇二磷酸浓度变化趋势的影响。这个数学模型描述了磷脂酰肌醇二磷酸代谢的生物学特性以及关键信号分子间的浓度依赖关系。
- 苏永春邓亲恺罗深秋邓凡陆地白晓春
- 关键词：数学模型动力学表皮生长因子
- 新生大鼠磷脂酶C-γ1mRNA的表达变化被引量：2
- 2004年
- 目的探讨新生大鼠早期各主要脏器磷脂酶C-γ1(PLCγ1,基因为PLCG1)的mRNA表达状况。方法应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分析大鼠出生后1、3、5、7 d及2、3、5周等7个时期肝、肺、肾和脑等4种脏器共28例样本的PLCG1的表达变化,以看家基因磷酸甘油脱氢酶(GAPDH)为内参照,同步逆转录PLCG1特异性片段和内参片段,以二者积分吸光度比值作为PLCG1 mRNA的相对表达量。结果肝、肺、肾和脑4种脏器组织PLCG1在出生后早期的不同时期均有较强表达,并且各时期之间的表达有显著性差异(P均<0.01),第1天肝脏组织中PLCG1几乎没有表达,第7天脑组织的表达最高;而在同一时期4种不同的组织间PLCG1的表达也有显著性差异(P均<0.01)。结论同种脏器组织在不同的发育时期及在同一时期不同脏器组织之间PLCG1的差异性表达提示,PLCG1可能参与了大鼠早期生长发育过程中细胞的增殖与分化。
- 刘忠英罗深秋邓凡赵永忠李西平
- 关键词：逆转录聚合酶链反应磷脂酶C-Γ1基因表达信号转导
- dsRNA介导的RNA干扰被引量：16
- 2001年
- 邓凡罗深秋
- 关键词：DSRNARNAI转录后基因沉默RNA干扰
- 表皮生长因子受体介导的PLC-g1水解PIP_2的数学建模被引量：2
- 2004年
- 目的探讨表皮生长因子刺激下磷脂酶C-g1(PLC-g1)水解细胞膜上PIP2(PIP2)的动力学特性。方法根据质量作用定律,利用微分方程对PIP2的代谢途径进行数学建模。结果建立了PIP2水解过程中关键产物浓度的微分方程,分析了各个参数对这些水解产物的影响。结论这个数学模型为进一步描述PIP2代谢循环的生物学特征和主要产物间浓度依赖关系的动态变化奠定了基础。
- 苏永春邓凡陆地白晓春谭小丹董爱荣罗深秋邓亲恺
- 关键词：表皮生长因子受体水解数学建模
- 人全长PLCγ1基因真核表达载体的构建及鉴定(英文)被引量：1
- 2004年
- 目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1。通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Westernblotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达。结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3878bp)。重组质粒经HindⅢ-NotⅠ酶切后,得到3878bp(PLCγ1基因)及6100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约1300bp及约8500bp两个片段,与预期一致。DNA测序也证实了重组质粒的正确。经RT-PCR和Westernblot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞。结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础。
- 李秀梅邓凡曾位森华亮陆地李明王宏刘忠英罗深秋
- 关键词：真核表达载体RT-PCR
- 小鼠成纤维细胞中PLC水解肌醇磷脂的数学模型被引量：3
- 2004年
- 目的 :构建小鼠成纤维细胞中磷脂酶C水解肌醇磷脂的数学模型 .方法 :以细胞实际信号传递过程为基础、以准稳态近似为原则 ,利用微分方程建立数学模型模拟肌醇磷脂的代谢过程 .结果 :建立了一磷酸肌醇和表皮生长因子受体间浓度关系的微分方程 ,并以此来描述肌醇磷脂的水解速度 .结论 :本数学模型描述了肌醇磷脂代谢的生物学特征以及主要产物间的浓度依赖关系 ,讨论了各个参数对肌醇磷脂代谢的数学模型的影响 ,分析了磷酸肌醇
- 苏永春陆地邓凡白晓春罗深秋邓亲恺
- 关键词：磷脂酶C肌醇磷脂数学模型
- 过氧化氢抑制三氧化二砷诱导的伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡被引量：4
- 2004年
- 目的探讨过氧化氢(H2O2)对三氧化二砷(As2O3)诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响及双染法荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用。方法应用As2O3诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞株BJAB细胞凋亡,采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)核染料双染法荧光显微镜和透射电镜对细胞死亡进行观察及定量分析。结果BJAB细胞经As2O3处理后,荧光显微镜下可见大多数细胞出现细胞染色质凝集、核边集、核碎裂等凋亡的特征性改变;在低剂量(200 μmol/L)H2O2的影响下,抑制了As2O3诱导的细胞凋亡,降低细胞的死亡率;细胞的死亡方式由凋亡转变为核固缩性坏死,表现为既无凋亡的特征性改变,又非典型的细胞坏死,死亡细胞的细胞核呈固缩状态而非肿胀。结论低浓度(200 μmol/L)H2O2可抑制临床治疗浓度的As2O3诱导的人类伯基特氏淋巴瘤BJAB细胞凋亡;双染法荧光显微镜技术不但可明确区分细胞凋亡及坏死,还可判断早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞,并可进行定量分析,是一种良好的细胞凋亡检测方法。
- 陆地白晓春刘斌李秀梅邓凡李明程宝鸾罗深秋
- 关键词：过氧化氢三氧化二砷细胞凋亡
- 寻找实现经络生理调控功能的信息载体——兼论经络本质研究的新途径被引量：6
- 2003年
- 目的 :寻找实现经络生理调控功能的信息载体 ,为阐明经络本质提供新的思路和研究方法。方法 :应用细胞分子生物学和信号转导的理论、方法并援引相关实验数椐。结果 :针刺穴位时 ,被刺细胞产生了Ca2 + 振荡 (在胞内 )并引发Ca2 + 波 (在胞间 ) ,其幅频信号中可能蕴含有经络通路和生理功能调节信息。结论 :钙离子 (Ca2 + )以及配合针刺实现在细胞间Ca2 + 波接力传递的三磷酸肌醇(IP3 ) ,可能是人们长期探寻的调控人体经络网络的信息载体 ;它们联同在经线上的细胞缝隙连接蛋白(connexon) 。
- 邓亲恺殷平善王升旭邓凡
- 关键词：经络生理调控信息载体经络本质
