许春春
- 作品数：5 被引量：20H指数：2
- 供职机构：长春中医药大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生理学生物学更多>>
- 嗜热β-葡萄糖苷酶的原核表达、纯化及其活性被引量：2
- 2014年
- 目的原核表达、纯化嗜热β-葡萄糖苷酶,并检测其活性。方法从嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans基因组DNA中PCR扩增β-葡萄糖苷酶基因,插入原核表达载体p ET-28a中,构建重组表达质粒,转化E.coli BL21(DE3)Codon Plus,筛选阳性重组菌,IPTG诱导表达。采用镍柱亲和层析法纯化重组酶;紫外吸收法检测酶活力和底物选择性。结果 PCR退火温度为67℃时,可扩增得到单一的目的基因条带;测序结果显示,重组表达质粒中目的基因的核苷酸序列与细菌基因组中该基因序列同源性为100%,未发现终止密码子及氨基酸的改变;表达的重组酶相对分子质量约为54 000;纯化的目的蛋白纯度达95%,浓度为10 mg/L;该重组酶能够高效催化对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(p NPG)的水解,60℃条件下的比活力达124 293.5 U/mg。结论成功在E.coli中表达了嗜热细菌Fervidobacterium pennivorans来源的具有较高催化活力和底物专一性的β-葡萄糖苷酶。
- 王馨莹冯丽许春春于珊珊
- 关键词：嗜热细菌Β-葡萄糖苷酶原核细胞酶活性
- 重组嗜热β-葡萄糖苷酶转化稀有人参皂苷Rd和CK被引量：8
- 2016年
- 利用高效液相色谱(HPLC)法,对重组嗜热β-葡萄糖苷酶(Fpglu1)转化稀有人参皂苷(Rd和CK)进行研究,并表征了其催化动力学参数.利用同源模建和分子动力学模拟等生物信息学技术,探究了Fpglu1转化人参皂苷的结构基础及其相互作用.结果表明,Fpglu1能够水解人参总皂苷生成稀有皂苷Rd和CK,其催化人参皂苷Rb_1,Rb_2和Rc的K_m值分别为0.318,1.840和5.269 mmol/L;酶的转换数(k_(cat))值分别为144.191,0.572和0.011 s^(-1).当转化时间分别为6和102 h时,Rd和CK的产率达到最大,分别为60%和93%.通过对该酶的结构预测及皂苷分子的对接研究发现,底物位于由疏水性氨基酸构成的底物口袋中,氨基酸残基Glu194和Glu367是参与催化作用的关键,且实验测得的酶促反应动力学参数(K_m)与对接的相互作用能量值存在线性关系.
- 许春春于渤浩王红蕾李晶刘淑莹于珊珊
- 关键词：Β-葡萄糖苷酶生物转化
- 超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用
- 本发明涉及一种超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用，属于生物技术工程技术领域。超嗜热糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所述，超嗜热糖苷酶突变体在制备稀有人参皂苷CK的应用。超嗜热糖苷酶突变体，具...
- 于珊珊刘淑莹李晶郑飞许春春
- 人参皂苷的口服吸收及体内转化被引量：10
- 2014年
- 人参中的活性成分人参皂苷具有较好的生物活性和药理作用,疗效确切,毒副作用小,应用广泛,然而其易被胃酸分解、肠内菌群代谢,且肠黏膜通透性差,导致其口服生物利用度极低。本文对人参皂苷的口服给药药代动力学特点及体内生物转化作用进行了概述,并对其未来研究方向进行了展望,为今后的研究提供新的思路。
- 李晶戴雨霖郑飞许春春冯丽王馨莹郑柏松于珊珊
- 关键词：人参皂苷口服生物利用度
- 超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用
- 本发明涉及一种超嗜热糖苷酶突变体及其在人参皂苷CK制备中的应用，属于生物技术工程技术领域。超嗜热糖苷酶突变体的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所述，超嗜热糖苷酶突变体在制备稀有人参皂苷CK的应用。超嗜热糖苷酶突变体，具...
- 于珊珊刘淑莹李晶郑飞许春春
- 文献传递
